氨基酸对芽孢杆菌ATCC21616产腺苷的影响

研究了腺苷合成途径中不同前体氨基酸对芽孢杆菌ATCC21616产腺苷的影响。其中谷氨酸对腺苷合成的促进作用最大,能提高产苷30%以上。谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸也能促进腺苷合成,分别提高16%,14%,10%和6%。进一步研究添加谷氨酸后发酵液中NH4 浓度、有机酸浓度和胞内NAD 浓度的变化,发现添加谷氨酸能提供稳定的NH4 供应,并提供重要的代谢中间物α-酮戊二酸。同时,发酵液中乙酸和丙酮酸的浓度比对照低,胞内NAD 浓度较高,糖酵解生成的丙酮酸能顺利地进入TCA循环,从而能为菌体和腺苷合成提供充足的能量和前体,促进腺苷的合成。     

溶氧对谷氨酸棒杆菌发酵产谷氨酸代谢的影响

分别控制0、5%、30%3种溶氧水平进行谷氨酸分批发酵,考察了3种溶氧水平下谷氨酸棒杆菌发酵的代谢响应。结果表明,随着溶氧降低,发酵液中柠檬酸和α-酮戊二酸的含量降低,三羧酸(TCA)循环还原臂途径中的有机酸含量增加,丙氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸含量也有所增加,在溶氧为0时,乳酸和乙酸大量积累。通过分析不同溶氧水平下的相关酶活和胞内氧化还原状态,发现随着溶氧降低,谷氨酸脱氢酶酶活降低,乳酸脱氢酶酶活升高,胞内氧化还原电势升高,它们的共同作用使氧限制条件下发酵的代谢流流向TCA循环的还原臂途径和乳酸合成途径,导致谷氨酸产量下降。     

盐胁迫对菊芋幼苗生长的影响

采用盆栽砂培试验,研究了不同浓度(0、20、40、80、150、200mM)的盐(NaCl)胁迫对潍坊当地菊芋幼苗的影响。结果表明:与对照相比,低浓度(20、40mM)的盐胁迫,菊芋幼苗的鲜干重,叶绿素含量变化不大,随着浓度的增加(80mM),菊芋幼苗的鲜干重,叶绿素a含量开始下降;当NaCl浓度达到150mM和200mM时,菊芋幼苗生长明显受抑制而逐渐死亡。研究结果说明,潍坊当地菊芋具有较高的耐盐性。     

α-酮戊二酸和丙酮酸的分光光度法同时测定

本文探讨了用分光光度法同时测定α-酮戊二酸和丙酮酸的条件。在0.3mol/L氢氧化钠介质中,这两种与2,4-二硝基苯肼所生成的腙的最大吸收波长不同,分别为390与450nm。且两个(日宗)溶液的吸光度线性加和性较好,因此可解联立方程组同时测定这两种酮酸的浓度,并将取370,390,420,450,480,510和540nm七个波长测吸光度值组成的超定方程组,以Householder法用计算机求解,所得的结果与之比较。由t检验说明两种结果在统计上无显著差异,表明选取390与450nm两个波长已经够用。由于用Reitman-Frankel法测谷丙转氨酶时作为底物的α-酮戊二酸对丙酮酸的显色有干扰,造成方法的重现性差、线性范围窄等问题。本文的工作有可能用于谷丙转氨酶的测定。     

钝齿棒杆菌B-9有关谷氨酸合成途径的研究

实验测定了B-9菌二级种子和三个发酵时期的无细胞制剂的若干种酶的活性。NADPH联系的谷氨酸脱氢酶、谷丙和谷草转氨酶均有显著活性,种子缺天冬氨酸酶活性。NADPH联系的谷氨酸合成酶活性接近于谷氨酸脱氢酶活性的1/10。谷氨酸合成途径,应以谷氨酸脱氢酶催化的α-酮戊二酸氨化作用为主;但谷氨酸合成酶和天冬酶酸酶也可能参予作用。葡萄糖降解类似于其它生产菌株,通过EMP途径和HMP歧路。存在乙醛酸旁路,α-酮戊二酸氧化活力弱。磷酸烯醇丙酮酸羧化酶和依赖于NADP的苹果酸酶活性均低。     

光合细菌Rhodobacter sphaeroides的醋酸代谢

利用PSB处理高浓度有机废水是一项十分诱人的废水处理新技术和废水资源化途径。本文就R.sphaeroides对醋酸的利用性,共存有机酸对醋酸代谢的影响进行了试验研究,并对它醋酸代谢的可能途径作了探讨。 R.sphaeroides生长的最适醋酸浓度为25 mmnol.dm~(-3),醋酸浓度增至200mmol.dm~(-3)时,虽然R.sphaeroides迟缓期长达24小时以上,但仍能缓慢地生长。共存的琥珀酸对R.sphaeroides的醋酸代谢有明显影响。当TCA循环中的α-酮戊二酸脱氢酶被抑制时,R.sphae-roides的生长几乎完全受阻,当乌头酸酶被抑制时,醋酸仍能被利用。R.sphaeroides中有苹果酸合成酶活性,没检测到异柠檬酸裂介酶和高柠檬酸合成酶的活性。因而R.sphaeroides可能既不通过TCA循环右半部分和乙醛酸循环生成乙醛酸,也不通过高柠檬酸循环生成乙醛酸,进而由苹果酸的合成而生成草酰乙酸。     

光合细菌Rhodobacter sphaeroides的醋酸代谢

利用 PSB 处理高浓度有机废水是一项十分诱人的废水处理新技术和废水资源化途径。本文就 R.sphaeroides 对醋酸的利用性,共存有机酸对醋酸代谢的影响进行了试验研究,并对它醋酸代谢的可能途径作了探讨。R.sphaeroides 生长的最适醋酸浓度为25mmol·dm~(-3),醋酸浓度增至200mmol·dm~(-3)时,虽然 R.sphaeroides 迟缓期长达24小时以上,但仍能缓慢地生长。共存的琥珀酸对 R.sphaeroides 的醋酸代谢有明显影响。当 TCA 循环中的α-酮戊二酸脱氢酶被抑制时,R.sphae-roides 的生长几乎完全受阻,当乌头酸酶被抑制时,醋酸仍能被利用。R.sphaeroides 中有苹果酸合成酶活性,没检测到异柠檬酸裂介酶和高柠檬酸合成酶的活性。因而 R.sphaeroides 可能既不通过 TCA 循环右半部分和乙醛酸循环生成乙醛酸,也不通过高柠檬酸循环生成乙醛酸,进而由苹果酸的合成而生成草酰乙酸。     

柠檬酸对 CHO 细胞生长和代谢的影响

研究了重组中国仓鼠卵巢细胞(CHO)批培养过程中柠檬酸对细胞生长和代谢的影响。结果表明:柠檬酸明显抑制了细胞的生长。与对照组相比,添加12 mm o l/L柠檬酸的处理组细胞的葡萄糖比消耗速率(QG lc)降低了37.5%,渗透压提高了10.0%,乳酸生成量与葡萄糖消耗量的比值增加了27.0%,氨生成量与谷氨酰胺消耗量的比值也增加了。在谷氨酰胺代谢过程中,更多的谷氨酰胺经谷草转氨酶途径生成α-酮戊二酸,参与能量代谢。柠檬酸促使细胞更多地被捕获在G 1期,阻碍细胞的DNA合成,抑制细胞增殖,并促进蛋白的表达。     

因子分析法的应用(谷丙转氨酶的测定)

本文用因子分析法对分光光度同时测定α-酮戊二酸和丙酮酸的数据进行处理,得到了比House-holder法求解超定方程组或二元一次联立方程组更为准确的结果。因子分析法可以给出体系存在的组分数,估计实验误差,而且在计算各组分浓度时剔除原始实验数据中部分误差的影响。此外,其中目标变换所得标准溶液浓度新值可以作为同时分析方法自洽性的检验。本文应用因子分析法求出的二种酮酸浓度值与标准加入值比较,相对误差约为±10%。这为我们改进转氨酶测定的Reitman-Frankel法提供了较好的计算方法。     

低温胁迫下线粒体氧化酶活化能的适应性变化

本文以自然生长条件下的大头茶为材料，测定了随气温下降，叶片线粒体α-酮戊二酸氧化酶活力及膜脂肪肪酸组分的变化，并据酶活力变化绘Arrhenius图，结果表明，随气温下降，膜脂脂肪酸不饱和度增加，线粒体膜结合的α-酮戊二酸氧化酶活化能折点温度下降，有利于膜在低温下稳定性的提高。     

盐和过氧化氢胁迫下交替氧化酶调节根生长和细胞死亡

用不同浓度的NaCl或外源过氧化氢(H_2O_2)溶液处理野生型(WT)拟南芥和交替氧化酶(alternative oxidase,AOX)基因反义抑制突变体(AS-12)拟南芥,发现随NaCl和过氧化氢浓度的增加,两种拟南芥幼根生长速率降低,且出现了明显的细胞死亡。在50和100 mM NaCl或在50 mM H_2O_2处理下,与WT植株相比,AS-12植株幼根的生长速率更低,且组织的细胞死亡程度也更加明显。150 mM NaCl或100及200 mM H_2O_2处理导致AS-12与WT幼根的生长停止和严重的细胞死亡,但两种植株幼根在生长速率和细胞死亡程度上无明显差别。以上实验结果说明交替氧化酶在一定水平的盐胁迫和氧化压力下能够影响幼根的生长和细胞死亡的发生。     

铅离子对两种叶用芥菜生长影响的初步研究

利用在配制植物生长的营养液中加入不同浓度的铝离子来研究其对竹芥和南风芥这两种芥菜生长的影响。结果表明,南风芥对Pb的敏感性比竹芥强。在50mg．L。铅浓度下,竹芥的生长基本不受影响,而南风芥在10mg·L^-1的铅浓度下,其生长就受到显著的抑制。在本试验条件下,提高Pb浓度显著地降低了竹芥和南风芥对K的吸收,但对N和P吸收的影响较小。竹芥和南风芥体内的Pb浓度都随着外界Pb浓度的增加而提高,但吸收进入体内的Pb主要集中在地下部,但南风芥转运Pb至地上部的能力比竹芥强。     

视黄酸对BEL—7402细胞酶活性及基因表达的影响

人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞分别以５μｍｏｌ／Ｌ、２０μｍｏｌ／Ｌ和５０μｍｏｌ／Ｌ的视黄酸（ＲＡ）处理后,细胞生长明显受抑,平均细胞群体倍增时间延长,并呈ＲＡ浓度及处理时间依赖性关系．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理的细胞中,ｒ－谷氨酰转肽酶（ｒ－ＧＴ）活性自给药后第２天即持续下降,至第６天降至４４．５％,而酪氨酸－α－酮戊二酸转氨酶（ＴＡＴ）活性则持续增高,至第６天较对照组高近１倍．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理５ｄ后,ＲＮＡ斑点杂交分析表明ｐ５３基因转录加强,而Ｎ－ｒａｓ基因表达下降,提示该两基因的表达变化可能在ＢＥＬ－７４０２细胞的生长抑制及逆转过程中起重要作用,有关机制尚待深入研究．     

旋扭山绿豆快生型根瘤菌DI51菌株的研究

作者从旋扭山绿豆(Desmodium intortum)根瘤中分离到快生型根瘤菌DI51菌株.其生长速度在指数生长期为0.222代/时,在30℃下液体振荡培养30～48小时后明显混浊.容易利用蔗糖、蕈糖、鼠李糖、甘露醇和α—酮戊二酸等多种碳源,而不利用淀粉和纤维素.能利用磷酸氢二铵和谷氨酸等氮源,但利用酵母膏最好,不利用蛋白胨和尿素.在酵母膏—甘露醇或蔗糖或葡萄糖等培养基上降低pH使B·T·B(溴麝香草酚兰)变黄,而在酵母膏—柠檬酸、丙酮酸等培养基提高pH使B·T·B变蓝或深蓝.不产生3—酮基乳糖.7天使石蕊牛奶培养基pH升高和形成乳清环,而30天后变酸.研究结果表明DI51菌株是Desmodium属中一些种的一株快生型有效根瘤菌株.     

土曲霉发酵过程中菌形和有机酸积累对产物合成的影响

对土曲霉(Aspergillus terreus)产洛伐他汀过程中胞内外有机酸浓度进行测定,发现菌形对发酵过程胞内外有机酸浓度和洛伐他汀的产量有很大的影响.在发酵过程中形成球状菌比丝状菌更有利于洛伐他汀的合成,并且球状菌的胞内有机酸浓度普遍高于丝状菌.通过把有机酸与产素关联,发现在高产批次中胞内柠檬酸,a-酮戊二酸以及丙二酸大量积累,并且在产素期维持三羧酸循环的低通量能促进洛伐他汀高产.     

趋磁细菌研究：II.趋磁细菌WD—1的生长和磁小体的合成条件

报道了趋磁细菌ＷＤ－１生长和磁小体合成的最适条件，在ｐＨ６．７，２８℃和静止培养条件下，每１００ｍＬ含５０～１００ｍｇ柠檬酸或１００～１５０ｍｇα－酮戊二酸和２０ｍｇ硫酸铵分别是ＷＤ－１生长的最适碳、氮源、碳氮比以５：１或４：１为好，每１００ｍＬ含５０ｍｇ柠檬酸、７５～１２５ｍｇα－酮戊二酸、７５ｍｇ酒石酸或１７５ｍｇ乙酸钠，１０ｍｇ硝酸钠或１０～２０ｍｇ硫酸铵，１５μｍｏｌ．Ｌ＾比然蛄?     

钙对食用蓝藻葛仙米生长、形态建成和光合作用的影响

探讨钙对葛仙米生长、形态建成和光合作用的影响。结果表明:在0、0.24和10 mmol·L-1三种钙浓度条件下培养14 d,葛仙米比生长速率μ值无显著差异,但是葛仙米球体百分数分别增加到40%,50%和85%.随着钙浓度的提高,光饱和点Ik、光补偿点Ic、暗呼吸速率Rd、光合效率α均变化幅度不大,但是其Pmax显著增加了16%.相对于无外源钙条件下,较高钙浓度水平(10 mmol·L-1)条件下培养的葛仙米的Vmax和K0.5(DIC)也分别显著性增加了51%和28%.该结果说明高钙浓度可以促进葛仙米的形态建成和提高其光合能力。     

螺旋藻放氢的研究

螺旋藻含有可逆性氢酶，在合适的条件下能催化放氢。研究表明：当培养基的ｐＨ值为８．５￣９．５，气相氧浓度为１％的条件时，能使螺旋藻放氢达到最大效率。外加葡萄糖、蔗糖有利于放氢，葡萄糖，蔗糖的最适浓度为０．１ｍｏｌ／Ｌ，而α－酮戊二酸，柠檬酸等对螺旋藻的放氢没有促进作用。     

镉胁迫对垂柳镉、铁、锰的吸收及生理特性的影响

为了探究镉胁迫下垂柳生长和生理特性的变化,以垂柳枝条为对象,采用水培方式,设置Cd Cl2浓度分别为0(对照组)、10、50和100μmol/L 4个处理组,研究不同程度的镉胁迫对垂柳生长、不同器官对镉、铁、锰的吸收及部分生理特性的影响.结果表明:低浓度的镉胁迫(10μmol/L)不会影响垂柳的生长,高浓度的镉胁迫(50和100μmol/L)则会抑制垂柳的生长,而且随着镉处理浓度的增大抑制作用增强.镉主要富集于垂柳的根系中,其次是叶和新茎.随着镉处理浓度的增大,锰在垂柳不同器官中的含量降低.铁含量在低浓度Cd处理下呈增加趋势,当镉处理浓度达到50μmol/L时铁含量达到最大值,镉处理浓度进一步增加时铁含量下降.随着镉处理浓度的增加,垂柳叶和根中的H_2O_2、MDA一直呈增加趋势,叶中的可溶性蛋白含量随Cd处理浓度的升高而增加,根中可溶性蛋白含量则是先增加后降低.     

草鱼肝脏GPT酶的动力学特征及对Nic的敏感性研究

以草鱼肝脏匀浆上清液为GPT酶液,用L25(56)正交和分光光度法,测试其催化反应的最适条件及对Nic的敏感性.试验表明:在酶液浓度0.1 mg/mL、α-酮戊二酸3μmol/mL、反应体系pH8.5、反应温度50℃及反应时间70 min时,GPT转氨基速率达到最大值,其中酶浓度和底物对其活力影响均达到极显著水平(p<...