Neuronal growth inhibitory factor inhibits pheochromocytoma PC12 in vitro

Neuronal growth inhibitory factor (GIF), named Metallothioneins-Ⅲ (MT-Ⅲ), is the first protein validated to be capable of inhibiting the growth of neurons in nervous system. We have detected the effects of recombinant GIF on the growth of neuroblastoma SY5Y and pheochromocytoma PC12 by the MTT (Thiazolyl blue) reduction assay. Recombinant GIF inhibited PC12 in vitro; the inhibitory rate was about 25% when GIF was at 100 mg/L; and the inhibitory rate was about 50% when GIF was at 300 mg/L. It is shown that PC12 could serve as a proper model for detecting neuronal growth inhibitory activity of GIF. Recombinant GIF did not inhibit neuroblastoma SY5Y in vitro, a common model of neuroma; it is also shown that GIF could not inhibit neuromata extensively. The reason for GIF inhibiting PC12 may be that PC12 have some properties of cholinergic neuron. It must play an important role in discovering the mechanism of GIF’s neuronal growth inhibitory activity.     

神经生长抑制因子(GIF)和小分子G蛋白Rab3a在大鼠脑组织中的定位研究

神经生长抑制因子（GIF）是金属硫蛋白家族中唯一具有明确生理功能的成员,在Alzheimer’s症脑提取物存在下,对神经细胞的生长还具有抑制作用。Rab3a为小分子G蛋白的一种,通常以一种Ca2＋依赖形式在调控神经递质释放的过程中起着十分重要的作用。目的：本文用免疫组织化学的方法验证二者间的相互作用。方法：利用酶标定和荧光标定的免疫组化方法,确定GIF和Rab3a蛋白在大鼠脑中的分布定位及其二者的共定位。结果：用ABC Kit进行酶标定测得GIF和Rab3a在鼠大脑中的主要分布区域为脑皮层、海马等部位,用荧光标定的方法确定GIF和Rab3a两蛋白能在脑组织中共定位。结论：GIF和Rab3a广泛分布于脑组织申．且二者有共定住行为。为二者问存在相互作用提供了有力的证据．     

极低频磁场对两种瘤细胞代谢活力的影响

采用ＭＴＴ 比色分析法研究极低频磁场对ＳＨ－ＳＹ５Ｙ 和ＰＣ－１２ 瘤细胞代谢活力的影响．实验结果表明：在相同参数的磁场作用下,不同类型细胞代谢活力的变化不同;ＳＨ－ＳＹ５Ｙ 和ＰＣ－１２ 两种瘤细胞都对磁场振幅和频率敏感,在某些磁场参数下磁场照射能够使细胞代谢活力有明显降低或升高;振幅和频率不同的磁场,即使都对细胞代谢活力有影响,磁场作用的大小也存在差异．本研究证实极低频磁场在某些参数下可能抑制或增强瘤细胞线粒体的呼吸作用     

1株副干酪乳酸菌S-4对致病弧菌的抑制特性研究

针对弧菌病害的防治,选取了一株副干酪乳酸菌(Lactobacillus paracasei)S-4对4种致病弧菌进行体外拮抗实验,并在此基础上比较了不同发酵时长及稀释倍数的上清液对弧菌的抑制作用,同时探究了抑菌物质特性及进行共培养拮抗实验.结果显示:副干酪乳酸菌S-4对4株致病弧菌均具有显著的抑制作用.副干酪乳酸菌S-4生长过程中,0~16 h的上清液无抑菌活性,20 h后开始表现出对4株弧菌的抑制作用;36 h时的上清液对创伤弧菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌的抑制率大于95.42%,且该上清液3倍稀释后的抑菌活性无显著降低,为最佳收获时间;72 h时的上清液对溶藻弧菌的抑制率达到95.72%,6倍稀释后的抑菌活性无显著降低,为抑制溶藻弧菌的最佳收获时间.进一步探究菌株间的相互拮抗表明:副干酪乳酸菌S-4在共培养4~6 h就表现出明显的抑菌活性,比上清液提前12 h产生抑制效果,在培养初期就能有效抑制弧菌的生长.生化分析表明:抑菌物质对过氧化氢酶、蜗牛酶、胃蛋白酶不敏感,与多肽类物质无关,酸碱中和后抑菌活性完全消失,推测为有机酸.本研究表明:副干酪乳酸菌S-4对4株常见致病弧菌具有较强抑制作用,在水产养殖中具有潜在应用价值.     

NAA对药用植物黄独生长发育和离体保存的影响

以黄独无菌试管苗为材料,采用单因子实验,对NAA对黄独试管苗生长发育和离体保存进行了初步的研究。结果表明：（1）0.5-1mg.L-1NAA可促进黄独的生长发育,2-4mg.L-1NAA则抑制黄独的生长发育;（2）1mg.L-1的NAA对根的数量、茎的长度和叶的数量与大小均有促进作用,但对根粗和茎粗有抑制作用;（3）2-4mg.L-1NAA可促进愈伤组织形成,在2mg.L-1的NAA作用下愈伤组织最大平均直径为2.6cm,多为白色;（4）0.5-1mg.L-1NAA不利于黄独的离体保存,而2-4mg.L-1NAA可提高黄独试管苗离体保存的成活率。     

20(S)-原人参二醇衍生物对HT1080细胞侵袭转移的影响

检测了所合成的20(S)-原人参二醇衍生物GY1和GY2的抗肿瘤活性. GY1对HT1080、SMMC7721、A549的增殖有显著的抑制作用,呈明显的剂量依赖关系,IC₅₀分别为：35.2±0.9mg/L,29.6±1.1mg/L,24.1±1.5mg/L;而GY2并没有表现出的明显的细胞毒作用,其IC₅₀ 大于100mg/L. 5mg/L GY1作用48h可显著降低HT1080细胞对基底膜成分的粘附和侵袭能力,并对细胞的运动能力有一定影响;而相同浓度的GY2虽然对细胞的粘附性和侵袭性有一定影响,但对细胞的运动性却无明显的影响.     

枸杞多糖硫酸酯化修饰及其对Hela细胞的体外抑制作用

通过L_9(3)~4正交设计对氯磺酸-吡啶法制备枸杞多糖硫酸酯(SLBP)的修饰条件进行优选,最佳条件为V(氯磺酸):V(吡啶)=1:4,反应温度80 ℃,反应时间2 h.枸杞多糖硫酸酯中硫的质量分数可达17.23%,硫酸基取代度可达1.935.以紫外和红外光谱对产物加以表征,并用MTT法测定了对Hela细胞体外生长的抑制作用.在25～200 mg/L内,枸杞多糖(LBP)对人宫颈癌(Hela)细胞生长几乎没有抑制作用,而枸杞多糖硫酸酯对Hela细胞的抑制率可达31.71%.用本方法所制备的枸杞多糖硫酸酯具有较高的含硫量和硫酸基取代度,对Hela细胞生长具有明显的抑制作用,其抑制率与硫酸基取代度和用药剂量呈正相关.     

中药大黄抗柯萨奇病毒作用的实验研究

采用大黄1～4#有效提取部位进行了体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的研究.通过观察病毒引起的细胞病变效应(CPE)、MTT法检测细胞活性,作为考核药物抗病毒作用.结果表明:大黄1～4#有效提取部位对CVB3无直接灭活作用,也不能阻止CVB3的吸附,而能抑制CVB3在Hep-2细胞内的的生物合成,其半数抑制浓度(IC50)分别为34.7、33.0、33.9、34.3 mg/L,治疗指数(TI)分别为7.2、7.6、7.6、7.2.与病毒唑(IC50=30.6 mg/L,TI=6.6,P＞0.01)相当,优于大黄提取液(IC50=48.5 mg/L,TI=4.7,P＜0.01).在2.5～120 mg/L范围内1～4#部位与CVB3抑制率呈明显的量效关系(P＜0.01),120 mg/L时能完全抑制CVB3在Hep-2细胞内的增殖.所以大黄1～4#有效提取部位安全高效地抑制CVB3在Hep-2细胞中的增殖.     

藏药螃蟹甲提取物体外抗菌作用研究

目的：观察藏药螃蟹甲干燥块根水、乙醇、乙醚提取物体外抗耐亚胺培南铜绿假单胞菌的抗菌活性。方法：以琼脂稀释法测定螃蟹甲干燥块根水、乙醇、乙醚提取物对33株耐亚胺培南铜绿假单胞菌及标准菌株ATCC27853、25922、25923的MIC、MIC50及MIC90,并计算其累积抑菌率。结果：螃蟹甲干燥块根水、乙醇提取物对标准菌株ATCC27853、25922、25923的MIC分别为26.04mg/ml、52.08mg/ml、13.02mg/ml;62.5mg/ml、125mg/ml、62.5mg/ml;各浓度乙醚提取物平板上均有菌生。水、乙醇提取物对33株耐亚胺培南铜绿假单胞菌的MIC50、及MIC90分别为52.08mg/ml、62.5mg/ml;104.17mg/ml、125mg/ml。结论：藏药螃蟹甲干燥块根水、乙醇提取物对耐亚胺培南铜绿假单胞菌具有明显抗菌作用;乙醚提取物无明显抗菌作用。     

多穗柯提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选

为了探究多穗柯不同提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,采用不同溶剂回流提取和不同极性剂溶剂萃取2种方法得到多穗柯提取液,分别建立体外α-葡萄糖苷酶抑制模型,对提取液进行活性筛选,分析提取物浓度与抑制活性的关系,筛选出抑制效果最佳的提取方法.结果表明,甲醇提取物（IC₅₀=34.30 mg/L）和正丁醇萃取物（IC₅₀=30.47 mg/L）的抑制效果更接近于阿卡波糖（IC₅₀=25.26 mg/L）.     

多穗柯提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选

为了探究多穗柯不同提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,采用不同溶剂回流提取和不同极性剂溶剂萃取2种方法得到多穗柯提取液,分别建立体外α-葡萄糖苷酶抑制模型,对提取液进行活性筛选,分析提取物浓度与抑制活性的关系,筛选出抑制效果最佳的提取方法.结果表明,甲醇提取物（IC₅₀=34.30 mg/L）和正丁醇萃取物（IC₅₀=30.47 mg/L）的抑制效果更接近于阿卡波糖（IC₅₀=25.26 mg/L）.     

芳樟醇对莓实假单胞菌的抑菌活性及机制

食品在生产、运输和贮藏过程中易受致病菌污染而引起食源性疾病。芳樟醇具有抗菌作用,但其作用机制尚不明确。研究芳樟醇对莓实假单胞菌的抑菌活性及作用机制,可为其作为天然食品防腐剂的开发提供理论依据。通过测定最小抑菌浓度、绘制细菌生长曲线评价芳樟醇的抑菌活性；通过扫描电子显微镜观察、结晶紫染色实验、二乙酸荧光素染色实验以及测定电导率、核酸泄漏、呼吸代谢活力和呼吸链脱氢酶活性的变化探究芳樟醇的抑菌机制。结果表明:芳樟醇对莓实假单胞菌具有较强的抑制作用,最小抑菌浓度为1.5mL/L；芳樟醇能破坏莓实假单胞菌细胞的结构形态和细胞膜的完整性,增加细胞膜的通透性,导致胞内物质泄漏、膜外电导率升高；能抑制呼吸代谢活力和呼吸链脱氢酶活性,破坏呼吸链,导致胞内代谢紊乱。研究认为,芳樟醇可通过破坏莓实假单胞菌的细胞结构和抑制其呼吸代谢而发挥抑菌作用,有望作为天然防腐剂应用于食品的防腐保鲜。     

海藻多糖的实验研究——Ⅱ.鼠尾藻和铜藻多糖对EC109细胞株的抑制和对cAMP-PDE的影响

比较了七种海藻多糖在体外抑制人食管癌细胞株(EC109)的生物活性.结果表明,浓度为100毫克/毫升的不同多糖作用48小时后均出现明显抑制,细胞大部分脱落.抑制率在75～95％之间;当浓度为50毫克/毫升作用后抑制率维持在30％以上;25毫克/毫升以下浓度的鼠尾藻多糖仍表现出显著的抑制效果. 各种多糖对组织环化腺苷酸磷酸二酯酶(cAMP-PDE)的体外抑制表明,唯有褐藻淀粉硫酸酯对兔脑cAMP-PDE活性有明显作用,抑制率达74.5％.     

重金属Cd对污水厂剩余污泥厌氧水解和酸化的影响

在序批式厌氧反应器中探究了重金属Cd~(2+)对污泥厌氧水解和酸化的影响。实验结果表明0.1 mg/L Cd~(2+)能够促进污泥的水解和酸化过程进而促进短链脂肪酸(SCFA)的积累;且其最大积累量为1 025 mg/L。高浓度Cd~(2+)能够促进污泥中有机物的释放;但对酸化过程有严重的抑制作用。当Cd~(2+)的浓度为5.0 mg/L时,最大溶解性化学需氧量(SCOD)和SCFA浓度分别为1 395、465 mg/L,分别是空白对照组的1.5和0.5倍。同时发现高浓度Cd~(2+)(例如5.0 mg/L)能够抑制产甲烷古菌的活性进而导致SCFA的消耗量较低。     

人参皂甙Rh2对PC-3在裸鼠体内生长的抑制作用研究

目的 本实验以人激素非依赖性前列腺癌细胞株PC-3为对象,探讨Rh2对PC-3在体内实验中有无抑制作用.方法 用免疫组织化学技术检测Bcl-2在各组之间表达差异.结果 在体内实验中,Rh2对前列腺癌PC-3具有明显的抑制作用.结论 Rh2对前列腺癌PC-3具有明显的抑制作用.     

An intracellular toxic protein (Xin) isolated from Xenorhabdus nematophilus strain BJ

An intracellular toxic protein, designated Xin and with remarkable inhibitory effect on growth of Helicoverpa armigera, was isolated from X. Nematophilus strain BJ by ion exchange chromatography and hydrophobic interaction chromatography. After placing neonates on the artificial diet containing Xin at concentration of 0 or 3.48μg/g for 7 days, the average weight of insects was 23.50mg and 0.55mg, respectively. The activity of Xin was lost by heating, freeze-drying, digestion with proteases or urea. The Xin molecular weight, over kD, was determined by gel filtration on Superose 12, and there were six component proteins analyzed by SDS-PAGE. The results show that Xin is a high molecular protein complex inhibiting growth of insect pest.     

黄芩提取物及含药血清体外抑制呼吸道合胞病毒作用的实验研究

研究了黄芩提取物及其含药血清体外抑制呼吸道合胞病毒（RSV）的作用。通过细胞培养,采用观察细胞病变（CPE）和活细胞染色计数法（MTT）,观察清热抗感冲剂及其含药血清在Hep-2细胞中抑制RSV的作用。结果表明：黄芩提取物及其含药血清具有不同程度抑制RSV病毒复制作用,其半数中毒浓度（TC50）分别为3924mg/L、1/4.35稀释度;半数有效浓度（IC50）为165mg/L、1/54稀释度;治疗指数分别为23.78、10.83。这表明黄芩提取物及其含药血清具有抑制RSV在Hep-2细胞内复制的作用。     

Effect of nerve regeneration factor on differentiation of PC12 cells and its signaling pathway

The effects of nerve regeneration factor (NRF) on neuronal differentiation of PC12 cells and its signaling pathway are investigated by morphological observation and immunofluorescent cytochemical method, and the activity of ERK1/2 in NRF-treated PC12 cells in absence of serum is also studied by immuno-coprecipitation and Western blot analysis. The MEK1/2-specific inhibitor U0126, the broad-spectrum protein kinase C (PKC) inhibitor G?6983 and tyrosine protein kinase (TPK) inhibitor genistein were used to determine the roles of the activation of ERK1/2 by NRF and the involvement of certain kinds of PKC or TPK receptor in this activation process. The results show that U0126 and G?6983 inhibit the activation of ERK1/2 by NRF to different extents, while genistein has no effect on it, demonstrating that NRF remarkably induces neuronal differentiation of PC12 cells through activating ERK1/2 in a dose-dependent and time-dependent manner.     

琐琐葡萄多糖对PC12细胞损伤的神经保护作用

 体外培养PC12细胞,采用20μmol/L β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)作用24h诱导细胞损伤,建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,研究琐琐葡萄多糖(VTP)对PC12细胞损伤的神经保护作用。设立对照组、模型组和VTP保护组(20,40,80μg/mL),CCK-8法检测各组细胞的存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞膜通透性及完整性,化学比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示,20,40,80μg/mL VTP可提高PC12细胞存活率,减少LDH渗漏,增加SOD活力,减少MDA含量,降低细胞凋亡率,与模型组比较有显著差异(P<0.01)。由此推论,VTP对Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡和氧化损伤具有明显的保护作用。