内江猪与伍隍猪类缘关系的血红素结合蛋白(Hp)、血红蛋白(Hb)多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法对内江猪、伍隍猪及其对照荣昌猪、杜洛克猪的Hp血清型和Hb进行分型研究,检出了HP~1、HP~2、HP~3三个等位基因控制的6种基因型和4种变异型,根据基因频率计算出四种类群的标准遗传距离并按最短距离法聚类,伍隍猪与内江猪遗传距离最近为0.00203、伍隍猪与荣昌猪为0.00333,伍隍猪与杜洛克最远为0.00850。显示伍隍猪与内江猪有紧密的类缘关系。在HP基因型种类分布上,伍隍猪为4+4种,即存在1—1~F、1—3~F、1~F—3和3—3~F等四种基因型的变异型,而内江猪为5+1种,只有1—3一种变异型存在,揭示两者除同一性外存在一定差异性。卡方检验表明,伍隍猪基因型分布偏离Hardy—Weinberg平衡规律,HP~1—1纯合子频度偏低HP~1—2偏高是失衡的主因,对此进行了讨论,四类群猪Hb均无多态性。     

小型猪糖尿病模型研究进展

猪的代谢机制与人类十分相似,是糖尿病研究的理想模型动物。 本文综述了小型猪糖尿病模型的研究进展, 包括 1 型糖尿病模型、2 型糖尿病模型、遗传修饰猪糖尿病模型和糖尿病易感猪。     

H3N2SIV河南株非结构蛋白1(NS1)重组的纯化及Dot-ELISA的建立

为建立鉴别猪流感病毒感染猪和灭活疫苗免疫猪的诊断方法,利用pET-28a载体在大肠杆菌BL21中表达H3N2 SIV河南株NS1,并通过Ni2+-NTA亲和色谱法纯化His-NS1融合蛋白.用SDS-PAGE,Western blotting和Dot-ELISA分析纯化蛋白,表明重组NS1能与猪流感病毒感染猪血清进行特异性反应,而不与灭活疫苗免疫猪血清反应.结果表明重组蛋白能作为区别猪流感病毒感染猪和灭活疫苗免疫猪的诊断抗原,为控制猪群中的流感病毒奠定了基础.     

华特猪配套系选育的历程及推广应用情况总结

1　华特猪配套系的选育历程华特猪配套系是甘肃农业大学主持完成的省列“七五”、“八五”及“九五”科技攻关持续二十多年的科技成果 ,分三个阶段完成。1 .1　甘肃白猪的选育阶段1 973年开始甘肃白猪的选育工作 ,用长白猪、苏白猪为父本 ,本地猪种为母本 ,经十年的杂交与横交 ,形成了以“长苏本”和“苏长本”为基本组合的四个闭锁群。 1 983年被省科委列为“七五”科技攻关项目 ,进入品系繁育阶段 ,经六个世代的强度选择 ,育成了甘肃白猪四个地方类群 ,1 989年通过省科委组织国内同行专家现场鉴定验收 ,定名为“甘肃白猪”新品种 ,并获甘…     

家猪STAT1的基因克隆、剪接变体鉴定及组织表达研究

以长白猪(Landrace)cDNA为模板, 克隆STAT1基因cDNA全长.家猪STAT1基因cDNA全长编码757个氨基酸的前体蛋白, 与人、大鼠、小鼠、牛等哺乳动物的STAT1氨基酸序列一致性分别为95％、908％、896％、916％; 同时, 本研究亦鉴定到家猪STAT1的3种剪接变体(分别命名为STAT1 sv1, STAT1 sv2, 和STAT1 sv3).采用RT PCR方法, 进一步检测了STAT1及其3种剪接变体在成年家猪各组织中的表达情况.STAT1和两种剪切变体(STAT1 sv2 和STAT1 sv3)在家猪组织中广泛表达, 而剪接变体STAT1 sv1则在肺和脾脏中有较高表达水平.     

三个品系小型猪Ⅱ型糖尿病模型的比较研究

目的比较三个品系小型猪对高糖高脂饲料诱发Ⅱ型糖尿病模型的敏感性,为我国小型猪在Ⅱ型糖尿病研究中的应用提供基础资料。方法4~5月龄巴马小型猪、五指山小型猪和中国农大小型猪各6头,以4头中国农大小型猪为对照,同步开展高糖高脂饲料喂养试验,试验周期8个月。每月称1次体重,测定血糖、血清胰岛素含量,每2个月进行1次静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT),测定脂质代谢相关指标。结果巴马小型猪和五指山小型猪对高糖、高脂饲料比较敏感,在饲喂5~6个月后,开始出现糖代谢异常,表现为显著肥胖、血清胰岛素升高和胰岛素敏感性下降。至实验后8个月,巴马小型猪和五指山小型猪各有1头发展为糖尿病,分别有3头和2头出现糖尿病前期症状。中国农大小型猪对高糖高脂饲料诱发糖尿病相对不敏感,实验期间空腹血糖水平、血清胰岛素含量、胰岛素敏感指数和IVGTT一直无显著变化,仅在实验后7个月开始表现肥胖,8个月出现胰岛素敏感性减低。三个品系小型猪在高糖高脂饲喂后,血脂相关指标(TG,CHO,HDL-C,LDL-C)普遍升高,以巴马小型猪升高幅度最大。结论巴马小型猪和五指山小型猪对高糖、高脂饲料诱发Ⅱ型糖尿病比较敏感,品系内个体差异较大。中国农大小型猪相对不敏感。这一结果为进一步的Ⅱ型糖尿病相关基因分析和高敏感家系培育研究提供了基础资料。     

固力本钙离子在广西巴马小型猪中注射效果初探

目的以广西巴马小型猪作为实验动物,探讨固力本钙离子用于静脉注射、肌肉注射和皮下注射的可行性。方法去甲肾上腺素静脉滴注巴马小型猪12次(用量2.0 mg/kg体重);固力本钙离子静脉滴注巴马小型猪和用过去甲肾上腺素的实验猪(1粒钙离子的稀释液分别为100 mL~200 mL的生理盐水、葡萄糖水和蒸馏水);固力本钙离子肌肉注射、皮下注射巴马小型猪(1粒钙离子的稀释液分别为100 mL~200 mL的生理盐水、葡萄糖水和蒸馏水);对照巴马小型猪静脉滴注生理盐水50 mL。结果钙离子静注过程中实验猪大多会表现心率、呼吸减缓,实验猪无异常反应,表现安静;钙离子静注稀释液用蒸馏水较好;以2.3 mg/mL的浓度滴注较合适。静注去甲肾上腺素过程中实验猪心率、呼吸加快,反应激烈;经去甲肾上腺素静注后的巴马小型猪对钙离子静脉注射的反应则完全不同,表现安静。钙离子肌肉注射和皮下注射实验猪均无不良反应。结论通过对巴马小型猪的实验,初步确认固力本钙离子可用于静脉注射、肌肉注射和皮下注射。     

青海八眉猪DRD1基因多态性与其生长性状和产仔数的关联分析

为揭示八眉猪DRD1基因多态性对其繁殖性能及生长性能的影响,以青海八眉猪为研究对象,对DRD1基因多态性与生长性状、产仔数进行相关性分析;利用生物信息学工具分析猪及其他近缘物种DRD1蛋白结构的保守性,作为评估八眉猪DRD1基因功能的基础.结果表明:猪DRD1蛋白在一、二、三级结构上与人等哺乳动物存在大量相似性结构;在...     

猪红细胞免疫功能初步研究

本实验通过对35例猪红细胞 C_3b 受体花环和免疫复合物花环的检测,证明猪红细胞亦有C_3b 受体(即 Complement receptortype I,CR_1),表明猪红细胞不但具有传统医学观念上的功能,而且还可借助 CR_1进行免疫粘附,并以此为基础,表现出各种重要的免疫功能。     

猪血浆α_1—抗胰蛋白酶的紫外光谱和园二色谱

本文报告了对猪血浆α_1抗胰蛋白酶的紫外吸收光谱和园二色谱的测定结果。从紫外光谱分析得知猪α_1抗胰蛋白酶表现出典型的蛋白质吸收特征,其摩尔消光系数E_(280nm)~1％1cm 等于5.25;从(?)二色谱分析得知该蛋白质分子中合有约8％的α螺旋,50％的β-折叠,其余均为无规则卷曲构象。本测定结果对猪α_1-抗胰蛋白酶的性质、结构和功能的研究打下了基础。     

用细菌人工染色体文库和原位杂交技术定位猪糖原脱支酶基因

依据人糖原脱支酶(基因名为AGL)基因序列设计引物,利用两步-四维聚合酶链式反应筛选法从猪细菌人工染色体文库中筛选出含猪糖原脱支酶基因的阳性克隆．通过荧光原位杂交和人第1号染色体与猪第4号染色体同源区域的比较将猪的AGL基因定位于猪第4号染色体q16-qter区域。     

三个品系小型猪静脉糖耐量试验及相关血清生化指标的比较

目的比较三个品系小型猪静脉葡萄糖耐量及血糖相关指标的差异。方法实验用4月龄广西巴马小型猪和贵州小型猪,5月龄五指山猪,在相同饲养条件下进行实验。静脉注射50%葡萄糖进行静脉葡萄糖耐量试验;常规生化方法检测血清血糖;化学发光法检测血清胰岛素;放免法测定HbAlc。结果静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)中,注糖后10 min血糖达到峰值,贵州小型猪和广西巴马小型猪分别在60 min和90 min时恢复至实验前血糖值。五指山猪在120 min时恢复至注糖前水平,而且在30~90 min各时间点的血糖值高于广西巴马小型猪和贵州小型猪(P<0.05)。三组动物中,贵州小型猪HbA1c含量较高(P>0.05),五指山猪胰岛素水平较低(P<0.01)。三个品系小型猪的空腹血糖和胰岛素敏感指数差异不显著(P>0.05)。结论在IVGTT实验中,三个品系小型猪的血糖下降趋势基本一致,五指山猪有一定特殊性;相关血清生化指标测定值接近。     

内江猪、伍隍猪生化遗传及细胞遗传的研究:Ⅰ血清乳酸脱氢酶同工酶的分离测定

采用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳法,在完全相同条件下,分别测定了三月龄和六月龄的内江猪、伍隍猪的血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶,并与相应月龄的体尺、体重等进行分析。结果表明:内江猪和伍隍猪血清LDH同工酶表现出五条正常酶带。由正极到负板依次为LDH_1,LDH_2,LDH_3,LDH_4,LDH_5。三月龄时,内江猪和伍隍猪血清LDH同工酶活力均值(％)的顺序是LDH_1>LDH_5>LDH_3>LDH_4>LDH_2,组间差异不显著(P>0.05)。六月龄时,两组LDH同工酶活力均值(％)顺序为LDH_1>LDH_5>LDH_4>LDH_3>LDH_3,组间差异也不显著(P>0.05)。内江猪的LDH同工酶三月龄与六月龄相比无显著差异(P>0.05)。而伍隍猪的LDH_2在三月龄时极显著的高于六月龄(P<0.01),其余差异不显著。血清LDH同工酶与体尺体重等的关系,在内江猪与伍隍猪之间和三月龄与六月龄之间均未发现什么规律性。     

实创巴马小型猪疑似糖尿病敏感个体筛选实验

目的筛选疑似糖尿病敏感小型猪。方法测定79头(10-14月龄)实创巴马小型猪的体重指数、糖耐量, 以及空腹血清GLU、TG、TC、HDL-c和LDL．C值,以空腹血糖值和糖耐量试验120 rain血糖值为主要依据,同时参考 其他相关检测指标,选择疑似糖尿病敏感小型猪。结果选择2对小型猪开始繁殖实验。     

乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法的建立

目的建立乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法,应用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。方法滴定病毒TCID50,筛选JEV敏感细胞,依据国标IFA法制备抗原片,并进行特异性、敏感性和稳定性试验。结果选取BHK21细胞作为JEV敏感细胞,病毒感染力滴度(TCID50)为10-8.9.mL-1;与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应;稳定性和敏感性试验显示,不同时间IFA检测灵敏度均为1∶2560;可检测到的病毒滴度最低为10-6.5.mL-1。结论建立的IFA法敏感性、特异性强,稳定性好,可用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。     

长链非编码RNA H19、Neat1、Meg3、Gas5在梅山与杜洛克猪卵泡及各组织中的差异表达分析

为探讨lnc RNA在卵泡及组织中的表达规律,采用荧光定量RT-PCR检测lncRNA H19、Neat1、Meg3、Gas5基因在杜洛克与梅山猪各级卵泡和猪不同组织中的表达量变化。结果表明:H19基因在杜洛克猪各级卵泡S、M1、M2、L中的表达量分别是梅山猪的3.61、0.57、4.19、3.27倍,各级卵泡品种间差异极显著(P0.01);Neat1基因在杜洛克猪各级卵泡中的表达量分别是梅山猪的3.94、1.16、1.63、1.44倍,其中S卵泡品种间差异极显著(P0.01);Meg3基因在杜洛克猪各级卵泡中的表达量分别是梅山猪的2.78、1.12、10.65、1.41倍,S、M2卵泡品种间差异极显著(P0.01);Gas5基因在杜洛克猪各级卵泡中的表达量分别是梅山猪的4.53、1.40、6.31、1.14倍,S、M2卵泡品种间差异极显著(P0.01),M1卵泡中差异显著(P0.05)。组织表达分析结果表明,各基因在下丘脑、垂体、子宫、卵巢等组织中均有表达。此研究表明,4个lnc RNA基因在杜洛克和梅山猪中表达量存在较大差异,可能影响卵泡的增殖、发育和成熟。     

中国小型猪实验动物化培育及种质特异性研究

1　小型猪品系繁多 ,各具特色我国地形、生态条件多样 ,经历代人工和自然选择 ,使我国小型猪品种具有得天独厚的资源和条件。主要的品种有 :海南五指山小型猪 (WZSP)、云南小耳猪、贵州香猪、广西巴马香猪、甘肃合作猪、青海藏猪等。五指山小型猪具有体型小、性成熟早、遗传稳定、可近亲繁殖的特点 ;云南小耳猪具有体型较小、性成熟早、体为黑色等特点 ,通过近亲繁殖 ,已获得近交 2 0代仔猪 ,已分化为体重大小、毛色、体态不一的 8个家系 ;香猪、巴马香猪具有性成熟早、遗传比较稳定、产仔率较高、体毛分别为黑色和白色占 90 %左右等特征…     

STR扫描技术对融水小型猪群体遗传结构的分析*

目的 应用STR扫描技术分析融水小型猪群体的遗传结构。方法 选用北京市地方标准封闭群实验用小型猪的遗传质量监测提供的25个微卫星位点对广东省医学实验动物中心小型猪研究基地F1代30头融水小型猪基因组DNA进行PCR扩增,对扩增产物进行STR扫描,运用popgene32软件对该融水小型猪进行群体遗传结构分析。结果 融水小型猪F1群体平均观测等位基因数为9.4400,平均有效等位基因数为5.2966,平均香隆指数为1.8085,平均有效杂合度为0.7737。结论 STR扫描技术适用于融水小型猪群体遗传结构分析;初步掌握了融水小型猪遗传结构。     

猪细胞视黄醇结合蛋白基因1（CRBP1）内含子1的克隆测序

类维生素A(维生素A及其代谢产物)在动物的视觉、生长、繁殖、细胞的分化及胚胎发育等方面起重要作用.猪细胞视黄醇结合蛋白基因1(CRBP1)属于猪视黄醇结合蛋白基因家族(CRBPs).本研究将猪细胞视黄醇结合蛋白基因1(CRBP1)的内含子1进行了克隆测序,其大小为453bp.为进一步研究猪CRBP1基因的全序列奠定了一定的基础.     

东北民猪哺乳仔猪阶段发育和补料量的测定

哺乳仔猪阶段发育和补料量的测定是东北民猪(以下简称民猪)种质特性的研究项目之一。研究东北民猪哺乳期仔猪生长发育特点、能量需要(乳和料)、饲料利用对民猪选育、仔猪养育和改善母猪饲养管理均有一定现实意义。 1979年7月12日到9月10日,我们在兰西县种猪场研究民猪泌乳力的同时,进行了哺乳仔猪阶段发育和补料量的测定。一、测定方法 1、从1979年秋产母猪中,选产期接近、母性温顺、带仔10头以上经产母猪4头,计42头仔猪(表1)。