紫外辐射诱导植物细胞DNA损伤的彗星检测

单细胞凝胶电泳(彗星检测)已广泛应用于动物细胞DNA损伤检测.该文报道了单细胞凝胶电泳应用于UV-B诱导植物细胞DNA损伤的检测.通过对动物细胞的单细胞凝胶电泳实验方法的改进,获得了在植物细胞中应用的最佳条件.以植物细胞原生质体为材料,并结合T4 Endonu lease V的运用,显著提高了UV-B诱导植物细胞DNA损伤提高彗星检测的敏感性和特异性.植物细胞DNA损伤的彗星图像经CASP软件处理并量化,结果表明:UV-A和UV-B均能诱导发生DNA单链断裂;UV-A在一定的剂量下诱导少量嘧啶二聚体的形成,而UV-B则强烈诱导嘧啶二聚体的产生.     

SCGE检测人单个核细胞细胞DNA损伤

用单细胞凝胶电泳法检测了人全血在4℃储存时单个核细胞DNA损伤的情况。结果发现，细胞随储存时间延长基础损伤逐渐增高，储存1，24，48，72h时细胞损伤率分别为8.84%，18.5%，45.2%和54.3%，而细胞对H2O2的敏感性却逐渐降低。以50цmol/L H2O2处理后，其细胞损伤率在0，24，48h分别为63%，61.8%和51.5%。     

应用彗星试验研究两种农药对小鼠DNA的损伤

探讨采用当前国际上较先进的DNA损伤检测技术-单细胞凝胶电泳技术(SCGE,又名彗星试验),来检测农药对小鼠DNA的损伤,尝试建立小鼠的单细胞凝胶电泳技术来评价农药对生态环境和人体健康的影响.结果表明两种新型杀虫剂吡虫啉和抑食肼在一定的剂量范围内对小鼠的DNA均有一定程度的损伤作用,各浓度组与阴性对照组相比具有显著性差异(P<0.01),且具有明显的剂量效应关系.认为小鼠单细胞凝胶电泳技术能敏感地检测农药对细胞DNA的损伤,并认为细胞的DNA损伤可作为农药等化学品致突变性检测的生物标志物.     

紫外辐射诱导牡蛎细胞DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测

以牡蛎为研究对象,建立了水产动物DNA损伤的单细胞凝胶电泳检测方法.分别以20W紫外灯距离30 cm照射牡蛎血液细胞30、60和120 s,然后用单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA的损伤.结果表明:未照射的细胞未受损伤,在电场中核DNA几乎不泳动,染色后呈圆形的荧光团,无拖尾现象.紫外照射后细胞核DNA均不同程度受损,且拖尾率、尾长、尾矩、Olive尾矩等指标值均随着照射时间加长而增加,DNA损伤程度与紫外照射时间之间存在明显的时间效应关系.研究结果为我国海洋环境中辐射防护研究和辐射毒理学检测提供新的研究方法和思路.     

硫辛酸对甲醛致人HepG2细胞DNA损伤的保护作用

为探讨硫辛酸对甲醛诱发人HepG2细胞DNA损伤的保护作用,体外培养的HepG2细胞经甲醛(0.25,2.5,25μmol/L)单独处理或甲醛与硫辛酸((5+20),(5+40)μmol/L)同时处理2 h后,分别运用彗星试验(comet assay)结合彗星图像分析软件(CASP)分析细胞尾部DNA百分率(tail DNA%)变化.结果显示:不同浓度甲醛处理后HepG2细胞尾部DNA百分率以浓度依赖性方式显著升高(P0.01);但甲醛与硫辛酸同时处理后HepG2细胞尾部DNA百分率明显降低并与硫辛酸浓度呈依赖关系,与甲醛单独处理组(5μmol/L)相比差异显著(P0.05或P0.01).此结果说明硫辛酸对甲醛诱发的人HepG2细胞DNA损伤有保护作用.     

彗星实验在抗肿瘤药物研究中的应用

回顾了近年来彗星实验在抗肿瘤药物研究中的应用，将各种以肿瘤细胞为基本实验材料的不同实验，从材料、致损伤荆以及具体操作方法等方面进行总结和比较，为今后在同类的肿瘤细胞实验中应用彗星实验技术时提供参考。     

单细胞凝胶电泳检测DNA损伤的方法及应用

单细胞凝胶电泳又称彗星试验,是一种在单细胞水平上检测DNA单、双链断裂和碱性不稳定位点的方法,具有敏感、稳定、快速的优点.近些年来,该方法广泛应用于遗传毒理、环境监测和细胞凋亡等的研究.本文就彗星试验检测DNA损伤方法的原理,评价指标,影响因素以及在一些方面的具体应用进行了综述.     

单细胞凝胶电泳技术在DNA损伤和细胞凋亡检测中的应用

用不同质量浓度的丝裂霉素C(MMC)、卡铂和5-氟尿嘧啶(5- Fu)处理Hela细胞24h,利用单细胞凝胶电泳( SCGE)技术分析这些药物对细胞DNA的损伤情况,结果发现:各药物处理组细胞都出现“彗星”,且随着各药物浓度的增大,彗星率升高,彗尾的荧光强度和长度也随之增大;各剂量组间存在良好的剂量-效应关系,差异显著...     

DNA化学损伤的电化学检测

0 引言 DNA是重要的遗传物质,在机体的生长过程中,它不可避免地受到各种因素的作用而产生损伤,从而直接影响DNA的复制、转录和蛋白质的合成,进而影响细胞生长、发育、遗传、代谢和繁殖等生命基本过程,还会造成细胞突变、癌变、老化甚至死亡.因此,对DNA损伤及其检测方法的研究不仅有助于更好地了解生命体的基本过程,而且还可为疾病的临床诊断、治疗甚至新的基因治疗药物的发现提供理论基础.     

DNA损伤修复研究的新进展及其重要意义

1953年沃森（Wotson）和克里克（Crick）提出DNA结构的双螺旋模型,使人类对生命遗传和变异的认识发生了质的飞跃。人们进而试图从分子水平上准确无误地复制出与母本完全一致的子代DNA双链。然而,DNA复制的精确性也是相对的。由于种种原因,任何生物的DNA在复制过程中其碱基都     

邻苯二甲酸二乙基己酯对小鼠不同脏器DNA的损伤作用

应用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)研究了邻苯二甲酸二异辛酯[Di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]对小鼠不同脏器(睾丸、胃、脑和肝)DNA的损伤作用.结果表明,DEHP可引起小鼠DNA的损伤,并且随着DEHP浓度的逐渐增高,DNA的损伤也随之加重,它们之间具有明确的剂量效应关系.在睾丸的细胞,胃内膜的细胞,脑的细胞中,当DEHP的浓度达到375 mg/kg时,则可造成DNA的极显著断裂(P＜0.01).而在肝的细胞中,当DEHP的浓度达到125 mg/kg时,就可造成DNA的极显著断裂(P＜0.01).当DEHP的浓度达到500 mg/kg时,除了脑的细胞外,DNA的断裂均不显著,可能已形成交联.     

铅化合物体外诱导人的淋巴细胞DNA损伤的遗传毒性

在体外对人的淋巴细胞，用不同浓度的硝酸铅Ｐｂ（ＮＯ３）２和硫酸铅ＰｂＳＯ４处理１小时，ＤＮＡ损伤的程度采用单细胞琼脂糖凝胶电泳技术进行比较研究．这两种铅化物均不同程度的显示了剂量反应关系．ＤＮＡ损伤的程度从８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ起与空白对照相比，呈现有意义的增加（ｐ＜０．０５）．细胞ＤＮＡ断裂频率的增加与毒性呈现为线性增长的关系即为试验试剂的浓度愈高，则出现彗尾的细胞个数愈多，两种化合物在同样的实验条件下显示了相似的分裂剂的潜能．该试验初步证明铅化合物具有一定的遗传毒性     

SO2体内衍生物对小鼠胃细胞DNA损伤的研究

SO2体内衍生物是SO2进入机体后在体液中代谢转化的衍生物-亚硫酸盐和亚硫酸氢盐.运用单细胞凝胶电泳技术(又称慧星试验)研究了SO2体内衍生物对小鼠腹腔注射引起小鼠胃细胞DNA的影响.在衍生物剂量为0 g/kg体重,0.125 g/kg体重,0.250 g/kg体重,0.500 g/kg体重的染毒条件下,雄性小鼠胃细胞DNA拖尾长度分别为1.14 μm,8.98 μm,14.33 μm,24.71 μm,雌性小鼠胃细胞DNA拖尾长度分别为1.20 μm,6.34 μm,12.67 μm,18.59 μm.各处理组与对照组的拖尾长度有显著性差异.结果表明,SO2衍生物可引起小鼠胃细胞DNA损伤,且随SO2体内衍生物注射剂量的增高DNA损伤加重,并有明确的剂量效应关系(r＞0.95).另外SO2体内衍生物对雌性小鼠胃细胞DNA损伤比雄性小鼠弱.这些意味着SO2的体内衍生物具有引起哺乳动物胃细胞DNA突变的潜在危验.     

黄花倒水莲（Polygala fallax Hemsl.）对60Coγ射线辐射损伤小鼠组织DNA的防护作用

目的:探讨黄花倒水莲对辐射损伤小鼠组织DNA的防护作用.方法:实验设计分照射前给药和照射后给药2个模块,每模块各5组.复制60Coγ射线(辐射强度为6Gy)对雄性昆明种小鼠辐射损伤的病理模型,黄花倒水莲提取液2、4、8 g/(kg.d)连续灌胃7天,正常对照组、照射模型组给予等量生理盐水,用彗星试验检测小鼠多种组织细胞DNA损伤情况.结果:黄花倒水莲照射前给药和照射后给药,均可明显降低小鼠肺、肝、脾、睾丸、淋巴细胞DNA的尾部DNA百分率和尾矩(P<0.01),呈一定的量效关系.结论:黄花倒水莲可以减轻60Coγ射线所致小鼠组织DNA的损伤,具有辐射防护作用.     

DNA methylation status of H19 and Xist genes in lungs of somatic cell nuclear transfer bovines

In somatic cell nuclear transfer (SCNT) technologies,the donor cell’s nuclei need to be epigenetically reprogrammed for embryonic development. The incomplete reprogramming of donor cell nuclei has been implicated as a primary reason for the low efficiency of SCNT. DNA methylation is a major epige-netic modification of the genome that regulates crucial aspects of genome function,including estab-lishment of genomic imprinting. In order to make sure whether the DNA methylation reprogramming is efficient in SCNT animals,we analyzed the DNA methylation status of two imprinting genes,H19 and Xist,in lungs of deceased SCNT bovines that died within 48 h of birth using bisulfite sequencing analysis. Our findings demonstrated that cloned bovines showed significantly lower DNA methylation of H19 than controls (P<0.05),and three tested CpGs sites (1,2,3) exhibited unmethylation in one cloned bovine (9C3); however,Xist showed similar DNA methylation levels between clones and con-trols,and both showed hypermethylation (96.11% and 86.67%).     

MTT法检测鸡外周血淋巴细胞增殖性反应的最佳条件探讨

对鸡外周血淋巴细胞增殖反应MTT比色法的四个主要因素,即培养时间、ConA浓度、细胞浓度及培养液小牛血清等应用L_16(4~5)四因素四水平正交试验设计,对最佳反应条件进行了研究．结果表明、影响增殖反应的主次顺序为ConA、细胞浓度、培养时间及血清浓度;最佳反应条件为:15μg/ml的ConA、1×10~7/ml细胞、10%小牛血清及48小时的培养时间.