复肝灵抗鸭体内乙型肝炎病毒的实验研究

目的：观察复肝灵抗鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的作用,为复肝灵的临床应用提供实验依据。方法：采用一日龄北京鸭30只,静脉注射雏鸭乙型肝炎病毒阳性血清建立鸭乙型肝炎病毒模型,然后随机分为复肝灵组、病毒对照组和拉米夫定组。复肝灵组分为0．5、1．0、2．0g／kg三个剂量组。给鸭口服复肝灵,1天2次,给药10天。然后分别在给药前、给药后5天、10天及停药3天后取血,测定鸭血清中DHBV—DNA水平并计算每组鸭用药后不同时间（T5、T10）和停药第3天（P3）血清DHBV-DNA的抑制率（％）,观察鸭血清鸭乙型肝炎病毒DNA（DHBV—DNA）的影响。病毒对照组以生理盐水代替药物;拉米夫定组给予口服拉米夫定。结果：复肝灵2．0g／kg组,给药后第5天,第10天鸭血清DHBV—DNA显著下降（P〈0．01）,停药后3天鸭血清DHBV—DNA下降明显（P〈0．05）,鸭血清DHBV—DNA水平抑制率则有显著升高;1．0g／kg组,给药后第10天和停药后3天鸭血清DHBV—DNA明显下降,鸭血清DHBV—DNA水平抑制率则有显著升高,与对照组差异显著（P〈0．01）,与拉米夫定组则无明显区别：0．5g／kg组则无明显变化。结论：大剂量组、中等剂量的复肝灵组在鸭体内有抗鸭乙型肝炎病毒作用。     

绿茶多酚表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）体外对抗乙肝病毒复制的能力

研究目的：乙肝是尚未解决的公众健康问题,需要开发新型抗病毒药物。本研究拟从天然植物绿茶中寻找有效、经济、毒副作用低的抗乙肝病毒药物。创新要点：研究方法：重要结论首次以HepG22．2．15细胞为载体,发现EGCG对乙肝病毒HBsAg、HBeAg和HBVDNA的选择性作用。采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测细胞上清中HBsAg和HBeAg的含量,采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测上清和细胞内HBVDNA的含量。EGCG的浓度在0．11～0．44μmol／ml（即50～200μg／ml）的范围内能有效抑制HepG22．2．15细胞中HBsAg和HBeAg的分泌,其效果甚至优于浓度为0．87μmol／ml（即200μg/ml）的拉米夫定（3TC）,并且具有时间和剂量依赖性。同时,EGCG也能抑制胞外HBV DNA的表达。研究结果表明,EGCG具有良好抗病毒活性和低毒副作用,有望开发成为一种新的抗病毒药物。     

姜黄素体外抗流感病毒H1N1、H3N2实验研究

目的：观察姜黄素提取物体外对流感病毒H1N1、H3N2的抑制作用。方法：用狗肾细胞（MDCK）观察姜黄素体外对A型流感病毒H1N1亚型、A型流感病毒H3N2亚型病毒的直接杀灭作用。结果：姜黄素最大无毒浓度为12．5g／L,对H1N1有效抑制浓度为6．25g／L,对H3N2有效抑制浓度为1．56g／L。结论：姜黄素提取物确有明显的抗H1N1、H3N2复制作用。     

赛若金对HepG2.2.15细胞株HBV复制的抑制作用

以转染有ＨＢＶ的ＨｅｐＧ２．２．１５细胞株为实验模型,用ＭＴＴ法测定赛若金对２．２．１５细胞的生长抑制作用,流式细胞仪测定药物对２．２．１５细胞周期时相的改变,通过ＥＬＩＳＡ方法观察赛若金对２．２．１５细胞分泌ＨＢｅＡｇ及ＨＢｓＡｇ的影响,ＰＣＲ－Ｈｙｂ杂交法检测赛若金对２．２．１５细胞ＨＢＶ ＤＮＡ复制的抑制作用。结果显示,赛若金对转染乙肝病毒的２．２．１５细胞有生长抑制作用,抑制率随药物浓度呈     

饱和D最优设计法在马铃薯微繁培养基筛选中的应用

采用饱和D最优设计法,研究了5种植物生长调节剂与扦插个数的关系,通过记录青薯2号、6号两种脱毒试管苗生长状况,建立了不同植物生长调节剂、不同接种数对试管苗生长的函数模型。结果表明：试管苗最佳扦插个数：7—9个,2,4-D最佳浓度：1．32—2．514mg／L;6-BA最佳浓度：1．05—1．95mg／L;NAA最佳浓度：0．165—0．335mg／L;KT最佳浓度：0．35-0．65mg／L;CA最佳浓度：3．5～6．5mg／L。     

洋葱对池塘养殖水体抑菌作用的探讨

采用黑白瓶法测定不同浓度洋葱（1mg／L、2mg／L、5mg／L、10mg／L、15mg／L）在不同时间段（12h、24h、48h）对池塘养殖水体微生物呼吸耗氧的影响。结果表明：洋葱对水体微生物的呼吸耗氧有抑制作用,不同洋葱浓度对水体微生物的呼吸耗氧抑制作用不相同,以10mg／L、15mg／L浓度组抑制作用明显。     

白金针菇的液体培养及6-BA对其菌丝体生长的影响

通过不同培养基对白金针菇进行液体培养实验表明：玉米粉培养基最适合白金针菇菌丝体的生长，葡萄糖培养基次之。以葡萄糖培养基为基础，通过添加不同浓度的6—BA，探讨6—BA对白金针菇菌丝体生长的影响。结果表明：低浓度6—BA对白金针菇菌丝体有促进作用，高浓度则表现抑制作用，最适作用浓度为0．15mg／100ml。6—BA对菌丝体可溶性糖含量无明显影响。     

龙葵碱对肿瘤细胞膜ATP酶活性的影响

荷瘤小鼠分为治疗组(37．50mg／kg、18．75mg／kg、9．37mg／kg)和对照组(生理盐水组、环磷酰胺组30mg／kg),分别测定各组肿瘤细胞膜的Na^ ,K^ -ATPase及Ca^2 ,Mg^2 -ATPase活性．结果表明龙葵碱(37．50mg／kg、18．75mg／kg)对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na^ ,K^ -ATPase及Ca^2 ,Mg^2 -ATPase活性均有明显的抑制作用,并且其抑制作用呈量效正相关．因此龙葵碱这一作用可能是其抗肿瘤作用机理之一．     

乙肝表面抗原在分泌型毕赤酵母中的表达及纯化

目的对分泌型毕赤酵母中表达乙肝表面抗原并进行亲和层析纯化。方法从已确诊的乙肝患者阳性血清中提取乙肝病毒DNA,PCR扩增乙肝病毒表面抗原编码基因S,将其插入含有仅分泌信号肽序列和6个组氨酸纯化标签的毕赤酵母表达载体pPICZα,成功构建了重组表达载体pPICZα—HBVs。电转化酵母菌株GS115,得到重组乙肝表面抗原S的酵母表达菌株。结果诱导培养基BMMY中甲醇终浓度为1％,诱导表达48h重组蛋白表达量及抗原性达到最高。非变性条件下亲和层析纯化后,薄层扫描分析得到纯度超过95％,表达量约为2mg／L的重组蛋白。结论Western-blot和ELISA分析表明,所得产物为乙肝表面抗原S蛋白,其纯度和产量足以免疫小鼠制备单克隆抗体。     

SIOC-AA-005的抗肿瘤活性研究

观察SIOC-AA-005体外及体内抗肿瘤活性，通过MTT法和集落形成法观察SIOC-AA-005在体外的抗肿瘤活性，利用^3H-标记前体掺入法检测生物大分子的合成．利用小鼠移植瘤模型观察了SIOC-AA-005在体内的抗肿瘤活性．SIOC-AA-005对人结肠腺癌HT-29细胞的IC50为18．7nmoL／L，比对人胚肺成纤维细胞HELF的IC50低1000多倍，这一结果与集落形成和细胞生长曲线结果一致．SIOC-AA-005对HT-29细胞的DNA、RNA以及蛋白质合成均有抑制作用,SIOC-AA-005在10mg／kg剂量下对小鼠Lewis肺癌的抑制率为30．5％，在5mg／kg，10mg／kg和20mg／kg剂量下对小鼠肝癌H22的抑制率分别为37．6％、40．0％、47．2％，表现出良好的剂量效应关系,SIOC-AA-005在体外、体内均显示了较好的肿癌生长抑制作用，是一个有前景的抗肿癌化合物。     

绞股蓝、乌龙茶抗肿瘤实验研究

侧重探测药物在体内环境中产生效应的过程,以地产绞股蓝和当地习惯饮用的乌龙茶直接给动物饮用,观察它们的抗肿瘤作用,结果：饮用150mg／只／日绞股蓝、30mg／只／日乌龙茶的荷瘤鼠生存期较饮水组明显延长（P＜0．05）,开始发生死亡的时间推迟7－8d,并对瘤体早、中期增长速度有明显抑制作用（P＜0．05－0．001）,且外观生存质量也好于饮水组,但绞股蓝在30mg／只／日浓度时却无上述作用,另外,乌龙茶体外对于多种肿瘤细胞株增殖均有较强抑制作用,以200μg/mL浓度作用最强,抑制率均＞86．2％。     

Ca2+延长月季切花寿命研究

分别于2001年12月18～26日，2002年1月7～14日和13～21日用无水氯化钙配制成Ca^2 浓度为0mg／ml，2．5mg／ml，5．0mg／ml，7．5mg／ml，10．0mg／ml，15．0mg／ml，20.0mg／ml的Ca^2 溶液作保鲜剂，研究Ca^2 对月季切花瓶插寿命的影响。试验的不同浓度为不同处理组，每个处理组20枝花，从切花插入保鲜液开始，每隔6h或12h观察月季花瓣枯萎程度，并测量月季的花径、花重、吸水率。结果表明，Ca^2 溶液对月季切花有一定的保鲜作用。Ca^2 有利于保持花枝的水分平衡，增加花枝的鲜重，从而增加花瓣的紧张度，保持花的姿态，延长花的寿命。以10．Omg／ml Ca^2 浓度的效果最好。     

福清城头镇人群乙肝血清流行病学调查结果

目的：为了解城头镇人群己型病毒性肝炎（乙肝）流行现状,评价实施乙肝疫苗免疫15年后,人群乙肝病毒（HBV）感染的血清流行病学变动趋势。确定城头镇人群乙肝的综合预防控制策略。方法：采用多阶段分层整群随机抽样方法,对全镇29个行政村1－59岁人群共1500人进行了乙肝血清流行病学调查,并用酶联免疫法检测了乙肝病毒表面抗原（HBsA曲、乙肝病毒表面抗体（抗－HBs）。结果：城头镇调查人群HBsAg、抗－HBs、阳性率分别是7．2％、52％,与1992年病毒性肝炎血清流行病学调查结果9．75％的HBsAg携带率相比全人群HBsAg携带率下降26．36％。结论：接种乙肝疫苗是控制人群HBV感染的有效措施,能明显提高抗－HBs阳性率,降低HBsAg携带率,提高人群对HBV的免疫保护能力。     

胃仙治煎剂对大鼠实验性胃溃疡的作用

目的：研究胃仙治效剂对胃溃疡的作用。方法：接改良的OKabe法和使用乙醇制造大鼠实验性胃溃疡模型。实验大鼠分为四组，即对照组（蒸馏水）、法英替丁用（3．6mg／kg／日）、胃仙治高剂量组（浓度100％）、骨仙治低剂量组（浓度50％）。乙醇所致的溃疡组，模型制备后三天开始给药，乙醇所致溃病组模型制备前给药。均每日二次灌胃，连续15天，每次给药2．0ml／200g容积。最后一次给药的次日剖检大鼠，计算溃疡指数及观察有无穿孔。结果：给药组作用与对照组相比，均有显著性差异，胃仙治高剂量组作用优于法莫替丁组。结论：胃仙治煎剂具有抗大鼠实验性溃疡作用。     

Cd2+、Cu2+对坛紫菜生化效应研究

研究了不同浓度(0．1、0．5、1．0、10、20mg／L)和不同培养时间(12、24、48、72h)下，重金属(Cd2 和Cu^2 )对坛紫菜(Porphyra haitanensis)核酸(RNA和DNA)含量、过氧化物酶(POD)活性的影响．结果表明：1)10、20mg／L Cd^2 、Cu^2 暴露，POD活性先上升(48h前)后下降(48h后)，其它浓度组POD活性均随污染时间的延长而升高．24、48、72h均出现比较良好的剂量一效应关系．2)Cd^2 和Cu^2 对RNA、DNA含量的影响基本上表现为先上升后下降的时间效应关系，同一污染物浓度越大越早出现下降．同时出现随暴露剂量的增加，RNA、DNA含量先上升后下降或全部下降的剂量一效应关系．     

槐果碱对人红白血病K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

研究了槐果碱对人红白血病细胞株K562的增殖抑制和诱导细胞凋亡的作用，应用流式细胞仪进一步观察槐果碱对K562细胞周期的影响。结果表明：槐果碱对K562细胞生长有明显的抑制作用，且这种抑制作用呈浓度依赖性、时间依赖性。细胞经0．8g／L、1．0g／L的槐果碱作用48h后，即呈现典型的细胞凋亡形态学变化，作用72h后DNA凝胶电泳出现片段的梯形条带。流式细胞仪分析显示，用1．0g／L槐果碱使K562细胞阻滞于G0／G1期，作用72h后G0／G1细胞比例由38．0％上升到56．2％。槐果碱对人红白血病细胞K562的增殖具有明显的抑制作用，并能诱导其发生凋亡。     

苦楝的提取及其抑菌活性研究

采用超声波技术提取苦楝的有效成分；琼脂稀释法测得苦楝对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度(MIC)，分别为30mg／mL，7．5mg／mL，7．5mg／mL，最小杀菌浓度(MBC)分别为30mg／mL，15mg／mL，15mg／mL；用抑菌圈和抑菌百分率分别对不同浓度的苦楝对受试菌的抑制作用进行了比较。结果表明苦楝是一种理想的抑菌剂。     

野木瓜皂甙对HL60肿瘤细胞增殖的影响

研究野木瓜皂甙（Stauntoniae Saponin，SS）提取物对人类白血病细胞系HL60增殖的影响，为中草药抗肿瘤提供实验依据．以不同浓度SS作用于HL60细胞，然后用MTT比色法测定它对HL602细胞增殖的影响．当浓度为18mg／L时，SS能明显地促进HL60细胞的增殖（P〈0．01）；浓度大于90mg／L时，SS对HL60细胞增殖产生抑制作用；当浓度为2253mg／L时，抑制率高达63．15％（P〈0．01）．浓度大于18mg／L后，细胞增殖的抑制率与SS浓度呈线性相关，r=0．8928（P〈0．001）；SS的LC50为1652mg／L．野木瓜皂甙提取物对HL60细胞的增殖有明显的双向调节作用，即在较小范围的低浓度区域内有促进HL60细胞增殖的作用，浓度增大后则改变为抑制作用；浓度越大，抑制作用越强．     

CdCl2对质粒DNA的作用

镉是一种致癌物质，其致癌作用与Cd^2 有着直接或间接的作用．用一定浓度的CdCl2液处理质粒pUC119和pCPP9，通过琼脂糖凝胶电泳分析，研究了镉对质粒DNA结构的影响．结果表明，CdCl2溶液2．5μg／mL作用12h或20μg／mL作用1h后，能导致质粒pCPP9的DNA损伤；浓度40μg／mL以上的CdCl2作用12h后，引起质粒pUC119的DNA损伤；且随着CdCl2浓度增大和作用时间的延长，对质粒DNA的损伤作用增强．     

不同浓度的锰对小麦幼苗叶片光合特性的影响

研究了不同浓度的Mn^2＋对小麦幼苗叶片光合特性的影响。实验结果表明,不同浓度的Mn^2＋处理都能够提高小麦幼苗的叶绿素含量,当M矿浓度为1．0mg／L、1．5mg／L时,叶绿素含量分别比对照增加了54．32％、71．92％。不同浓度的Mn^2＋都能够提高小麦叶绿素荧光动力学参数Fo,最大荧光产量Fm,ETR,NPQ及qNP,当Mn^2＋浓度为1．0mg／L分别比对照增加了2．78％,6．20％,32．09％,6．62％,0．93％。1．0—1．5mg／L的Mn^2＋对小麦幼苗生长具有促进作用。