环毛蚓纤维素酶C_X的初步研究

从环毛蚓（Ｐｈｅｖｅｔｉｍａａｓｉａｔｉｃａ）提取纤维素酶ＣＸ,用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０凝胶过滤和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ２５离子交换层析进行分离纯化,得ＣＸⅠ和ＣＸⅡ,分别测定了ＣＸ,ＣＸⅠ和ＣＸⅡ的最适ｐＨ和最适温度．     

参环毛蚓肠道内源性纤维素酶的分离纯化及酶学性质分析

通过对参环毛蚓肠道组织提取液进行DEAE阴离子交换及凝胶过滤层析,获得参环毛蚓单一的内源纤维素酶的活性组分.根据AlpHaEaseFCTM软件计算出该组分分子质量约为45 ku,命名为Cx1.羧甲基纤维素钠(so-dium carboxymethylcellulose,CMC)法对Cx1进行酶学性质分析.分析结果显示:对于底物羧甲基纤维素钠,Cx1的米氏常数(Km)为0.289 mg/mL,Vmax为0.446 U.mL-1.min-1,反应最适温度为55℃,最适pH为6.0,在40~60℃、pH5.0~8.0具有较好的热稳定性和pH稳定性,其相对酶活力都能保持在55%以上.Ag+和Ba2+对Cx1起显著激活作用,K+、Zn2+、Mg2+、Ca2+、NH4+、Ni2+、Na+、Pb2+部分抑制酶活性,Cu2+离子对Cx1有完全抑制作用,而Fe2+对酶活力无明显影响.     

直隶环毛蚓消化道扫描电镜观察

采用扫描电镜方法对直隶环毛蚓消化道各个部位内壁表面的超微结构进行观察，并对其各部位的结构进行了比较，结果表明：环毛蚓消化道各部位已有明显分工，各部位结构特点与其功能相适应。同时讨论了各部位的生理功能。     

白颈环毛蚓皮肤的超微结构

详细描述了白颈环毛蚓皮肤的超微结构 ,讨论分析了与寡毛纲其他类群动物的异同 .应用透射电子显微镜技术观察到 ,白颈环毛蚓的皮肤主要由角质层、表皮和皮肤附属物构成 .其中 ,角质层主要由多层胶原纤维构成 ,表皮中除了支持细胞和基细胞外 ,有小颗粒蛋白细胞、大颗粒粘液细胞和网状粘液细胞三种不同的分泌细胞 ,环带部分有颗粒环带细胞和球状环带细胞两种不同的分泌细胞     

Bt-8010对环毛蚓生长的影响研究

采用高效Bt-8010(8000IU/mg)以不同浓度的稀释液对环毛蚓进行喷淋试验,观察环毛蚓的生长发育情况.结果表明,50倍浓度影响环毛蚓的正常生殖,稀释100倍浓度对环毛蚓生长有干扰作用,稀释浓度200倍以上对环毛蚓生长和繁殖没有影响.     

赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)纤维素酶的初步研究

将赤子爱胜蚓整体组织匀浆的抽提液,经Sephadex G-75凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换及在FPLC仪上用Mono Q柱分离,可以纯化到多种组分的纤维素酶,研究了它们的酶学性质,证明均为C_X酶。     

秉氏环毛蚓(Pheretima pingi Stephenson)雄性生殖细胞减数分裂

以秉氏环毛蚓雄性生殖细胞为实验材料,通过石蜡连续切片方法,对雄性生殖细胞的减数分裂进行了初步研究,并分折了雄性生殖细胞在精巢囊、贮精囊中从形成到成熟的过程。进一步了解秉氏环毛蚓的染色体数2n=8。这为促进蚯蚓生物学研究、人工养殖和综合利用,以及蚯蚓的远缘杂交和育种选种提供理论依据。     

气相色谱／质谱法研究华南参环毛蚓的脂肪酸

本文作者用醚提取华南参环毛蚓中的脂肪酸甘渍酯，然后KOH－甲醇甲酯化，利用气相色谱／质谱／计算机联用技术研究其脂肪酸组成，从昕蚓及体腔液中均检出葵酸，月桂酸，十三酸，10－甲基十二酸，豆蔻酸，十五酸，棕榈酸，亚油酸，油酸，硬脂酸等10种脂肪酸和2，6－二异丁基－甲基苯酚。     

威廉环毛蚓Pheretima guillelmi(Michaelsen)神经内分泌系统的研究

以威廉环毛蚓为实验材料,对其神经内分泌系统的显微、亚显微结构及其对体表水交换的影响作了初步研究.通过大量的实验,说明在威廉环毛蚓的中枢神经系统中存在三种不同类型的细胞,即A、B和C三种细胞.A细胞数量最多,位于脑神经节、咽下神经节和腹神经索中.B细胞主要位于咽下神经节.C细胞主要位于咽下神经节和腹神经索中.神经内分泌活动与季节有关,A细胞和C细胞的分泌活动随季节变化而不同,B细胞的内分泌活动受季节的影响不大.蚯蚓体表的水交换受神经内分泌调控,这种因子仅存在于脑神经节内.     

威廉环毛蚓[Pheretima guillelmi(Michaelsen)]前列腺显微及亚显微结构的研究

环毛属(Pheretima)是我国常见的和优势的属,其中大多数的种类具有发达的前列腺,该腺属于雄性生殖器。威廉环毛蚓的前列腺由小叶组成,每小叶内有一至几个分泌小管。前列腺腺细胞及其核的形态多样。腺细胞的分泌功能旺盛,在细胞质中有很多分泌颗粒、大量的粗面内质网和高尔基体。前列腺腺细胞中的分泌颗粒与蚯蚓精子的营养和活动有关,可能与其成熟的程度也有关。前列腺的分泌活动可能还与季节有一定的关系,因为在生殖季节里比较旺盛。     

环境因素对秉氏环毛蚓(Pheretima pingi)繁殖的影响

以秉氏环毛蚓(Pheretima pingi)为实验动物,通过比较秉氏环毛蚓在不同的密度、含水量、温度及酸碱度梯度下的生长发育和繁殖状况,分析蚯蚓繁殖所需的最佳条件,探讨蚯蚓人工养殖的最优方法.结果表明:蚯蚓生长发育和繁殖的最适宜条件是饲养密度为106条/m2、温度为24℃、土壤含水量为20.00%和pH值为6.6.因此,蚯蚓的人工养殖需要提供合适的生长密度、温度、湿度和酸碱度.     

三种兽药添加剂对赤子爱胜蚓体内纤维素酶和SOD酶的活性影响

研究了土壤生物赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)分别暴露于兽药添加剂喹乙醇、阿散酸和土霉素后,其体内纤维素酶活力和超氧化物歧化酶(SOD酶)活力随剂量和时间的变化.结果表明,阿散酸在浓度高于1 000 mg/L、土霉素在浓度高于125 mg/L范围内对蚯蚓体内纤维素酶活力有抑制作用.高浓度的阿散酸(>500 mg/L)对SOD酶活力有促进作用,喹乙醇对蚯蚓体内SOD酶活力具有明显的促进作用,500 mg/L时就表现出极显著性差异(P<0.01),并随浓度升高而增强.实验表明采用赤子爱胜蚓体内的纤维素酶和SOD酶作为生物标志物来评价兽药添加剂对土壤环境生态系统的潜在影响和危害,具有十分现实的意义.     

在柑桔生产中,蚯蚓、蚓粪、柑桔菌根和士壤酶活性的相互关系

1984—1987年开展了投施蚯蚓、蚓粪和接种菌根对柑桔植株和土壤酶活性效应的研究,获得以下效果:①在塑料容器中投蚯蚓不会伤害柑桔根系,并能促进柑桔的菌根感染,其感染率可达88％左右;②在多种无土基质配方中混入蚓粪,能使有机质和含磷量分别提高0.029—0.225和0.5—1倍;③蚓粪混入容器育苗的无土基质中,使转化酶与过氧化氢酶活性分别增加10％及40％,但脲酶活性略有下降;果园中施蚯蚓、蚓粪使土壤中三种酶的活性增加,其中蚓粪使转化酶与过氧化氢酶的活性增加幅度较大。而投施蚯蚓增加脲酶活性最大。④无土基质中的枳实生苗加入蚓粪又接种菌根的比单加入蚓粪的株高增加1.62倍,比单接种菌根的株高增加2.61倍.     

灰绿曲霉产纤维素酶的研究

灰绿曲霉(Aspergillus glaucus)发酵液通过硫酸铵盐析、Sephadex G-100分子筛、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱和Phenyl Sepharose Fast Flow疏水层析,分离纯化一种外切葡聚糖酶(CBH)和一种内切葡聚糖酶(EG).通过SDS-PAGE和凝胶柱层析法测定分子质量表明:CBH全酶分子质量为71 ku,由两个分子质量为35 ku的同型亚基组成;EG为单体蛋白,全酶分子质量为32 ku.酶学性质研究表明:CBH催化pNPC的最适pH为6.0,最适温度为55 ℃,酶活在pH 5.0～8.0 区间和温度低于55 ℃时稳定;EG催化CMC-Na的最适pH为4.0,最适温度为50 ℃,酶活在pH 3.5～7.5区间和温度低于65 ℃时稳定.Na+、K+、Ba2+、Mg2+以及NO-3和SO2-4对CBH和EG酶活均无影响;Ca2+和Mn2+对CBH有激活作用,Fe2+和Mn2+对EG有激活作用,而Zn2+、Cd2+和Cu2+对CBH和EG均有不同程度的抑制效应.酶动力学分析表明:CBH催化pNPC水解的米氏常数Km值为1.4 mmol/L(pH 6.0,55 ℃),EG催化CMC-Na水解的米氏常数Km值为5.0 mg/mL(pH 4.0,50 ℃).