成年大鼠急性脊髓全横断损伤后差异表达蛋白的蛋白组学研究

为进一步阐明脊髓损伤(SCI)的修复机制,对SD成年大鼠进行急性全横断损伤,将损伤前后的大鼠脊髓总蛋白质进行固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE),经考马斯亮蓝染色后,借助PDQuest软件从中找出差异表达蛋白质点.应用基质辅助激光解吸电离串联质谱对差异表达的蛋白质点进行鉴定,成功鉴定出38种蛋白质.其中表达上调的蛋白质有电压依赖的阴离子选择通道蛋白1,α-烯醇酶、硫氧还蛋白依赖的过氧化物还原酶3、生长因子受体结合蛋白2等,表达下调的蛋白质有谷氨酰胺合成酶、14-3-3 epsilon、磷脂酰乙醇胺结合蛋白1、血红蛋白β-1等.鉴定出的差异蛋白多数涉及到神经细胞的增殖、凋亡、应激反应等过程.     

子宫内膜异位症小鼠差异蛋白组学研究

利用所构建的BALB/c小鼠子宫内膜异位症(EMs)模型,通过对正常和EMs小鼠在位子宫内膜样品双向电泳图谱的比较,找到61个差异较明显的蛋白质斑点,结合质谱分析技术和数据库信息检索最终鉴定出23个蛋白,包括11个调控蛋白、4个信号转导相关蛋白、1个代谢相关蛋白、5个膜联蛋白、1个细胞骨架蛋白和1个RNA解旋酶.将蛋白质组学技术应用于EMs的研究,可以从分子水平探索EMs的发病机理,对EMs的诊断及治疗具有重要意义.本研究结果为进一步探索EMs发病机理提供实验基础,同时也为寻找该病早期诊断的标志物和治疗的靶点提供理论依据.     

黄瓜钝绥螨对茶黄螨的功能反应

研究了黄瓜钝绥螨雌成螨对不同虫态茶黄螨的功能反应．结果表明：黄瓜钝绥螨雌成螨对茶黄螨卵、幼螨、静止期螨和雌成螨的功能反应均符合Holling方程Ⅱ型，搜寻效率α与处理时间Tb值各为0．1144，1．2433；0．4422，0．2243；0．2861，0．3577；0．4180，0．2676．黄瓜钝绥螨对茶黄螨各虫态均有很好的捕食能力，其中对幼螨的捕食能力最强．     

基于双向电泳-MALDI质谱分析的蛋白组学本科教学实验

蛋白质组学已成为研究生物学过程及直接描述细胞和组织变化的有力手段。双向电泳结合生物质谱技术是蛋白质组学研究中的最常用的蛋白质分离和鉴定技术之一。该项技术是生物技术专业本科生必须掌握的一门实验技术。通过双向电泳-MALDI质谱分析的蛋白组学本科教学实验的设计,建立了完善的本科教学实验方案,让大型仪器全面支撑本科教学实验,进一步提高了大型仪器的利用率。     

丰香草莓叶片诱导不定芽的研究

以草莓品种丰香叶片为外植体,研究基本培养基及不同植物生长调节剂组合对不定芽再生的影响。结果表明:丰香不定芽分化的最适基本培养基为MS培养基;TDZ与2,4-D组合能明显提高丰香草莓叶片的再生效果;MS基本培养基附加2.0mg/L TDZ和0.05mg/L 2,4-D,不定芽再生率为67.3%,平均每叶再生芽为2.34个。试验还发现TDZ的诱导效果显著优于6-BA。     

重组纤溶酶原激活剂及其突变体的表达研究

利用PCR技术 ,获得了人体组织型纤溶酶原激活剂tPAcDNA的缺失突变体———rPA ;在此基础上 ,运用定点突变技术 ,得到rPA的定点突变体———rPA(KHRR2 96～ 2 99AAAA) ,rPA(A473S)和二者的复合突变体rPA(KHRR2 96～2 99AAAA A473S) ;将rPA及其 3个突变体分别亚克隆至原核表达载体pET 2 8a( )中 ,获得表达载体pErA ,pErA(K) ,pErA(A)和pErA(KA) .酶切鉴定和序列分析结果均表明实现了实验设计的氨基酸突变 .表达载体转化大肠杆菌 ,经IPTG诱导、菌体裂解及SDS PAGE电泳分析发现 ,只缺失而无突变的pErA和突变的pErA(A)都未表达目的蛋白 ,突变体pErA(K)与pErA(KA)则获高水平表达 ;蛋白产量分别占菌体总蛋白的 35 .97%与 37.71% ,分子量均为 39.6kD .Westernblotting显示 ,表达产物与抗tPA抗体呈特异性阳性反应 .该产物经初步纯化后进行复性与活性 (mFAPA)测定 ,结果表明其复性产物具有明显的体外纤溶活性 .以上结果为rPA突变体的进一步纯化、体内活性研究以及规模化制备提供了基础     

不同环境下温室黄瓜叶片蒸腾速率的研究

为了研究环境对温室黄瓜叶片蒸腾速率的影响，以P-M方程为基础模拟了温室黄瓜叶片蒸腾速率在不同温度、相对湿度、光照和土壤温度下的响应状况。拟合结果表明：不同温度、相对湿度、光照、土壤温度下蒸腾速率的模拟值与实测值一致性较好，相关系数平方R2分别为0．728、0．667、0．818和0．824。结果表明：该模型对实现设施农业的高产、优质高效和持续发展具有重要的理论意义和实用价值。     

黄瓜再生体系的建立

本实验以黄瓜(CucumissativusL.)品种“LS-21”为实验材料,按如下培养基配方:MS培养基,附加6-BA(0.8～1.6)mg/l IAA0.2mg/l;不同浓度的6-BA分别与NAA及2,4-D配合,研究影响黄瓜组织培养的诸多因素,建立了黄瓜离体子叶高频不定芽再生系统。主要结果如下:黄瓜5-6日苗龄无菌苗子叶作外植体,愈伤组织生长旺盛,芽诱导率高;7-8天的外植体则生长势弱,不利再生芽的分化。6-BA(1.2～1.6)mg/l IAA0.2mg/l,芽分化频率较高,其中6-BA1.2mg/l的芽分化率可达51%;待再生芽长至2-3cm时移入生根培养基(1/2MS 0.1mg/LIAA),生根率达90%,40-60d可得到完整再生植株。     

Halomonas aquamarina盐敏感质膜蛋白组的研究

革兰氏阴性细菌外膜蛋白对细菌外部环境因素的调节功能已受到高度重视,但有关细菌质膜的作用报道极少.为研究质膜蛋白在抗盐机制中所起的作用,采用蛋白质组学技术比较深海中度嗜盐菌Halomonasaquamarina在生理(0.56mol/LNaCl)、较高(1mol/LNaCl)和高(2mol/LNaCl)浓度下质膜蛋白差异表达的结果.结果表明,高盐浓度下出现2个新蛋白,质谱分析证明其为ABC转运蛋白.这些发现对从细胞膜整体角度了解细菌的抗盐机理具有重要意义.     

阪崎肠杆菌蛋白质组学研究及特征蛋白的质谱分析

阪崎肠杆菌为婴幼儿奶粉中新出现的食源性致病菌,生态学及毒力因子尚不清楚．利用双向电泳通过裂解液组成、上样量、聚焦时间等相关技术的比较研究和条件优化,获得阪崎肠杆菌菌体全蛋白双向电泳图谱,提取部分蛋白质点进行胰酶酶解,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI—TOF／MS）测定肽质量指纹图谱,MASCOT软件查询Swiss—Prot数据库,最终鉴定出阪崎肠杆菌中特异性蛋白,包括大肠杆菌氧化态硫醇过氧化物酶A链,大肠杆菌SfaA蛋白,麦芽糖高亲和结合蛋白A链,饥饿应激蛋白,阪崎肠杆菌组成型表达蛋白,鼠伤寒沙门氏菌脱氧核糖磷酸醛缩酶,大肠杆菌O157铁离子摄取调节子等,反映出阪崎肠杆菌与肠杆菌科近似菌株蛋白表达的相似性及生长特性．     

蛋白质组学的研究方法

蛋白质组学是后基因组时代出现的一个新兴研究领域,具有巨大的商业应用前景,将会推动整个生命科学的发展．本文对蛋白质组学的定义和主要使用的研究方法作一简要介绍．     

拟南芥T-DNA插入突变体scc8-D的蛋白质组学研究

采用双向凝胶电泳对拟南芥T-DNA插入突变体scc8-D和对照材料cry1cry2的植株总蛋白进行了分离,通过考染显色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.然后选取30个差异蛋白质点用MALDI-TOF-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,有22个蛋白质点得到了可靠鉴定.其中在scc8-D突变体中有3个蛋白上调,16个蛋白下调,有3个蛋白仅在cry1cry2中表达.分析发现,这些差异蛋白可能参与了碳水化合物代谢、光合作用、光呼吸、胁迫响应、蛋白质合成和氧化还原平衡等过程.这些蛋白中光合蛋白占32%,说明这些与矮化相关的调节性蛋白和功能性蛋白丰度的表达受到光的调控,从而抑制了植物下胚轴的伸长.     

蛋白质组学及其研究进展

蛋白质组学作为后基因时代研究的一个重要内容,已广泛深入到生命科学和医药学的各个领域,近年来蛋白质组学技术发展迅猛。本文对蛋白质组学的概念、产生背景进行了介绍,综合论述了蛋白质组学的技术路线以及研究进展。     

叶色突变体在遗传学实验教学中的应用

该文根据水稻叶色白化性状表现时期早且容易观察,以及性状为单基因控制的隐性性状,其遗传符合分离规律的事实,提出利用叶色突变体进行遗传分离实验教学的构思。结果表明,该实验设计不仅是可行的,而且还大大提高了学生的学习兴趣,同时该实验也是科研成果应用到实验教学改革中的一个有益尝试。     

蛋白质组学在植物生命研究中的应用

文章综述了蛋白质组学及蛋白质组学在植物蛋白研究中的应用.重点阐述了植物光合作用蛋白的研究、种子发育时期特异蛋白的研究、逆境条件下蛋白表达的研究、植物次生代谢物的研究.并对未来植物蛋白质组学作了展望.     

蛋白质组学在植物生命研究中的应用

文章综述了蛋白质组学及蛋白质组学在植物蛋白研究中的应用。重点阐述了植物光合作用蛋白的研究、种子发育时期特异蛋白的研究、逆境条件下蛋白表达的研究、植物次生代谢物的研究。并对未来植物蛋白质组学作了展望。     

铬对黄瓜幼苗的毒害研究

以丁选-3号黄瓜为实验材料,研究了不同浓度六价铬处理液对黄瓜幼苗的形态指标以及对根系活力、SOD活性、MDA含量等各项生理生化指标的影响。以含Cr6 浓度为0、5、10、20、40、80 mg/L的1/2MS营养液对黄瓜进行处理,发现黄瓜的株高受到一定的抑制,根的生长受到抑制。通过测定生理生化指标发现,随着Cr6 的增加,根系活力逐渐下降,后来又出现了小幅度的回升;SOD活性随着浓度的升高而逐渐升高,但却随着处理时间的延长而降低;MDA的含量则随着Cr6 的增加逐渐增加。结果表明,Cr6 对黄瓜产生了一定的毒害作用,导致体内保护酶活性受到抑制,膜系统受到伤害,从而影响黄瓜正常生长,且这种毒害随着Cr6 浓度的增加而加重。     

叶用银杏研究进展

文章根据国内外的研究资料对银杏叶的有效成分，药理作用，栽培技术等方面的最新研究成果进行了全面综述，并对我国发展中用银杏产业提出了建议。     

天津科润黄瓜研究所

天津科润黄瓜研究所（原天津市黄瓜研究所）是国内唯一以黄瓜为研究对象的科研与开发机构，自1985年5月建所始即实行经济自立。