高迁移率蛋白HmgB3和组蛋白Mlh1维持了四膜虫小核稳定性

高迁移率族蛋白(High Mobility Group protein,HMG)和组蛋白H1结合染色质DNA,在维持染色质的高级结构、基因组基因表达调控以及DNA修复等方面发挥重要作用。嗜热四膜虫细胞含有一个体细胞系的大核和一个生殖系的小核,小核特异定位的高迁移率蛋白HmgB3或组蛋白Mlh1的缺失并未引起生长期细胞的异常表型。本研究通过同源重组的方法构建了HMGB3和MLH1的双敲除细胞突变株ΔHMGB3ΔMLH1。突变细胞在营养生长期能够正常增殖,但对甲基磺酸甲酯较为敏感。缺对PCR检测发现突变株中小核染色体有缺失现象,并且不能完成有性生殖。有性生殖过程中,减数分裂后的小核异常降解。结果表明高迁移率蛋白HmgB3和小核组蛋白Mlh1共同维持了四膜虫小核的稳定性,并可能具有功能上的冗余性。     

“降落伞”核的演变和大核原基的发育

应用DAPI荧光染色术对冠突伪尾柱虫有性生殖过程中两种结构演化最复杂的核现象进行了观察。在“降落伞”的形成并向第一次成熟分裂中期转变期间,“伞盖”和“重物”染色质团之间自始至终由DNA荧光丝状物相联,“重物”染色质团随着“伞盖”部染色质丝缩短变粗而逐渐变小,并在中期染色体形成的同时消失。为解释上述演变过程,在讨论中提出了一个细胞学动态模型。在大核原基的发育过程中,于染色体多线化之前先由染色质丝转变为短杆状染色体。这些染色体移向核的一极,然后从一端开始解螺旋并向核的另一极伸展。在此期间,可以观察到某些染色体成双存在。     

华美游仆虫大、小核的透射电镜和生化抽提-扫描电镜观察

应用透射电镜术和生化抽提扫描电镜术显示,华美游仆虫大核核膜表面形成孔状结构,并有相当数量的附着物;小核核膜表面也有孔状结构,但附着物较少.此外,非分裂期大核染色质凝缩排列形成染色质团,染色质团由染色质颗粒构成,各个染色质颗粒含有许多均质的染色质小体;大核DNA合成期间,大核复制带区的染色质团分解成染色质小体.据所得结果认为,染色质小体是构成游仆虫大核的基本结构单元;大、小核形态上的差异与其在无性生殖期间核、质间的功能活动及物质联系有关.     

棘尾虫Stylonychia mytilus包囊形成和解脱过程的研究

棘尾虫形成包囊时,虫体变得瘦长并团缩成圆球,毛基系也随着逐步脱落,它的两个大核由椭圆形变成纺棰形或长圆形,在虫体中部发生纵向融合,四个小核也减少成为两个,最终成为由两层包囊膜围着的具一个圆形大核和两个小核的休止包囊;棘尾虫脱囊时,融合大核发生特殊的染色质改组现象:即大核染色质变得中部着色深周边着色浅,以后周边的着色程度也变深;或者是大核染色质变得一部分着色深另一部分着色浅,以后另一部分着色也加深。接着,一个融合大核分裂成为两个大核,两个小核也分裂为四个,随着核器的变化,逐渐长出毛基系,虫体同时也逐步拉长,不久便穿膜而出。     

八肋游仆虫中ECD1基因的克隆及序列分析

含有CHROMO(chromatin organization modifier)结构域的蛋白参与了异染色质的形成及转录沉默复合物的形成.原生动物游仆虫细胞中既含有转录活跃的大核也含有转录沉默的小核.本实验应用PCR技术从八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)中获得了一个编码含有CHROMO结构域的基因ECD1(Euplotes chromo domain-con-taining protein 1)(GeneBank登录号为FJ357578).大核中含有该基因的微小染色体全长1105 bp.小核中该基因内无内部删除序列IES的存在.通过RT-PCR,证实该基因开放阅读框为645 bp.大核基因中含有三个内含子,转录过程中这些内含子均符合一类内含子GU-AG剪切规则.DNAstar软件分析,该基因编码的蛋白质包含214个氨基酸,分子量24.7 kDa,等电点为5.48.结构域聚类分析表明Ecdl蛋白可能执行与四膜虫异染色质蛋白Pddlp和Pdd3p相似功能,参与大核发育过程中异染色质的形成和IES序列的删除.     

大蒜对8—羟基喹啉诱发的夏枯草花粉孢子畸变的保护作用

以夏枯草花粉孢子的微核率、小核率、核分叶率以及三向分裂率四个指标，测定大蒜均浆液（GJ）对8－羟基喹啉诱发作用的影响。结果表明，用GJ浸泡的夏枯草花苗能降低诱发的微核率、小核率、核分叶率以及三向分裂率，差异显著。说明大蒜有较强的抗诱变能力，具有修复染色体损伤和DNA错误复制的能力。     

一种腹柱虫包囊形成和解脱过程中核的行为研究

腹柱虫Ｇａｓｔｏｓｔｙｌａ ｓｐ．成包囊过程中,其纤毛器的分化不论是从细胞前端或是细胞后端开始,其大、小核的变化是相同的。首先,两个大核先出现复制带,然后两个大核融合成一个圆球形融合大核。另外也观察到二核包囊和四核包囊,融合大核在包囊进入休眠之前出现复制带,改组后的融合大核在休眠包囊中分裂为二。在成包囊过程中,两个小核中的一个被吸收。出包囊时,小核分裂为二,融合大核行无丝分裂成两个大核。     

卡龙游仆虫无性分裂期间皮层结构分化的研究

利用蛋白银、孚尔根和银浸等染色方法对分类上有争议的Ｅ．ｃｈａｒｏｎ的形态结构和无性分裂过程中皮层的发育分化进行了研究。Ｅ．ｃｈａｒｏｎ表面有额腹、横、尾部棘毛１０、５、４根,背触毛１２例,大核倒“Ｃ”形,小核球形．Ｅ．ｃｈａｒｏｎ在无性分裂过程中,皮层的纤毛器官多由相应原基发育而成（前仔虫的口围带,口侧膜由老口改组后承继下来）。     

棘尾虫无性分裂期间大小核的演化

棘尾虫Stylonychia mytilus是原生动物纤毛虫纲,腹毛虫目中一种常见的纤毛虫。身体扁平,肾形,背面略凸,腹面平坦,体长约100～300μ。腹面的棘毛,计有八根额毛,五根腹毛,五根肛毛和三根尾毛。背面则具五列背毛。分裂间期的核器官,是二个大核和二个小核。大核呈长椭圆形,长约43μ;小核圆球形,直径约为4.4μ。张作人等曾在棘尾虫Stylonychia mytilus上,通过切割再生、摘除大小核及移动大核的     

近亲游仆虫接合生殖的研究

应用蛋白银染色方法和扫描电子显微镜技术研究了近亲游仆虫的接合生殖过程。并对接合生殖过程中皮层的两次演化,大、小核的不同变化,新、老结构的关系和老结构的命运等进行了讨论。     

一种游仆虫无性生殖周期中大核及其DNA含量的变化

应用光学显微镜、显微光度计和定量细胞化学技术研究了一种游仆虫无性生殖周期中大核及其 DNA 含量的变化特征,获得如下结果:(1)游仆虫细胞周期分成 G_1期、S 期和 D 期,各个时期在整个细胞周期中所占的时间速率分别为36%、59%和5%。(2)游仆虫细胞周期中,G_1期大核迅速增大,但此时大核无 DNA 合成现象,DNA 分布密度随大核增大而降低;S 期大核前期增大,此后变小,大核 DNA 含量连续增加,大核 DNA 分布密度也随着增高。8期结束后,大核 DNA 含量相当于 G_1大核的两倍;D期大核又显著增大,DNA 分布密度稍高于 G_1期大核的水平。(3)由游仆虫孚尔根反应大核的形态,大核 DNA 三维吸收图像和显微光度术定量分析数据表明,游仆虫大核 DNA 含量的变化仅发生在 S 期,S 期大核中 DNA 合成与大核改组带相联系。     

卡龙游仆虫(Euplotes charon)无性分裂期间皮层结构分化的研究

利用蛋白银、孚尔根和银浸等染色方法对分类上有争议的 E.charon的形态结构和无性分裂过程中皮层的发育分化进行了研究 .E. charon表面有额腹、横、尾部棘毛 10、 5、 4根,背触毛 12列,大核倒“ C”形,小核球形 .E. charon在无性分裂过程中,皮层的纤毛器官多由相应原基发育而成（前仔虫的口围带、口侧膜由老口改组后承继下来） .     

近亲游仆虫接合生殖的研究

应用蛋白银染色方法和扫描电子显微镜技术研究了近亲游仆虫的接合生殖过程.并对接合生殖过程中皮层的两次演化,大、小核的不同变化,新、老结构的关系和老结构的命运等进行了讨论.     

一种游仆虫无性生殖周期中大核及其 DNA 含量的变化

应用光学显微镜、显微光度计和定量细胞化学技术研究了一种游仆虫无性生殖周期中大核及其DNA含量的变化特征,获得如下结果:(1)游仆虫细胞周期分成G_1期、S期和D期,各个时期在整个细胞周期中所占的时间速率分别为36%、59%和5%。(2)游仆虫细胞周期中,G_1期大核迅速增大,但此时大核无DNA合成现象,DNA分布密度随大核增大而降低;S期大核前期增大,此后变小,大核DNA含量连续增加,大核DNA分布密度也随着增高。S期结束后,大核DNA含量相当于G_1大核的两倍;D期大核又显著增大,DNA分布密度稍高于G_1期大核的水平。(3)由游仆虫孚尔根反应大核的形态,大核DNA三维吸收图像和显微光度术定量分析数据表明,游仆虫大核DNA含量的变化仅发生在S期,S期大核中DNA合成与大核改组带相联系。     

阔口游仆虫Euplotes eurystomus无性分裂周期中大小核和细胞质的演化

E.eurystomus的无性分裂过程是以大核发生改组为起点的.“3”字形大核的两个末端几乎同时发生“改组带”(reorganization band),并向中间移动,直至相互融合、凝缩,最后经无丝分裂分开成两个仔大核.在大核进行改组不久,小核也开始变化.它首先离开原位朝大核中心位置移动,在移动过程中,原来小核里的结构由致密逐渐变得松散,并不易着色,而且体积膨大并由圆形变成椭圆形,随后出现着色深的线条状结构(染色体),逐渐分开趋向两极,最后分裂成两个仔小核.细胞质在无性分裂周期中明显的变化是不断地增加体积,在大核融合凝缩期间,细胞质的体积逐渐达到最大,以后出现分裂沟收缢,直至分裂成两个仔虫.此外,E.eurystomus在无性分裂过程中,其大核会出现生理意义不明,但可能是培养条件变化而引起的第二次改组现象.     

加拉帕戈斯似殖口虫的形态学、细胞发生学与分子系统学

利用活体观察和蛋白银染色技术对采自甘肃省永昌县马铃薯农田的加拉帕戈斯似殖口虫形态学和细胞发生学特征进行研究,通过提取物种的DNA信息,获得该种的核糖体小亚基基因(SSU rDNA)序列,通过序列比对和构建系统发育树对殖口虫科属间的系统发育关系进行探讨.结果表明,该种形态学特征为:活体大小约为(60～85μm)×(20～25μm),虫体呈长椭圆形,两端收缩钝圆, 3列额腹棘毛列, 1根口棘毛,横前棘毛、横棘毛和尾棘毛均缺失,大核6～8枚,小核1～4枚附着于大核附近.细胞发生学特征为:老口围带被前仔虫完整保留;第Ⅱ～Ⅴ列棘毛原基以初级发生式发生,第Ⅰ列棘毛原基单独发生;无横棘毛、横前棘毛和尾棘毛的形成;左右缘棘毛原基产生于老结构; 3列背触毛原基产生于老结构.分子系统学分析表明加拉帕戈斯似殖口虫与中华殖口虫和殖口虫属未定种以较高的置信值聚为一支,与殖口虫科其他属形成姐妹支,分子信息再次印证殖口虫科为非单元发生.     

冠突伪尾柱虫(Pseudourostyla cristata)无小核体的人工获得与快速筛选

当冠突伪尾柱虫进入二裂中期,小核排列于融合大核的左侧时,在二者之间作一纵向切割,手术简便,容易获得无小核体.利用某些特定的活体特征作标记,可以快速准确地识别和筛选出无小核体并建立其细胞系.     

衰老型上海四膜虫细胞在无性生殖过程中的形态和形态发生

记述了衰老型上海四膜虫细胞在无性生殖过程中的形态和形态发生．其大核经无丝分裂,成为近似相等的两部分,分别传给前、后仔虫．小核的有无与大核的分裂机制无关．分裂前期其旧口器在新口器发生时被逐渐吸收,只剩下一些痕迹．在新口器分化趋于完全时也开始重建,最后恢复正常形态．新口器位于分裂沟后,且和旧口器在细胞的同侧,分裂末期成为后仔虫的口纤毛器,旧口器经过重组成为前仔虫的口纤毛器     

棘尾虫无性分裂期间大小核的演化

棘尾虫 Stylonychia mytilus 是原生动物纤毛虫纲,腹毛虫目中一种常见的纤毛虫。身体扁平,肾形,背面略凸,腹面平坦,体长约100～300μ。腹面的棘毛,计有八根额毛,五根腹毛,五根肛毛和三根尾毛。背面则具五列背毛。分裂间期的核器官,是二个大核和二个小核。大核呈长椭圆形,长约43μ;小核圆球形,直径约为4.4μ。     

卡龙游仆虫Euplotes charon的形态和形态发生的研究

利用蛋白银,孚尔根和银浸等染色方法对分类上有争议的E.charon的形态结构和无性分裂过程中皮层的发分化及核器的演化进行了研究,E.charon表面有额腹,横,尾部棘毛10,5,4根,背触毛12例,大核倒“C”形,小核球形,E.charon在无性分裂过程中,皮层的纤毛器官多由相应原基发育而成（前仔虫的口围带,口侧膜由老口改组后承继下来）,核器演化的详细过程类似于其他游仆虫,随机抽取100个E.charon,对其长,宽,棘毛数,背触先列进行统计,做出直方图进行分析,并与E.Patella进行了详细比较,作者认为E.charon应独立为一个种。