家兔源致病性维罗纳气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

四川某兔场家兔爆发以咳嗽、打喷嚏和流鼻液等症状的疾病.为调查其病因,分别无菌采集5只病兔和临床健康兔肺脏分离细菌,对分离出的4株优势菌进行16S rDNA PCR扩增测序分析鉴定,并对分离的细菌进行药敏试验和小鼠致病性试验.结果从发病家兔肺脏分离到4株维罗纳气单胞菌,而从临床外表健康家兔肺脏未分离到该菌;本试验分离的4株维罗纳气单胞菌均对小鼠有致病性,能引起小鼠发病并部分死亡;分离菌对大多数氟喹诺酮类、β-内酰胺类、四环素类药物敏感,对大部分氨基糖苷类药物耐药.试验首次从家兔肺脏中分离到致病性维罗纳气单胞菌,并筛选出敏感药物,为家兔呼吸道疾病的防控提供了参考.     

鼠奇异变形杆菌的鉴别诊断

目的对一株小鼠奇异变形杆菌进行了鉴定,为实验动物细菌检测、鉴别诊断提供参考依据。方法通过培养特性、菌落形态、染色和系列生化试验等检查,对疑似沙门氏菌的小鼠分离菌株进行初步鉴定,并采用血清凝集试验对小鼠分离菌株作进一步鉴定。结果通过表型生物学特性鉴定,并结合血清学诊断鉴别方法,确证该小鼠分离菌株为奇异变形杆菌。结论尽管检出的奇异变形杆菌不是SPF动物所必须排除的病原菌,但仍需指出:该菌为条件致病菌,对实验动物和研究人员均有潜在的危害,对科学实验也可能造成不利影响,故应引起高度重视。     

玫瑰花中两种抗氧化成分的分离鉴定与活性测定

通过体外抗氧化活性检测寻找玫瑰花（rosarugosa）中的抗氧化活性成分．方法采用大孔树脂，硅胶柱层析分离技术对玫瑰花抗氧化活性部位进行分离纯化；并通过理化数据及色谱分析，鉴定化合物的结构．结果分离鉴定出2种抗氧化活性成分Ⅰ，Ⅱ．分别是3，5，7，3′5′-五羟基黄酮（槲皮素）和3，4，5-三羟基苯甲酸（没食子酸）．化合物Ⅰ（槲皮素）为首次从玫瑰花中分离得到．化合物Ⅰ和化合物Ⅱ的抑制小鼠红细胞溶血活性和抗小鼠组织匀浆脂质过氧化活性均高于玫瑰花粗品，     

昆明鼠胚胎干细胞的分离培养与鉴定

目的：从昆明系小鼠的早期胚胎分离和培养胚胎干细胞(ES细胞)．方法：收集小鼠3．5d胚龄的囊胚，将其培养在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上，5—6d后取隆起生长的内细胞团块分离后再培养，观察集落的生长情况并通过碱性磷酸酶染色、原位杂交、细胞核型分析等对细胞集落进行鉴定．结果：KS细胞集落性生长，符合小鼠胚胎干细胞的一系列特性．结论：昆明系小鼠囊胚在胚胎成纤维细胞饲养层上可以发育成ES细胞，并能进行传代培养．     

鹿茸水提取物及其蛋白酶解物对小鼠 脾淋巴细胞增殖的影响

研究了鹿茸水提取物中非蛋白成分、粗蛋白酶解物及分离组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响.非蛋白成分和酶解物的分离分别采用HPLC法和超滤法.应用WST-8法检测各分离组分对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,采用高分辨质谱对非蛋白成分进行初步鉴定.结果显示,非蛋白成分对未经刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾细胞增殖的促进作用优于其分离组分,Fr.Ⅲ和Ⅳ对ConA诱导的脾淋巴细胞增殖有抑制作用,初步鉴定其为碱基和核苷酸的混合物.分子量大于10 kDa的肽段,单独可刺激小鼠脾细胞增殖,且对ConA诱导的T淋巴细胞增殖有抑制作用.肽段分子量大小对其免疫调节活性影响较大,但并未呈现直接的相关性.肽的氨基酸组成、序列及构型等也是影响其活性的重要因素.     

猪链球菌分离株的病原学特性

从病死猪体内分离到3株链球菌,并进行了病原学鉴定。细菌在形态上呈链球菌的特征,β或α溶血,分离株的生化试验结果相似,且都不与A~G链球菌群特异性血清发生凝集。经PCR鉴定,结果表明,3株均为猪链球菌2型。动物试验结果表明,3分离株对小鼠的毒力较低,但能在接种细菌12~15 d后使小鼠发病致死。     

SPF小鼠上呼吸道常见细菌的分离鉴定及携带率分析

目的 对SPF小鼠上呼吸道分离到的细菌进行鉴定及携带状况分析.方法 按常规检测流程进行细菌分离培养、染色、镜检、生化反应、Vitek 2 compact全自动细菌鉴定.结果 SPF小鼠上呼吸道常见细菌有8种,按细菌携带率分四类,第一类:毗邻颗粒链菌,携带率98.6％;第二类:松鼠葡萄球菌和木糖葡萄球菌,携带率45％ ～...     

补体C3基因敲除小鼠的繁育及子代基因型鉴定

目的 探讨繁殖和鉴定补体c3基因敲除小鼠的实验方法。方法将所引进的补体c3基因敲除杂合子小鼠（c3＋／-）进行饲养并繁殖,其子代出现三种基因型的小鼠,即纯合子c3-／-、杂合子c3＋／-、野生型c3＋／＋,采用ELISA与PCR相结合对子代小鼠基因型进行鉴定。结果繁育出135只子代小鼠,经鉴定,（=3＋／＋、c3＋／-、C3-／-各为38只、68只、29只,经爿。检验,子代小鼠分离比例符合孟德尔遗传规律。结论正确的饲养繁殖以及子代鉴定是从杂合子小鼠中获得补体c3基因敲除小鼠的有效途径。     

海立啮齿杆菌OmpA的原核表达及免疫效果

目的 探讨海立啮齿杆菌(Rh)外膜蛋白A(OmpA)原核表达蛋白对小鼠的免疫效果。方法 采用原核表达、镍离子亲和层析纯化,制备Rh OmpA重组蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。获得的OmpA目的蛋白经腹腔、肌肉联合注射和滴鼻两种方案免疫ICR小鼠,由ELISA方法测定其抗体滴度。再分别将Rh ATCC12555、嗜肺啮齿杆菌(Rp)ATCC35149和Rh分离株PP320对免疫小鼠腹腔接种攻毒,评价重组蛋白OmpA对小鼠的保护效果。结果 以表达蛋白OmpA为包被抗原的ELISA方法检测免疫小鼠血清中OmpA特异性抗体水平,平均抗体滴度为19.84log₂。免疫小鼠对两标准菌株和PP320的保护率分别为60%、60%和80%,与未免疫小鼠相比死亡率显著降低(P<0.001)。基于OmpA表达蛋白建立的ELISA方法检测嗜肺巴斯德杆菌(Pp)阳性小鼠血清,抗体阳性率为60%。结论 制备的Rh OmpA表达蛋白有良好的免疫原性,对Rh和Rp具有一定的保护效果,为实验动物中呼吸道病原菌的防控提供参考。     

鸡沙门氏菌与大肠杆菌混合感染症的病原分离鉴定

对某鸡场送检的60日龄患呼吸道病的病鸡进行病理剖检及细菌分离鉴定。采用微生物学方法鉴定出沙门氏菌和大肠杆菌,确定该病是由两种细菌感染引起的。药敏试验指导用药,投以呋喃妥因、氧氟沙星治愈。药物治疗效果与药敏试验结果一致。     

西昌某奶牛场乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

目的 为了确定导致西昌市某奶牛场引起乳房炎的病原。方法 无菌采集患病奶牛乳样2份进行细菌分离培养、形态学观察、生化鉴定、溶血酵素基因（khe基因）和16S rRNA基因鉴定、小鼠致病性试验以及药敏试验。结果 （1）分离到1株菌，该菌为革兰氏阴性的粗短杆菌，形态学观察与生化特性均与肺炎克雷伯菌相符合；（2）khe和16S rRNA基因序列与GenBank中肺炎克雷伯菌的同源性分别为99.6%~99.8%和99.7%~100%，因此，将分离菌确定为肺炎克雷伯菌，并将其命名为XC1分离菌株；（3）小鼠致病性试验结果显示，4只接种小鼠均在接种第3天全部死亡，表明XC1分离菌株具有较强的毒力；（4）药敏试验结果显示，XC1分离菌株对恩诺沙星、诺氟沙星、头孢比肟和头孢他啶高度敏感，对妥布霉素、庆大霉素和新霉素中度敏感，对红霉素、氨苄西林和阿莫西林耐药。结论 该奶牛场发生的乳房炎与肺炎克雷伯菌感染有关，且XC1分离菌株对临床常用的抗生素存在不同程度的耐药性。     

普通棉耳狨猴中乙型流感病毒的分离和鉴定

乙型流感病毒是引起人类局部流行性感冒的重要病原体，其起源和自然储存宿主目前仍不清楚。1999年夏季在某动物中心饲养的普通棉耳绒猴（Callithrix jacchus）群体中爆发了以呼吸道症状为主的急性传染病，死亡比率高达1／3。通过对死亡狨猴肺组织匀浆接种鸡胚和MDCK细胞的分离培养，分离出病毒。双份血清的红细胞凝集抑制试验证实，此分离株为此次狨猴群体感染流行的病原体。通过甲型和乙型流感病毒标准血清鉴定，证实该分离株为乙型流感病毒，命名为B/marmoset/China/1/99。     

从病兔分离的支气管败血波氏杆菌的特性

从病兔分离的支气管败血波氏杆菌的特性田克恭，隋丽华，遇秀玲，吴娜，刘永梅军事医学科学院实验动物中心（北京１０００７１）１９９５年春季，实验兔场发生以呼吸道症状为主的疾病，经细菌学鉴定证实为支气管败血波氏杆菌感染。现将该菌的致病特点和培养特性叙述如下。...     

小鼠肺炎病毒(PVM)

<正> A.历史背景Horsfall 和 Hahn(1939,1940)在一项研究中用呼吸道感染病人的鼻咽冲洗物连续通过小鼠,试图分离出某种人类病毒,他们发现被接种的和未被接种的小鼠其肺脏常常都有实变发生。后来,他们自正常小鼠肺分离出一种嗜肺病毒(小鼠肺炎病毒,PVM),不经连续传代这种病毒是没有毒力的,同时证明小鼠群中普遍存在着这种病毒的隐性感染。与上述情     

土千年健化学成分及生物活性研究

研究云南民间习用药材土千年健主要化学成分及其生物活性.采用各种色谱技术进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱学方法鉴定化合物;采用醋酸致小鼠扭体性疼痛试验考察化合物的镇痛活性.从土千年健60%乙醇提取物中分离得到2个化合物,分别鉴定为cinnamtannin B1(1)和2-ethylene-3,5,6-trimethyl-4-phenol-1-O--D-xylopyranosyl-(16)--D-glucopyranoside(2);与溶媒对照组相比,化合物1能明显抑制醋酸所致小鼠扭体性疼痛,差异具有统计学意义.化合物2为首次从越桔属中分离得到,化合物1为首次从该植物中分离得到;首次研究报道了化合物1和2的镇痛活性.     

猫儿尿植物的化学成分及其药效学研究

首次从木通科猫儿尿（ＤｅｃａｉｓｕｅａｆａｒｇｅｓｉｉＦｒａｎｃｈ）中分离鉴定了１１种皂甙化合物，经光谱分析及化学方法鉴定，其中５种化合物为新化合物，分别命名为：ＤｅｃａｉｓｏｓｉｄｅＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｇ；另５种化合物为ＳａｐｏｎｉｎＰＧ，ＤｉｐｓａｃｏｓｉｄｅＢ，Ｋａｌｏｐａｎａｘ－ｓａｐｏｎｉｎＢ，Ｓａｐｏｎｉｎ１１，ＨｅｄｅｒａｓａｐｏｎｉｎＢ和ｓａｐｏｎｉｎＰＪ３，猫儿尿对小鼠移植性肿瘤Ｓ１     

薄荷醇对TRPM8小鼠呼吸道上皮短路电流的影响

目的：研究薄荷醇(Menthol)对小鼠呼吸道上皮短路电流的影响。方法：运用短路电流(Isc)技术观察薄荷醇对TRPM8+/+和TRPM8-/-小鼠呼吸道上皮离子转运的改变。结果：薄荷醇浓度依赖性地降低TRPM8+/+小鼠气道上皮Isc,而TRPM8-/-小鼠无此反应。     

清肺精清热解毒和生津润燥作用的研究

通过对清肺精清热解毒、抑菌、生津润燥作用的实验研究，发现清肺精对大小鼠炎症早期的渗出、肿胀有明显的抑制作用，促进小鼠酚红排泌量，并对呼吸道感染致病菌抑制作用尤为显著．     

实验小鼠念珠状链球杆菌和鼠痘病毒混合感染的诊断

经细菌分离,生化鉴定,血清学,动物组织,病理学检查,发现一起由念珠状链球杆菌和鼠痘病毒混合感染而导致的实验小鼠发病死亡     

金水六君煎对慢性支气管炎模型小鼠呼吸道纤毛病理损伤的影响

目的：观察金水六君煎对慢性支气管炎小鼠呼吸道纤毛的保护作用。方法：将小鼠随机分为对照组、模型组、金水六君煎治疗组,采用改良烟熏法复制慢性支气管炎小鼠模型,以金水六君煎口服液进行干预,连续用药4周后取气管和肺叶组织分别在扫描电镜和透射电镜下观察。结果：模型组小鼠呼吸道纤毛出现明显脱落、减少、倒伏、粘连、变短、肿胀、超微结构异常增多等病理现象,纤毛细胞出现变性、坏死、脱落等病理改变;而金水六君煎治疗组小鼠呼吸道纤毛上述病理改变均较模型组明显减轻。结论：金水六君煎能明显改善慢性支气管炎小鼠呼吸道纤毛的病理损伤程度,促进呼吸道受损纤毛的结构修复。