固定化啤酒酵母细胞生物合成三磷酸腺苷(ATP)的研究

用明胶包埋、戊二醛交联的方法制备固定化啤酒酵母细胞,方法简便、成本低廉、菌体包埋量大、机械性能好。初步考查用8％明胶溶液10毫升包埋15克湿菌体,1％戊二醛浸泡12分钟所制备的固定化细胞,在PH7.5、35℃、1mg/ml镁离子,6mg/mlAMP、1％葡萄糖、0.2M磷酸盐条件下,AMP转化为ATP的转化率最高。     

具有蔗糖转化酶活力的酵母细胞的固定化

用明胶包埋、戊二醛交联制备的固定化酵母细胞,菌体包埋量大,活力回收高,机械性能好。酵母细胞固定化后,表观米氏常数有明显增大,热稳定性有所提高。固定化细胞装柱后用于蔗糖的转化,连续使用15天,酶活力保持不变。     

明胶—戊二醛固定化双酶体系的研究

采用明胶包埋、戊二醛交联相结合的方法制备固定化葡萄糖淀粉酶—葡萄糖异构酶双酶体系.该酶制备的最适条件是温度50℃pH值6.5.该酶反应的最适温度为50℃,最适pH为5.4,最适底物浓度为15％,热稳定性在50℃以下.     

高磁性壳聚糖微粒的制备与应用

采用壳聚糖包埋磁粉，经戊二醛修饰、环氧氯丙烷交联制得高磁性壳聚糖微料。此微粒共价结合卵清粘蛋白得到磁性亲和吸附剂，可应用于胰蛋白酶的亲和纯化。     

固定化茁芽丝孢酵母菌122降解苯酚的特性

用海藻胶和明胶混合包埋茁芽丝孢酵母菌122细胞制成凝胶珠,再用戊二醛交联,制得固定化细胞,试验比较了固定化细胞与游离细胞降解苯酚的最适pH、最适温度、pH和热稳定性、对CN~-、S~(2-)和金属离子的耐受性以及细胞的稳定性等,测定了细胞的K_m和V_m值,探讨了固定化细胞流化床反应器连续处理苯酚的特性。     

蔗糖异构酶PalI包埋和交联固定化方法比较

采用海藻酸钠包埋法和戊二醛交联法两种固定化方法,对来源于Klebsiella sp. LX3的蔗糖异构酶PalI的稳定性和可重复利用性进行研究。结果发现,海藻酸钠包埋法在海藻酸钠、CaCl2 质量分数为1.5%、2%时,所得固定化酶的酶活最高,其最适反应温度为40℃,最适pH值为6;戊二醛交联法在(NH₄)₂SO₄质量分数为90%,戊二醛体积分数为2.5%时得到的固定酶酶活最高,交联酶的最适反应温度为50℃,最适pH值为5。通过对酶的稳定性比较,两种方法酶稳定性都优于游离酶。4℃保存20d后游离酶的酶活降低到30%,而戊二醛交联酶活性在95%以上,海藻酸钠固定化酶残余酶活仍在60%左右。戊二醛交联法固定酶活性优于海藻酸钠固定化酶,重复利用12次戊二醛交联酶,其残余酶活仍为80%。     

四氧化三铁吸附包埋固定辣根过氧化物酶及其应用

建立了Fe₃O₄吸附包埋固定辣根过氧化物酶,并与明胶、开孔明胶、海藻酸钠3种不同的固定化方法载体进行了比较,发现该固定化方法具有较高的固定效率。对固定化酶与自由酶的稳定性进行了比较,发现Fe₃O₄吸附包埋固定化HRP的稳定性高于其他固定化HRP和自由酶。此外,测定了不同戊二醛浓度、交联时间、给酶量、Fe₃O₄使用量及明胶浓度对 辣根过氧化物酶固定效果的影响。结果表明,固定化反应的最佳条件如下：最佳给酶量与Fe₃O₄用量比例约为95u HRP/g Fe₃O₄,最佳Fe₃O₄用量与凝胶比例为1.0g Fe₃O₄/10mL 10％～20％,最适戊二醛浓度和交联时间分别为0.5％和30min。在此条件下制备的辣根过氧化物酶 活性约为1.1u/g,酶活固定率约为15％。该固定化酶重复应用于PCP催化去除反应,可获得稳定的PCP去除率。     

磁性海青菜生物吸附剂的制备及性质表征

以海青菜和纳米Fe3O4作为原材料,采用戊二醛交联法和海藻酸钙包埋法制备了磁性海青菜生物吸附剂,优化了制备条件,并利用FESEM、XRD、FTIR和自动电位滴定仪对磁性生物吸附剂的结构和性能进行表征.结果表明:戊二醛交联法和海藻酸钙包埋法均能成功实现海青菜与Fe3O4的复合,且所得磁性生物吸附剂都能在外加磁场作用下实现简单分离;最优制备条件下所得的交联磁性海青菜生物吸附剂和包埋磁性海青菜生物吸附剂对结晶紫的吸附容量分别为350.8和679.3 mg·g-1;磁性海青菜生物吸附剂表面的主要官能团有羧基、磷酸基、氨基和羟基.     

细胞组装体体外培养中的结构稳定性

细胞组装体结构稳定性是体外培养的必要前提,凝胶溶胀和网状交联结构的破坏是影响稳定性的主要因素。结合戊二醛与壳聚糖明胶基共混材料的化学反应机理及交联剂扩散原理,采用质量分数为0.8%~1%的戊二醛溶液,交联15~60s,可实现明胶基质材料的细胞组装体体外培养稳定性。实验结果表明:用低质量分数戊二醛作为交联剂在细胞组装结构体外形成40~50μm保护层,保护层对细胞不呈毒性且具有降解性;同时能够保持结构体在较长培养时间内的宏观稳定性,适宜作为稳定性工艺试剂。     

海藻酸钠-壳聚糖固定化漆酶的研究

采用海藻酸钠包埋法和海藻酸钠-壳聚糖包埋-交联法固定化漆酶,探讨了固定化条件、固定化漆酶及游离酶的酶学性质,结果表明：包埋法和包埋-交联法固定化漆酶的最佳条件分别为海藻酸钠浓度3％、CaCl2浓度1．5％和海藻酸钠浓度2％、CaCl2浓度2％、壳聚糖浓度1．5％、戊二醛浓度1％．两种固定化漆酶的最适pH和最适温度相同,分别为5．0和30℃,游离酶pH为4．6,温度20℃．包埋法固定化漆酶、包埋一交联法固定化漆酶和游离酶的米氏常数分别为3．3,2．8,1．22mmol／L．