花生种子贮藏蛋白发育和萌发过程中17.5＊1 …

目的：分析花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和伴花生球蛋白Ⅱ及其组成多肽的氨基酸组成,筛选高甲硫氨酸多肽并研究其在花生种子发育和萌发过程中的合成降解规律。方法：花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和Ⅱ经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００纯化后,再以制备电泳和电泳洗脱得到高纯度的５种多肽;酸水解法测定了花生球蛋白、伴花生球蛋白Ⅰ和Ⅱ以及５种多肽的氨基酸组成;ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析了种子发育和萌发过程中１７．５＊１０＾３多     

螺旋藻藻蓝蛋白提取及稳定性试验

藻蓝蛋白可用于配制化妆品及各种天然食品或荧光探针标记．本研究用氯化钾溶菌酶法或冻融法破碎螺旋藻细胞壁,盐析,提取藻蓝蛋白,并对其理化特性进行了测定．表明酶法破壁适应于大量藻蓝蛋白制备,冻融法只适应于小量制备．提取率为１３％左右,提取藻蓝蛋白在４０℃以下及ｐＨ４．０～８．５之间表现稳定,４５℃以上有变色现象,荧光性减弱,糖溶液可提高藻蓝蛋白对热的稳定性,光照对藻蓝蛋白影响较小     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究──1出发菌株的筛选及产酶条件的研究

从土壤中筛选到一株嗜碱性地衣芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）５３－Ａ６．，该菌株能在ｐＨ１０以上６０℃的环境中良好生长，４５℃ｐＨ９～１２的条件下均可产生活力较高的碱性蛋白酶。酶反应的最适条件：６０℃，ｐＨ１０～１１，在ｐＨ８．５～１１之间较稳定。６０℃保温１ｈ剩余酶活在２０％以上。     

电镀液和电镀层中铜和锰的联合测定

当ｐＨ＝１０时,铜和锰都能与ＰＡＲ生成稳定的红色络合物;当ｐＨ＝７时,锰与ＰＡＲ几乎不络合,而铜与ＰＡＲ则可以稳定络合．利用这种差异,可以在ｐＨ＝１０的介质中测定铜和锰的合量,而在ｐＨ＝７的介质中测定铜的量,再由两者之差求得锰的含量．试验表明,ｐＨ＝１０．０时,εＣｕ－ＰＡＲ４９８．５＝４．６６×１０４Ｌ／ｍｏｌ·ｃｍ;εＭｎ－ＰＡＲ４９８．５＝８．００×１０４Ｌ／ｍｏｌ·ｃｍ;ｐＨ＝７．０时,εＣｕ－ＰＡＲ４９８．５＝４．２６×１０４Ｌ／ｍｏｌ·ｃｍ．相对标准偏差小于３％,回收率为９５％～１０１％．其方法适用于电镀液和电镀层中Ｃｕ和Ｍｎ的测定     

铜离子浮选的动力学

发现铜离子的浮选符合零级反应动力学，并求出其速度常数ｋ０。当ｐＨ一定时，ｋ０与流量Ｑａ成正比，即ｋ０＝ｍＱａ。在ｐＨ＝２～５的范围内，符合ｍ＝１．３７０×１０＾－５ｌｎ（ｐＨ／１．２２２）的关系。ｐＨ＝５时ｍ最大，ｐＨ＞５则下降，从而得出了ｋ０＝１．３７０×１０＾－５Ｑａｌｎ（ｐＨ／１．２２２）。从单泡吸附模型出发，从理论上提出了浮选效率（ηｆ）关系式，可用以评价表面活性剂的浮选效果及工艺条件如流     

Fe4S4簇合物中μ3—S的酸不稳定性研究

在室温下，用ＵＶ－２１００型紫外可见分光光度计考察各种ｐＨ值的缓冲液对Ｆｅ４Ｓ４簇合物中μ３－Ｓ的破坏程度，藉此考察ＦｅＭｏ－ｃｏ中μ３－Ｓ的酸不稳定性，结果表明Ｆｅ４Ｓ４簇合物中的μ３－Ｓ在ｐＨ２～３时最不稳定，极易受酸破坏：ｐＨ３～４时，Ｆｅ４Ｓ４簇中的μ３－Ｓ受酸影响较ｐＨ２～３时小；ｐＨ４～５时。Ｆｅ４Ｓ４簇基本稳定，其中μ３－Ｓ基本不受破坏，结合蛋白环境对金属中心有巨大保护作用，在生物提     

胶体金探针的制备

研究了直径１５ｎｍ胶体金的制备方法，制得金标记ＳＰＡ，并对其活性进行了研究，所制得的胶体金探针稳定，可靠，有较好的生物活性。     

人染色体17q12区带330kb范围内表达顺序的筛选

用定位于人染色体１７ｑ１２区带的长约３３０ｋｂＹＡＣ克隆５００Ｄ０９（取自法国人类多态性研究中心ＹＡＣ库）作为杂交探针，筛选人骨髓，胎脑，胎肾，骨骼肌和睾丸等五种组织的ｃＤＮＡ库（２×１０＾５～３×１０＾５ｐｆｕ／库），从中获得１０２个初级阳性克隆，初级克隆经ＰＣＲ扩增，分别与人基因组ＤＮＡ，酵母基因组ＤＮＡ和人ｒＤＮＡ探针作ｄｏｔｂｌｏｔ杂交分析，排除共中假阳性克隆后，复筛得到３２个候选克隆，对     

用气敏电极法测定焦化厂废水中氨

研究了用气敏电极测定焦化厂废水中氨的分析方法，对测定的线性范围、响应时间、回收率、干扰物质等作了理论探讨和大量试验。在ｐＨ为１１．５～１４．０时，线性范围为１．００×１０－５ｍｏｌ／Ｌ～１．００×１０－１ｍｏｌ／Ｌ，最低检出限为５．０×１０－６ｍｏｌ／Ｌ，ＲＳＤ不大于２．５％。     

依诺沙星的电化学研究

依诺沙星在Ｂｒｉｔｔｏｎ－Ｒｏｂｉｎｓｏｎ缓冲液（ｐＨ２．０～１１．０）中产生两个极谱还原峰。两峰强烈地受溶液ｐＨ值的影响，峰Ⅰ（－１．ＩＶ～－１．５Ｖｖｓ．ＳＣＥ）对应于吡啶环的双电子还原，峰Ⅱ（１．５伏～－１．７伏ｖｓ．ＳＣＥ）对应于羰基的还原。实验表明电极过程是受扩散控制的不可逆过程，并测定了ｎ，ａ和Ｄ０的值。当ＰＨ＝２．２时，峰Ⅰ的峰电流与依诺沙星的浓度在４．０×１０－８～６．０×１０－６ｍｏｌ／Ｌ之间有线性关系，检测限为２．５×１０－８ｍｏｌ／Ｌ，可用于依诺沙星的检测。     

小檗碱和溴化乙锭与DNA的光谱学作用研究

利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、琼脂糖凝胶电泳方法研究了小檗碱(berberine)和溴化乙锭(EB)与ct-DNA的光谱学作用.在ct-DNA存在时,berberine和EB的荧光强度都有较大的提高,pH的改变对二者荧光光谱的发射峰位与强度影响不大;紫外-可见吸收光谱随ct-DNA浓度的增加,表现出减色效应;二者都使ct-DNA的圆二色谱正负峰的吸收强度有所增加;琼脂糖凝胶电泳实验表明,EB-DNA体系的发光强度高于berberine-DNA体系.在DNA的定量测定中,可用无毒、副作用的小檗碱代替有致癌性的溴化乙锭,为安全、无环境污染、定量测定DNA提供了新试剂使用基础.     

应用光敏生物素探针检测杂交瘤及细胞中的小鼠白血病病毒

采用ＢａｍＨＩ酶切和琼脂糖凝胶电泳技术，从重组质粒ＰｓＦｌｌ中回收５ｋｂ小鼠白血病病毒（ＭｕＬＶ）ＤＮＡ片段，经光敏生物素标记后制备ＤＮＡ探针，以斑点杂交法检测杂交瘤细胞、ＭｃＡｂ纯品以及ＳＰ２／０细胞中的ＭｕＬｖ。结果表明：此探针灵敏度可达２５ｐｇ，特异性好，在被检测的１３株杂交瘤细胞和２株ＳＰ２／０细胞中分别查出５株和１株为ＭｕＬｖ阳性，ＭｃＡｂ纯品中未发现ＭｕＬｖ。     

EVn-50抑制人宫颈癌Hela细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的探讨EVn-50对体外培养的人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞,台盼蓝拒染法检测EVn-50对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响;平皿克隆形成法、软琼脂克隆形成法测定EV-n50对人宫颈癌Hela细胞锚定依赖性生长和锚定非依赖性生长作用的影响;AO／EB染色荧光显微镜观察EVn-50诱导Hela细胞凋亡的形态学改变;DNA凝胶电泳确证EVn-50诱导Hela细胞凋亡作用。结果EVn-50对体外培养人宫颈癌Hela细胞的增殖具有显著抑制作用,呈浓度依赖性。EVn-50可诱导Hela细胞凋亡,AO／EB染色可见典型凋亡小体;DNA凝胶电泳在EVn-50浓度100μg／mL作用48h出现典型“梯形”DNA条带。结论EVn-50具有抑制人宫颈癌Hela细胞增殖并诱导细胞凋亡作用。     

葡萄DNA提取与纯化方法的比较研究

以巨峰葡萄叶片为试材,在ＣＴＡＢ法,ＳＤＳ法及高盐低ｐＨ法基础上加以改进,应用５种方法对葡萄ＤＮＡ提取,纯化方法进行了比较研究。结果表明,高盐低ｐＨ法和区室化提取法是２种适合于葡萄属植物ＤＮＡ提取的方法。     

Dynamic changes of apoptosis in duck embryo fibroblasts induced by new type Gosling viral enteritis virus

The monolayer duck embryo fibroblast (DEF) cells were experimentally infected with new type Gosling viral enteritis virus (NGVEV) and the dynamic changes of apoptosis were detected at different time points after NGVEV infection by using transmission electron microscopy (TEM), DNA agarose gel electrophoresis and Annexin V-FITC/PI stained fluorescence-activated cell sorter (FACS).The result shows that NGVEV can induce infected cells undergo apoptosis and change regularly. A series of characteristic apoptotic morphological changes including shrink of the cells, chromatin condensation and margination, as well as formation of apoptotic bodies were observed by TEM. The typical ladder pattern of DNA fragmentation was demonstrated by agarose gel electrophoresis. And using flow cytometry analysis of Annexin V-FITC/PI staining, the dead, viable, apoptotic and necrotic cells could be analysis quantitatively.     

青檀基因组DNA提取方法的优化

以青檀(Pteroceltis tatarinowii Maxim.)的叶片为材料,采用改良高盐低pH值法、改良SDS法、改良CTAB法和试剂盒法4种不同方法提取其基因组DNA,并进行电泳分析、质量检测及ISSR引物扩增检测.结果表明,改良CTAB法优于其它方法,提取的DNA质量较好,纯度较高,能满足进一步的实验要求.     

Dynamic changes of apoptosis in duck embryo fibroblasts induced by new type Gosling viral enteritis virus

The monolayer duck embryo fibroblast （DEF） cells were experimentally infected with new type Gosling viral enteritis virus （NGVEV） and the dynamic changes of apoptosis were detected at different time points after NGVEV infection by transmission electron microscopy （TEM）, DNA agarose gel electrophoresis and Annexin V-FITC/PI stained fluorescence-activated cell sorter （FACS）. The result shows that NGVEV can induce infected cells undergoing apoptosis and changing regularly. A series of characteristic apoptotic morphological changes including shrinkage of the cells, chromatin condensation and margination, as well as formation of apoptotic bodies, were observed by TEM. The typical ladder pattern of DNA fragmentation was demonstrated by agarose gel electrophoresis. And using flow cytometry analysis of Annexin V-FITC/PI staining, the dead, viable, apoptotic and necrotic cells could be analyzed quantitatively.     

兔血清诱导Shope肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：前期实验结果已证明兔血清对Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞具有伤作用。本实验拟从细胞凋亡角度探讨兔血清杀伤该细胞的机理。方法：通过电子显微镜、激光共聚焦显微镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测等方法,观察了兔血清诱导细胞凋亡的可能性。结果：经１０％兔血清处理３ｈ的中等分化程度的Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞（ＳＣＢ－６ａ）在电镜、激光共聚焦显微镜下均可见典型的细胞凋亡的形态学特征;１．５％琼脂糖凝胶电泳呈现明显的“阶梯状”图谱（ＤＮＡ ｌｅｄｄｅｒ）;ＰＩ染色后经流式细胞仪检测显示大量亚二倍体细胞（凋亡细胞）。结论：兔血清诱导Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞凋亡可能是其伤细胞的作用机理之一。     

稀有植物蒜头果基因组DNA提取方法的研究

 分别用改进的CTAB法、SDS法和高盐低pH法从蒜头果种仁中提取基因组DNA,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法检测所提取基因组DNA的纯度.结果表明:用改进的CTAB法、SDS法和高盐低pH法所提取的蒜头果基因组DNA的OD₂₆₀/OD₂₈₀值在1.8~2.0之间,带型清晰无拖尾,说明所提取的DNA保持完好.其中改进的CTAB法所提取的基因组DNA质量最好、纯度也最高,为蒜头果分子生物学研究及下游操作奠定了基础.     

应用地高辛标记的PCR-ELISA技术快速检测转基因水稻

应用地高辛标记的PcR—ELISA(Dig-PcR—ELISA)技术进行转基因水稻检测研究。针对转基因水稻中普遍存在的花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子(p35S)、胭脂碱合成酶(NOS)终止子(Thos)，筛选标记潮霉素磷酸转移酶基因(hpt,hph)、β—葡萄糖苷酸酶基因(gus)、抗草丁膦除草剂基因(bar)，建立Dig—PcR—ELISA检测方法；能进行半定量检测，敏感性试验表明，Dig—ELISA检测比常规电泳检测可提高敏感性达1000倍，可检测含量达0．1％的GM0样品。全过程可在24h内完成。