雄激素受体与P21活化激酶6在前列腺癌组织中的表达及意义

应用免疫组织化学SP法检测PCa组织及前列腺增生(BPH)组织中AR、PAK6的表达,探讨了雄激素受体(AR)、P21活化激酶6(PAK6)与前列腺癌(PCa)发生的关系。结果表明:AR、PAK6在BPH和PCa组织中均有阳性表达,BPH和PCa前列腺组织中AR阳性表达率无显著性差异(P0.05),而BPH和PCa前列腺组织中PAK6阳性表达率有显著性差异(P0.05)。70例高、中、低分化前列腺癌中AR、PAK6表达阳性率逐渐升高,PCa组织中AR与PAK6二者表达呈现明显的正相关性。这说明,PAK6和AR阳性表达程度与PCa分级有关,提示二者在PCa的发病中可能扮演重要角色,检测PAK6和AR的变化对判断PCa的生物学行为有参考价值。     

E6相关蛋白对前列腺癌细胞增殖与侵袭的作用

目的建立稳定表达E6-AP的前列腺癌细胞系,通过对E6-AP表达调控的研究,探讨E6相关蛋白对前列腺癌细胞增殖与侵袭作用.方法以人前列腺癌细胞株(LNCa P)为基础,将调控质粒pRev Tet-offin和E6-AP表达质粒p GEM-E6-AP转染至LNCa P细胞,建立既能表达E6-AP蛋白又能受DOX调控的LNCa P/E6-AP细胞系.Western bloting检测LNCa P/E6-AP细胞E6-AP蛋白表达及其受DOX调控情况; MTT方法检测细胞增殖及受LY294002抑制情况;基质胶侵袭实验检测细胞浸润迁移能力.结果 LNCa P/E6-AP细胞E6-AP表达量明显高于LNCa P细胞,且可受DOX负向调控;实验组LNCa P/E6-AP细胞的增殖能力明显高于对照组LNCa P细胞,且两组细胞增殖能力均受PI3K抑制剂LY294002的抑制;实验组LNCa P/E6-AP细胞的侵袭能力明显高于对照组LNCa P细胞.结论 E6-AP可以促进前列腺癌细胞的增殖,并增加其侵袭能力; DOX可以调控E6-AP的表达;PI3K抑制剂LY294002可有效抑制前列腺癌细胞的增殖能力.     

DNA甲基化在肿瘤形成中的作用（综述）

DNA甲基化改变是肿瘤细胞中常见的现象,DNA甲基化与肿瘤的发生有密切关系。从以下几方面对此做一综述。（1）简介哺乳动物细胞的DNA甲基化;（2）DNA甲基化与肿瘤基因突变;（3）肿瘤DNA甲基化的基因外作用,其中包括：原癌基因的低甲基化和抑癌基因的高甲基化。     

雄激素受体类似物在拟黑多刺蚁脑部的表达和定位

采用免疫组织化学SABC染色方法,对雄激素受体类似物在拟黑多刺蚁的雄蚁与工蚁脑部的表达与分布进行了检测研究.检测结果显示,雄激素受体类似物在拟黑多刺蚁雄蚁与工蚁的蕈形体冠部、柄部、根部以及中央复合体均有分布,并推测该雄激素受体类似物可能对蚂蚁的学习记忆以及求偶进攻等行为有一定影响.     

肝癌基因治疗机制研究

肝癌是由多基因突变引起的,故用基因工程的手段进行肝癌的基因治疗是目前医学界研究的热点.主要研究了肝癌基因治疗中的免疫基因治疗、抑癌基因治疗、自杀基因治疗、反义基因治疗、耐药基因治疗、联合基因治疗的机制.     

人源雄激素受体DNA结合结构域的原核表达与其响应元件的复合物结晶

为获得高分辨率的雄激素受体与其响应元件的复合物晶体结构,为前列腺癌的治疗提供药物靶点设计的理论基础.本研究构建了AR-DBD的原核表达载体,在0.5 mmol/L IPTG,16℃条件下诱导24 h表达该蛋白.通过与AR响应元件寡核酸的结合优化蛋白纯化条件,使AR-DBD蛋白易于纯化.最终,蛋白核酸复合物晶体呈现出边缘清晰,短棒状的立体结构,本研究制备的蛋白核酸复合物晶体可直接用于X射线衍射分析.     

前列腺癌的基因治疗

基因治疗前列腺癌，虽然目前还不够成熟，但利用腺病毒或逆转录病毒把基因导入癌细胞，已正在研究中，有的已被临床试验证明了其可行性和优越性。本文主要概述了体内外细胞因子基因重组产生肿瘤疫苗和矫正基因治疗，同时也探讨了其他几种基因治疗前列腺癌的方法。     

新型雄激素受体调节剂研究论文被《自然中国》列为研究亮点]

上海药物研究所5月7日,《自然中国》将国家新药筛选中心王明伟课题组和四川大学华西药学院合作一篇研究论文列为“研究亮点”。这篇题为Discovery and biological characterization of a novel series of androgen receptor modulators”（Zhou,C.et al.,Bri.J.Pharmcol.,doi：10.1038/bjp.2008.107的论文称：一类新型雄激素受体调节剂或能更好地治疗前列腺癌。     

胰腺癌发病分子机制研究进展

胰腺癌因其发病率高、恶性程度高、预后差等特点受到了广泛的关注,其5年存活率较低,且目前缺少有效的放化疗手段,所以对于胰腺癌发病机制的研究显得尤为重要,而基因水平的改变在胰腺癌发病过程中的作用不容忽视。对胰腺癌发病机制的深入研究有助于对此病的诊断、治疗及预后发挥至关重要的作用。     

内分泌干扰物对雄激素受体功能的干扰

内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals,EDC)是指干扰内源激素的生物合成、代谢和功能,从而干扰动物内分泌系统的外源活性物质。本文特别介绍了做为EDC类物质之一的雄激素干扰物(Androgen disruptors,AD)的不同种类和生理效应。AD可与雄激素受体(Androgen receptor,AR)结合发挥AR激动剂或拮抗剂作用,其中做为激动剂的AD主要有1,2-二溴-4-环己烷(TBECH);做为拮抗剂的AD主要有氟他胺类、有机氯杀虫剂类、二苯甲烷类、双酚A、邻苯二甲酸酯、烷基酚类等。它们通过多种分子机制干扰AR的功能,进而对动物的生殖和发育等功能产生严重影响。本文认为在国内应加强对AD的深入研究,并重视AD对鱼类等非哺乳类动物的影响的研究;同时应注重从源头上阻止AD在环境中的扩散和二次污染,并大力发展生物植被降解技术、光催化技术、新型纳米材料吸附、人工生态系等生态修复技术,建立无毒、无内分泌干扰效应的AD高通量筛选技术,以消除AD对生态系统的不良影响。     

转基因小鼠与肿瘤研究

转基因小鼠的出现有力地推动了肿瘤研究的发展。具有癌症倾向的转基因小鼠,是从DNA水平开展有关人类恶性肿瘤发生、生长、转移和防治研究的良好活休模型。肿瘤形成与控制细胞生长和分化的多种基因特别是癌基因、抑癌基因的遗传改变有关。在利用转基因小鼠进行实验研究时,对由相同结构基因建立的不同转基因小鼠家系在癌基因表达上的时空差异性,应当给予足够的重视。此外,实现转基因动物生产的专业化、产业化,将会加速我国生命科学领域中转基因动物应用研究的进程。     

甲状腺肿瘤中突变型P~(16)蛋白和PCNA的表达及意义

应用免疫组化LSAB法对22例甲状腺癌及20例甲状腺腺瘤的突变型P~(16)蛋白表达研究,结果发现:P~(16)甲状腺癌和甲状腺腺瘤表达率分别为45%及10%,两者表达率有显著性差异(P0.05);甲状腺恶性肿瘤中乳头状癌及滤泡性腺癌P~(16)的表达率两者无显著性差异(P>0.05).提示突变型P~(16)表达及PCNA的检测对研究癌基因在甲状腺癌发生发展中及细胞异型增生中有重要作用.     

基于ChIP-seq筛选睾丸支持细胞中雄激素受体靶基因初步研究

雄激素及其受体在精子发生中有重要作用.寻找并鉴定更多雄激素及其受体的靶基因,对阐明雄激素及其受体介导精子发生的分子机制,解析其调控精子发生的网络具有非常重要的科学意义.在本研究中,我们分离了睾丸支持细胞,以睾酮刺激,并以ARKO小鼠睾丸作为背景对照,进行ChIP-seq和分析验证.数据分析显示了8679个差异表达基因,其中4830个基因在睾酮处理组表达上调,3849个表达下调.我们从差异基因中筛取了43个靶基因进行验证,其中39个基因的启动子区域找到了ARE结合位点.候选靶基因介导雄激素调控精子发生的分子机制仍有待进一步研究.本项目初步鉴定的靶基因可为进一步深入系统研究雄激素及其受体调控精子发生的机制提供参考.     

TURP结合抗雄激素干预治疗中晚期前列腺癌36例

目的:观察经尿道前列腺电切术(TURP)结合睾丸切除去势术及联合非甾体类抗雄激素治疗对前列腺癌伴尿道压迫梗阻患者的治疗作用.方法:中、晚期前列腺癌患者36例,经尿道前列腺电切术、睾丸切除去势术及联合氟他胺阻断雄激素治疗,主要观察手术前、后残余尿量(Ru)、最大尿流率(Qmax)、血清前列腺特异抗原(PSA)改变.结果:术后5 d拔除导尿管,排尿通畅.术后12个月,RU由术前的(130.0±15.2)mL降至(22.0±3.8)mL(P<0.01),Qmax由术前的(10.2±0.6)mL/s增至(21.2±2.2)mL/s(P<0.01).随访观察12～48月,血PSA降至2.8～18.6 ng/mL,平均10.7 ng/mL.术前发现6例骨转移经治疗后骨痛明显减轻,同位素骨扫描检查6例骨转移破坏均未见发展.结论:晚期前列腺癌压迫尿道致排尿困难时采用TURP可缓解膀胱出口梗阻症状,为抗雄激素治疗创造条件,睾丸切除联合口服氟他胺治疗可限制肿瘤的生长发展、巩固TURP的疗效.     

睾酮与雄激素受体在中国林蛙精巢中的免疫细胞化学定位

用免疫细胞化学方法检测了睾酮(T)和雄激素受体(AR)在中国林蛙生精周期中不同时期精巢内的表达定位.结果显示:在中国林蛙生精周期的Ⅰ～Ⅴ期,T和AR在精原细胞、精母细胞、精子细胞、精子、支持细胞和间质细胞内均有分布.在不同时期的精巢中,T和AR在生精细胞的定位具有一致性.在Ⅱ期,精子细胞内T阳性反应和AR阳性表达最强.在生精周期的Ⅰ～Ⅴ期,支持细胞内T的阳性反应强度无明显变化.在Ⅴ期,支持细胞内AR的阳性表达强度显著高于其他各期,而间质细胞内AR的阳性表达最弱.结果表明,T在中国林蛙精巢内细胞的分化和发育过程中的作用具有高度可变性,T调控中国林蛙精巢的功能和发育.     

抑癌基因p53与肿瘤发生及基因治疗的研究进展

概述了抑癌基因p53的结构和特性,以及p53的抑癌作用机理、基因治疗的研究进展.抑癌基因p53是人类细胞中非常重要的基因,野生型p53基因产物具有抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡的作用.在p53基因发生突变或缺失时,可引起多种肿瘤.当人工将野生型p53基因与载体结合成重组DNA分子导入肿瘤患者体内后,有可能达到治疗恶性肿瘤的目的.     

修正肿瘤相关基因的基因疗法之研究进展

肿瘤是目前威胁人类健康和生命的最严重的疾病之一,基因疗法目前被认为是人类攻克癌症非常有希望的途径.本文对肿瘤基因治疗中的1种方法,修正肿瘤相关基因的基因疗法进行一综述,其中包括转移抑癌基因的基因疗法和转移原癌基因或细胞增殖相关基因的反义基因的基因疗法,并提出对多种基因的联合治疗方法是肿瘤基因治疗发展的一个重要方向.     

去势耐受前列腺癌中雌雄激素对芳香化酶表达的影响及芳香化酶启动子成分的改变

去势耐受前列腺癌(Castrate-resistance prostate cancer, CRPC)的发生是进展性及转移前列腺癌治疗中的主要障碍,其中性激素在CRPC发生及进展过程中发挥着重要作用.在本实验中发现,调节雌雄激素转换的关键酶—芳香化酶转录参与的主要启动子在CRPC细胞系中发生改变:雄激素依赖前列腺癌细胞系LNCaP中芳香化酶转录的主要驱动启动子为I.4,而在CRPC细胞系LNCaP abl,PC-3和22RV1中转变为启动子PII.此外,雄激素能够上调芳香化酶在CRPC细胞系中的表达,而雌激素对芳香化酶的表达没有明显影响.上述结果提示CRPC中芳香化酶的异常表达可能影响前列腺癌进程.     

雌激素受体辅助抑制因子REA对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响

雌激素在前列腺癌转移中的作用已有报道,但其作用机制尚不清楚.研究了雌激素受体辅助抑制因子REA在前列腺上皮细胞和前列腺组织中的表达及其对前列腺癌细胞生物学功能的影响.发现在前列腺癌细胞和组织中随恶性程度增加REA的表达逐渐增强.划痕愈合实验证实了REA能够明显促进前列腺癌细胞的迁移,而且其促进作用与雌激素和ER存在着协同作用.这些研究结果为揭示雌激素效应及其受体亚型的表达水平在前列腺癌转移中作用机制的探讨奠定了实验基础.     

抑郁症发病的下丘脑中枢驱动调节机制

本课题组的研究发现,抑郁症病人下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)神经元上雌激素和雄激素受体表达增加,性激素与CRH神经元上的性激素受体结合,作用于CRH启动子上的性激素反应单元调节CRH的转录活性,雌激素可增加CRH的表达而雄激素可抑制CRH的活性.除性激素受体外,抑郁症病人下丘脑内调控CRH神经元活性的许多其他受体也表现为平衡紊乱.靶向于糖皮质激素和性激素受体的药物可能通过作用于海马不同区域的神经元,调控抑郁症动物的相关行为.根据上述发现,我们提出抑郁症发病的多受体平衡紊乱假说.