细胞固定化条件对紫草细胞生产紫草色素的影响

以海藻胶做包埋剂,研究了固化液构成、细胞包埋量和胞龄对紫草色素合成的影响.结果表明:固定化细胞合成紫草色素的合适固化液为含有0.1 mol/L CaCl2的紫草色素生产培养基,该固化条件比较温和,并可长久保持固定化细胞活性;最适宜的细胞包埋质量分数为10%～20%;用于细胞包埋的最佳细胞生长时间为17 d.对紫草细胞固定化培养生产紫草色素过程的动力学特征进行了分析,建立了基质消耗和色素合成的动力学模型,并用该模型对实验数据进行了回归分析,实验数据与理论值之间具有比较令人满意的一致性.     

氯化铜对滇紫草细胞色素形成的影响

滇紫草细胞于Ｍ－９培养液中悬浮培养以形成紫草色素。当Ｍ－９培养液中ＣｕＳＯ４·５Ｈ２０由相同浓度的ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ取代后，色素产量比对照提高了５８．７％，ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ的最适浓度为３０μｍｏｌ／Ｌ。滇紫草细胞的继代培养基Ｂ—５中的ＣｕＳＯ４·５Ｈ２Ｏ取代后，培养所得的细胞接种于Ｍ－９培养液中，色素产量比对照提高了３２．０８％，ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ的最适浓度为０．６μｍｏｌ／Ｌ．ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ对细胞生长无不良影响。Ｍ—９培养液中，铜于色素形成的初期，可快速吸附于细胞上，这一现象为ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ促进紫草色素合成机制的深入研究提供参考。     

滇紫草细胞发酵培养形成紫草色素

测定了滇紫草细胞发酵培养过程中细胞生长、色素形成、碳源、氮源、重要无机离子和ｐＨ值的动态变化，为设计适合于紫草细胞发酵培养的反应器和进行紫草细胞发酵培养提供了依据     

添加吸附树脂紫草细胞培养生产紫草色素

采用静态方法从多种大孔树脂中筛选出的Ｘ－５,ＡＢ－８两种树脂,它们对紫草色素具有较好的吸附能力,同时对糖吸附弱,多次高温灭菌后进行的吸附实验显示其吸附性能变化不大,摇瓶培养实验结果表明,树脂的最佳添加量为６．７％,色素的产量比常规培养分别增加了５．２和６倍,反应器与ＡＢ－８树脂柱相偶联进行同时分离色素的培养实验,结果使色素产量增加了５．３倍。     

油菜素内酯促进滇紫草细胞产生紫草色素初探

研究了油菜素内酯（ＢＲ）对培养的滇紫草细胞产生紫草色素的影响．结果表明,在滇紫草细胞悬浮培养体系中加入最适浓度的ＢＲ（１０－５μｇ／ｍＬ）可以显著促进紫草色素的形成（增长７３．４％）,并且在低浓度下ＢＲ可以轻微促进细胞生长,但ＢＲ并不能代替其它植物生长调节剂,如ＩＡＡ、ＮＡＡ和ＢＡＰ．实验中ＢＲ对植物次生代谢途径中的关键酶之一苯丙氨酸裂解酶（ＰＡＬ）的活性表现出显著的影响     

固定化细胞法生产醋酸影响因素的研究

以海藻酸钠为载体,还研究了固定化细胞的制备,对接种环数、种子培养时间进行了优化,还研究了不同乙醇初始浓度对醋酸产量、菌体个数、菌体生长周期、葡萄糖消耗量、乙醇消耗量的影响。获到如下结论：优化接种数为15环、培养时间为36～48h之间;葡萄糖浓度与OD值的换算公式：Y=4．723 7x;菌体个数与菌液OD值的相关性：y=402．88x;体积分数5％乙醇时发酵液醋酸转化率最高,最佳培养时间为96h;乙醇体积分数越高,菌体生长延迟期越长;乙醇的含量越高,则葡萄糖的消耗就越少;培养时间为72h时,乙醇消耗完毕,由于中间产物乙醛的存在,醋酸在72～96h时间段继续生成。     

双载体固定化细胞发酵红曲色素的研究

采用玉米芯为吸附载体,海藻酸钠为包埋剂对红曲霉细胞进行吸附包埋固定化培养。对以不同浓度的硝酸钾、大米粉、不同初始pH值等条件变化对细胞红曲霉菌进行发酵培养。通过正交优化实验表明:硝酸钾浓度为0 2%,米粉浓度为5%,培养基初始pH5 5时,通气量为75mL/500mL时产色素色价最高。包埋载体海藻酸钠的浓度为5%,固化剂氯化钙浓度为4%时,红曲霉的固定化粒子的机械强度较好。     

固定化细胞生产黑色素的研究

利用固定化产酷氨酸酶的假单胞菌以酪氨酸为底物生产黑色素。该黑色素的紫外扫描光谱图显示随波长的减小其吸收值增大，在２１０ｎｍ处有一吸收峰；红外光谱显示它在３μｍ和６μｍ处有吸收峰，从而证实它是一种黑色素。固定化细胞摇瓶半连续发酵产黑色素结果表明，最适温度为３７℃，最适ｐＨ为９．５。加入微量铜离子，供氧良好和较低的底物加入量有利于黑色素的生成。     

促进剂对木耳液体发酵生产的影响

【目的】有效地促进木耳菌体生长及胞外多糖的生产,确定可显著提高木耳液体发酵生产的促进剂及其添加量。【方法】在木耳液体发酵培养基中分别添加20种不同的促进剂,每种促进剂设置4个浓度,发酵6d后检测发酵液中的菌丝体、胞外多糖含量。然后对促进效果较好的Tween40、硬脂酸、棕榈酸、油酸进行正交试验。【结果】单因素试验结果表明,0.1%的棕榈酸、1%的硬脂酸、0.5%的Tween40、0.1%的油酸均可显著促进木耳胞外多糖的生产。正交试验结果表明,在发酵培养基中添加剂最佳组合为0.5%Tween40、1.5%硬脂酸、0.1%棕榈酸、0.25%油酸。【结论】硬脂酸、棕榈酸、油酸和Tween40可显著促进木耳胞外多糖的发酵生产。     

细胞色素C生产方法

细胞色素C是一种与生物呼吸机能有密切关系的红色蛋白质,溶于水,易溶于酸性溶液,对热、酸和碱都稳定。分离提纯后的细胞色素C,在临床上可用于抢救心、脑缺氧及一氧化碳中毒的病人;也可用于治疗心肌梗塞及心、脑、肝、肾等重要器官的某些疾病,此外还可供生化研究之用。由于它具有疗效好、无毒等优点,故发展较快。目前国内许多生化制药厂的收购价格一般在每公斤万元以上。细胞色素C广泛分布于动植物及酵母和     

植物细胞固定化条件对海南粗榧细胞生产三尖杉酯碱的影响

为了研究海南粗榧细胞的固定化条件及其对细胞的生长和三尖杉酯碱合成的影响,本研究利用海藻酸钠凝胶包埋法对海南粗榧悬浮细胞进行固定化,并改变了其固定化条件,同时测定了生物量、PAL酶活性、凝胶球硬度、蔗糖含量和三尖杉酯碱产量等指标,结果显示:海南粗榧固定化细胞的生长周期为40 d,其中,在0~15 d其细胞生长停滞,在15~30 d其细胞生长缓慢,而30~40 d为缓慢衰亡期;海南粗榧细胞固定化培养的最佳产物提取时间为第15 d;包埋过程中Ca Cl_2的最适质量浓度为0.023 g/m L;鲜重细胞的最适接种量为10%.由此得出结论:海南粗榧细胞固定化培养抑制了细胞的生长,延长了细胞的生长周期,但缩短了细胞生产三尖杉酯碱的周期.     

利用固定化酵母细胞生产ATP

利用明胶戊二醛制备的固定化啤酒酵母细胞,由腺苷酸(AMP)生产腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)。在含有15 mmol/L AMP,75 mmol/L葡萄糖,5mmol/L硫酸镁(MgSO_4·7 H_2O)的0.2 mol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)中,在34℃振荡反应1h,ATP转化率可达100%,分批连续反应10次,ATP转化率保持在90%以上。     

PVA固定化红曲霉发酵生产红曲色素的研究

进行了采用聚乙烯醇固定化红曲霉细胞和游离红曲霉细胞发酵发生红曲色素的比较研究。实验结果表明：采用聚乙烯醇为载体固定化细胞颗粒机械强度高,产色素高,尤其通过添加话性碳解除产物抑制作用后。     

固定化增殖细胞生产乳酸的研究

乳酸广泛应用于食品、医药、化工等领域,是一种应用广,用量大的重要的有机酸。过去用合成法生产,目前采用了发酵法,但两种方法都存在着效率低的问题。固定化增殖细胞是近几年发展起来的一种新型的细胞固定化技术,它对一个多酶系统的催化反应来讲,无疑     

米曲霉激发子刺激滇紫草细胞活性氧的产生及与紫草色素形成的关系

米曲霉激发子刺激滇紫草细胞１０ｍｉｎ内快速释放活性氧，同时胞内具活性氧清除作用中的超氧化物岐化酶，过氧化物酶和过氧化氢酶的活性也相应增加，活性氧组分中ＯＨ＾１和Ｏ２＾－自由基不利于紫草色素的合成，而外源的活性氧组分Ｈ２Ｏ２在低浓度（０．１ｍｍｏｌ／ｌ）时可促进紫草素的合成。     

静电作用对细胞色素b5与细胞色素c之间电子传递的影响

研究了细胞色素b5 E44A,E56A,E44/56A,E44/48/56A/D60A及F35Y突变体蛋白与细胞色素c的结合和电子传递反应.细胞色素b5 E44/48/56A/D60A与细胞色素c结合反应没有显示出特征的紫外-可见差谱峰,这表明静电作用的改变对特征峰的形成产生了明显影响.对野生型细胞色素b5及其突变体蛋白与细胞色素c在不同温度和离子强度下电子传递速率的研究中发现,其电子传递速率的递变规律为:F35Y＞野生型＞E56A＞E44A＞E44/56A＞E44/48/56A/D60A.反应的活化熵和活化焓均无明显变化,表明这些残基突变没有给两蛋白间电子传递的结构造成大的改变.通过对电子传递速率随离子强度的变化趋势的研究表明,静电作用明显影响了电子传递过程.突变体蛋白F35Y以及E44/48/56A/D60A和野生型蛋白反应结果的显著差别,进一步确证了静电作用在电子传递过程中的重要作用.     

乙醇对细胞色素c和脱辅基细胞色素c的结构转换影响

用紫外－可见吸收光谱,荧光光谱和圆二色谱对细胞色素c和脱辅基细胞色素c在不同的φ（乙醇）溶液中的结构进行了表征。结果表明,乙醇对细胞色素c的α－螺旋二级结构影响很小,而对血红素配位的影响十分明显,可导致血红素Fe-Met80配位键断裂,另一方面,乙醇对脱辅基细胞色素c有明显的结构转换诱导作用,在φ（C2H5OH）＝0．55（乙醇／水）溶液中,脱辅基细胞色素c的α－螺旋结构含量可以达到全蛋白的89％,研究结果表明：负电荷微环境的诱导对脱辅基细胞色素c的结构转换并不是必要的,改变溶剂与脱辅基细胞色素c之间的疏水和氢键相互作用力也可以诱导脱辅基细胞色素cα-螺旋的形成。     

BR促进滇紫草培养细胞生长和色素形成的研究

Ｂｒａｓｓｉｎｏｌｉｄｅ (ＢＲ)ｃａｎｓｔｉｍｕｌａｔｅｔｈｅｃｅｌｌｅｌｏｎｇａｔｉｏｎａｎｄｄｉｖｉｓｉｏｎａｔｎａｎｏｍｏｌａｒｌｅｖｅｌｓｗｈｅｎａｐｐｌｉｅｄｔｏａｐｌａｎｔ .Ｉｔｃａｎｐｒｏｍｏｔｅｅｌｏｎｇａｔｉｏｎｏｆｅｐｉｃｏｔｙｌｄ ,ｈｙｐｏｃｏｔｙｌｓ ,ｍｅｓｏｃｏｔｙｌｓａｎｄｃｏｌｅｏｐ ｔｉｌｅｓ .Ｔｈｉｓｅｆｆｅｃｔｗａｓｆｏｕｎｄｔｏｂｅａｃｃｏｍｐａｎｉｅｄｂｙａｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｏｎｅｘｔｒｕｓｉｏｎｆｒｏｍｔｈｅｃｅｌｌ[1] ,ｗｈｉｃｈｉｓｓｉ…     

米曲霉激发子剌激滇紫草细胞活性氧的产生及与紫草色素形成的关系

米曲霉激发子剌激滇紫草细胞１０ｍｉｎ内快速释放活性氧，同时胞内具活性氧清除作用中的超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性也相应增加。活性氧组分中的ＯＨ和Ｏ２自由基不利于紫草色素的合成，而外源的活性氧组分Ｈ２Ｏ２在低浓度（０．１ｍｍｏｌ／１）时可促进紫草色素的合成。     

固定化细胞法生产L—苹果酸

L—苹果酸是人体必需的一种有机酸。其制取方法有:(1)从果汁中提取;(2)化学合成DL—苹果酸,再经拆分制得;(3)发酵法。随着固定化酶技术的发展,日本利用聚丙烯酰胺凝胶包埋含有延胡索酸酶的产氨杆菌,制成固定化细胞,实现了L—苹果酸的连续、高效、廉价的工业化生产。其反应式为: