人胎肝金属硫蛋白的分离纯化及酶联免疫吸附检测

人胎肝经匀浆、离心、乙醇沉淀后,通过Sephadex G-75、DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析分离,获得金属硫蛋白的两种亚型(MT-1和MT-2)。经氨基酸组成分析证明是均一的。MT-1为抗原免疫青紫兰兔制备了抗血清,以纯化的IgG建立了人MT的酶联免疫吸附检测(ELISA)方法,并给出了标准工作曲线。     

假丝酵母类金属硫蛋白的分离、纯化及功能研究

假丝酵母Cu-12(Candida sp．Cu-12)经Cu^2 诱导产生的蛋白进行Sephadex G-100和纤维素DE-52分离纯化及理化性质测定，获得的蛋白具有四个亚型，其主理化性质均与MT的定义相符，因此确定得到了假丝酵母的类金属硫蛋白，同时测定了该Cu—MT清除羟自由基和氧自由基的能力．     

镉诱导大鲵肝脏与肠金属硫蛋白的分离纯化与鉴定

以两栖动物大鲵为材料，镉诱导金属硫蛋白（ＭＴ）合成，凝胶过滤ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０及弱阴离子交换ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ常压液相柱层析进行两次分离纯化肝脏及肠材料，分别得到两个ＭＴ亚型，凝胶过滤表观分子量约１２ｋＤ，半胱氨酸含量约２１％￣２４％，主要含Ｃｄ与Ｚｎ，Ｃｄ／Ｚｎ约为３／１，肝ＭＴ产率为６２８μｇ ＭＴ／ｇ鲜重肝，肠ＭＴ产率为１８５μｇＭＴ／ｇ鲜重肠，２５０ｎｍ     

鸭肝金属硫蛋白的分离纯化及鉴定

以信阳华英鸭为材料,用ZnSO4诱导其肝脏合成金属硫蛋白(MT),将鸭肝材料经Sephadex G-50柱层析和DEAE-Sepharose CL-6B阴离子交换柱层析2次分离纯化,得到Zn-MT,该MT由61个氨基酸组成,其中半胱氨酸含量约为28%,分子量6.5 KD.鸭肝Zn-MT产率为0.57 mg/kg鲜肝重,在220 nm有吸收峰.     

家兔肝的金属硫蛋白的分离和纯化

往皮下注射氯化镉诱导家兔产生金属硫蛋白;取其肝制成匀浆,用无水乙醇和氯仿沉淀杂蛋白,再用三倍体积乙醇沉淀出金属硫蛋白粗品;通过Sephadex G-75柱层析和DEAE-Sephadex A-50离子交换层析,获金属硫蛋白-A和-B纯品。将所得的纯品用原子吸收光谱测定镉离子含量、用高效液相色谱测定纯度、用氨基酸组成分析仪分析氨基酸组成。     

酿酒酵母金属硫蛋白的表达、纯化及活性检测

通过PCR从酿酒酵母基因组DNA上扩增得到酿酒酵母基因CUP1编码的金属硫蛋白序列.将其编码序列克隆到质粒pTWIN1构建重组表达质粒pTWIN1-MT,转化大肠杆菌感受态细胞ER2566.重组融合蛋白CBD-intein1-MT在IPTG的诱导下得到表达,经SDS-PAGE和蛋白质印迹鉴定.用重组菌分别进行铜离子耐受...     

酵母双杂交系统检测金属硫蛋白(MT)间的相互作用

金属硫蛋白-3(MT-3),又称神经生长抑制因子,为金属硫蛋白家族中惟一具有生物活性的成员。为了验证其在细胞内是否形成二聚或多聚体,构建酵母双杂交系统用于检测。结果表明：MT-3与MT-3之间在酵母细胞内能发生相互作用,进一步用酵母双杂交实验还表明MT-3与MT-1间也存在弱相互作用。由此提示,在机体细胞中,MT-3可以以同源或异源二聚体的形式存在。     

金属硫蛋白市场潜力巨大

金属硫蛋白，简称MT，商品外观为白色或淡黄色冻干粉，每分子产品中结合有5－7个锌离子，半脱氨酸、赖氨酸和天冬氨酸的含量分别为24％、15％和10阮，蛋白纯度子叨叽。通常存在于人和哺乳动物内脏、血液和胆汁等生物体内，工业化生产从新西兰免肝中提炼而成，国内有北京和德生物有限公司等厂家生产。MT是富含氨基酸和半眈氨酸残基的蛋白质，其分子生物活性高，对热稳定性好，不含组氨酸和芳香族氨基酸，能结合锌、铝、铜、铜、银、汞、初等金属离子。具有抗辐射、抗衰老和重金属解毒等作用，在医药、日化、食品、饲拌、农业、环保、国防等…     

金属硫蛋白分子改造与设计

金属硫蛋白（ＭＴ）的三维结构已由二维ＮＭＲ和Ｘ射线晶体衍射测定。本文使用ＰＳ－３００图象显示仪及计算机Ｈｙｄｒａ程序，对ＭＴ分子进行改造设计，目的探索提高ＭＴ与Ｃｄ，Ｈｇ结合能力的分子设计。     

金属硫蛋白的研究进展

本对近年来金属硫蛋白的结构,特性和功能及其分子生物学的国内外研究进展作一综述,讨论了金属硫蛋白与医学的关系,提出了有待研究解决的问题,展望了其应用前景。     

基因工程菌产植酸酶(phytA)的纯化及性质初步研究

基因工程酵母菌Y8经发酵，硫酸铵分级沉淀，凝胶过滤层析及阴离子交换层析分离纯化，获得了电泳纯的植酸酶（PhytA)。此酶的分子量约为69.5kD,pI为4.5，最适pH为2.4，最适温度为65℃。与原始出发菌株相比，其最适pH值及等电点相似，但分子量增大，耐热性显著提高。     

金属硫蛋白研究进展

介绍了金属硫蛋白的结构、理化性质和主要功能,金属硫蛋白转录与表达,并对国内外金属硫蛋白与锌、铅、镉、钙的代谢研究,金属硫蛋白与辐射关系,肿瘤的发生、治疗及预后的一些进展进行了介绍,说明了金属硫蛋白有着广阔的应用前景。     

单扫极谱法在金属硫蛋白研究中的应用

本文将络合物吸附波测锌和镉用于金属硫蛋白(MT)的研究。在含α、α′-联吡啶介质中对经硝酸酸化后的MT样品中的锌含量进行测定,并将此法用于具有药用价值的Zn-MT的分离纯化及鉴定。在pH2的HCl-KI介质中,将单扫极谱法测镉用于镉-血红蛋白饱和法测定正常或金属诱导动物组织中的MT含量,检测量可达5μgMT/g组织,回收率为90～110％。     

^99Tc^m通过金属硫蛋白标记抗肿瘤单克隆抗体的研究

本文系统研究了^99Tc^m通过双功能联接剂金属硫蛋白（MT）标记抗肿瘤单克隆体的化学问题，并发展了新的实验方法和技术。用交联剂戊二醛制备MT与抗体（Ab)偶联物（MT－Ab)，偶联率为58％。用还原标记法制备^99Tc-MT-Ab，放射性利用率高达90％以上，而非特异标记低于10％。体外试验表明，在强络合剂竞争时，标记物有较高的稳定性。抗结肠癌单抗CL－3标记物的免疫反应活性保留87％。     

生物酶催化合成二磷酸果糖(FDP)及其纯化技术的研究

主要研究了表面活性剂CTAB进行膜透性处理酿酒酵母Y3后，生物酶合成FDP的工艺条件，针对转化液中的中间产物的理化特性不同，采用钙盐沉淀初步分离FDP，用弱碱性阴离子交换树脂纯化FDP。用酒精-媒晶剂体系结晶FDP，产品的总收率和纯度分别为75％和99．5％。     

利用菲律宾花蛤的金属硫蛋白作为镉污染的检测指标

以菲律宾花蛤Ruditapes philippin Adams et Reave为实验动物,分别提取其外套膜和内脏团等组织的金属硫蛋白,经Sephadex G-75葡聚糖柱层析纯化后,用DV-600紫外可见分光光度计测定每个样品金属硫蛋白的吸收值,以研究菲律宾花蛤体内的金属硫蛋白浓度与镉污染之间的关系.结果表明:诱导实验能使检测菲律宾花蛤的内脏团和外套膜的金属硫蛋白含量均明显增加;金属硫蛋白的吸收值与菲律宾花蛤重量、壳长、壳宽均有较大的相关性.从这些关系中,认为利用金属硫蛋白作为菲律宾花蛤镉污染的检测指标是可行的.     

里氏木霉木聚糖酶的分离纯化及其性质

使用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-25凝胶色谱脱盐、DEAE-Sephadex A-50和SP-SephadexC-50离子交换色谱等分离纯化技术，从里氏木霉（Trichoderma reesei）RutC-30培养液中分离出木聚糖酶组分，再经SephadexG-100凝胶过滤色谱进一步分离纯化，得到2个纯木聚糖酶组分A组和组分B。经SDS-PAGE鉴定两组分为单带，相对分子质量分别为20300和13500。组分A的最适反应条件为45℃、pH3.0-5.5很稳定，酶解产物主要是低聚木糖，只含少量木糖；组分B的最适反应条件为55℃、pH5.5，酶解产物全部是低聚木糖。     

大肠杆菌108(pPAHD1)青霉素G酰化酶的纯化与结晶

大肠杆菌108(pPAHD1)发酵液经离心沉淀,蔗糖高渗处理得到青霉素酰化酶粗品,再经苯乙酰胺-Sepharose4B疏水层析和DEAE-Cellulose DE-52分离纯化,得到可用于结晶的青霉素G酰化酶。在55％饱和度硫酸铵-0.05mol/LPBS,pH7.5条件下批量静置得到该酶晶体。