蜜环菌胞外多糖对小鼠免疫功能的影响

研究蜜环菌胞外多糖对小鼠免疫功能的影响.采用环磷酰胺(CY)造模法制作小鼠免疫抑制模型,测定如下实验指标:免疫器官重量指数、腹腔巨噬细胞的吞噬功能、迟发型变态反应(DTH)、溶血素(IgM)含量.结果表明:给小鼠灌胃剂量为200、400 mg/kg·d的蜜环菌胞外多糖和100 mg/kg·d的香菇多糖能显著提高免疫器官重量,增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能,提高迟发型变态反应和促进溶血素(IgM)形成.说明蜜环菌胞外多糖有显著提高小鼠免疫功能的作用.     

茄青枯假单胞菌毒性基因的功能分析

分离自花生的茄青枯假单胞菌(Ralstonia solanacearum,R.s)T2015的一段4.5 kb DNA中ORF2和ORF3位于同一个操纵子中.ORF2和ORF3 DNA序列与GeneBank同源性比较分析和T2015及其突变体T2136(ORF2)、T2135/R(ORF3)、T2135(ORF3极性突变体)和互补株T2136/R(ORF2)、T2145(T2135)的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)SDS-PAGE带型比较分析表明:ORF2参与LPS完整的核心的合成;ORF3编码产物在LPS完整的生物合成中起脂质A核心区—O-antigen连接酶作用.菌落形态和植株实验结果表明LPS与病菌菌落形态和其对寄主的致病性有关,而与其在非寄主上引起过敏反应能力无关.     

裂褶菌胞内和胞外多糖的组成及几种理化性质的分析

裂褶多糖(schizophyllan)是从一种担子菌--裂褶菌Schizophyllum commune Fr.菌丝体和发酵液所产生的多糖,深层发酵培养5天后,菌丝体用热水提取,提取液用乙醇沉淀,得胞内粗多糖,发酵液用乙醇直接沉淀,得胞外粗多糖。多糖粗品经Sevag法脱蛋白,活性炭脱色,流水透析,乙醇沉淀,真空干燥.通过纸层析,薄层层析,紫外光谱,红外光谱等分析技术表明裂褶菌胞内和胞外多糖均为一中性含有蛋白的β—糖苷键葡聚糖. 裂褶多糖是一种免疫活性多糖,对动物肿瘤的生长具有明显的抑制作用.对抗菌素有增效作用,能提高抗菌素效价和降低付作用.此外对绿脓杆菌有较强的拮抗活性。     

荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens GcM5 1A菌株的 胞外木素过氧化物酶的部分纯化和鉴定

荧光假单胞菌GcM5 1A是松材线虫携带的一种致病菌。在GcM5 1A的培养液中发现有木质素过氧化物酶的活性，同时显示很强的毒性。通过对其胞外木质素过氧化物酶的酶学性质的初步研究发现：其最适温度为35 ℃，最适pH为4.0。在15~35 ℃、pH为6.0~9.0范围内，酶活保持相对稳定。NH2OH·HCl和KCN对酶活的抑制作用分别达到88 %和57 %，而NaN3对酶活的抑制作用只有15 %左右。Ca2+、Mn2+ 和Fe3+对其活性有增强作用，但是Hg2+ 和 Zn2+却有中等的抑制作用。KCN 和NH2OH·HCl抑制其酶活性分别达57 %、88 %，而NaN3的抑制率仅为15 %。吸收光谱显示该酶在406 nm处有一个Soret峰，加入1 mmol/L Na2S2O4后，吸光度出现了明显的下降，但Soret峰没有显著移动。     

茄青枯假单胞菌T2015致病相关基因突变体的构建

分离自花生植株的茄青枯假单胞菌(Ralstonia solanacearum)T2015的Tn5-lacZ插入突变体T2135是极性突变体.采用现代分子生物学实验技术,首先构建了同一操纵子中ORF2的表达质粒pGX6191,并进行生物学验证,然后采用三亲本结合技术导入极性突变体T2135,得到茄青枯假单胞菌T2015中与致病相关基因ORF3的突变体T2135/R.     

假蜜环菌产胞外多糖发酵的初步研究

在摇瓶和２１发酵罐水平上，研究了假蜜环菌产胞外多糖的发酵情况，并建立了一套方便可靠的检测方法。在摇瓶发酵中，探讨了培养基初始ｐＨ、初始糖浓度、装液量及钙离子等因素对假蜜环菌产生胞外多糖的影响，得出的优选条件为初始ｐＨ５．０，初糖浓度５％，每个５００ｍｌ瓶装液１００ｍｌ及添加１％碳酸钙。优选条件下在２１发酵罐中经７ｄ发酵后，胞外多糖产量可高达３．９９ｍｇ／ｍｌ。有关假蜜环菌胞外多糖的发酵研究，尚未见有报道。     

蜜环菌胞外多糖的分离纯化及其性质研究

从蜜环菌发酵液提取粗多糖,经分离纯化得到多糖-A和多糖-B两个组分,快速纯化系统(FPLC)和电泳法鉴定各自为均一的组分。FPLC法测定A组分的分子量分别为2.0×105,苯酚-硫酸法测得其总糖含量为86.6%,考马斯亮蓝法测其蛋白含量为12.92%,硫酸-咔唑法测其酸性多糖含量为28%,红外光谱呈现多糖吸收特征峰,含有吡喃糖苷键。β-消去反应初步证明所提取的多糖-A存在O-糖肽键。     

苍耳果实中大小两种种子的某些生物化学特性

对苍耳果实中处于不同休眠状态的大小两种种子，进行了五种生化指标分析。分析结果表明：苍耳种子含有较多不同分子量的贮藏蛋白和ＳＯＤ；在细胞色素氧化酶和过氧化物酶同工酶谱方面，存在明显的差异。     

花生DNA导入大豆的后代POD SOD活性及其同工酶谱分析

利用花粉管通道技术，将花生ＤＮＡ导入大豆中，得到变异后代Ｄ３．取结荚期大豆、花生和Ｄ４的不同器官为测试材料，对超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性及同工酶特性进行了比较研究．结果表明，导入后代Ｄ４种皮的ＳＯＤ、ＰＯＤ活性明显增高，种子活性降低；其同工酶在凝胶上的分布及染色活性均表现出与受体和供体不同的特征，有的酶带明显来自花生ＤＮＡ．     

NaCl胁迫对苎麻叶片中SOD、POD及CAT活性的影响

在NaCl胁迫下，研究苎麻超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性的变化。结果表明。苎麻叶片中SOD和CAT活性均在NaCl浓度为9g／L时活性达到最大值，随后有所下降。苎麻叶片中POD活性在NaCl浓度6g／L时活性达到最大值。     

水杨酸和镰刀菌酸对棉花 POD 和 PAL 的影响

比较了水杨酸和镰刀菌酸对棉花植株和棉花组织培养细胞中的过氧化物酶和苯丙氨酸解氨酶的影响,用镰刀菌酸和水杨酸分别处理棉花离体叶片,过氧化物酶与苯丙氨酸解氨酶的活性都提高,但是过氧化物酶同工酶不同．用水杨酸预处理棉花叶片可抑制镰刀菌酸的诱导作用．     

不同Cu污染对花生POD、SOD活性及土壤酶活性的影响

通过盆栽实验研究不同Cu浓度梯度处理对花生幼苗成活率、初花期生理生态指标及土壤酶活性的影响.结果表明,随着Cu浓度的增加,花生的萌发和成活率明显下降,花期叶片中SOD和POD活性出现先增加后又下降的趋势,电导率增大,色素含量降低,花生开花期植株生物量降低,株高、根长减短;土壤中5种酶活性皆有所下降,对Cu的敏感程度表现为脲酶>磷酸酶>过氧化氢酶>多酚氧化酶>蔗糖酶.     

云芝多糖影响人宫颈癌HeLa细胞的增殖和凋亡的研究

研究云芝多糖(CVP)对宫颈癌HeLa细胞系的增殖、凋亡及产生途径。采用MTT法测定了CVP对HeLa细胞增殖的体外抑制作用,流式细胞仪检测凋亡细胞的比例,qRT-PCR检测P53、Bcl-2和Fas基因在细胞处理前后表达量的变化。结果显示：CVP以时间和剂量依赖的方式抑制HeLa细胞的生长。作用时间在24 h,48 h和72 h时对细胞抑制的抑制率分别为92%、95%和98%;当CVP浓度达到1.25 mg/L时,作用24 h、48 h和72 h时的IC50值分别为0.2507±0.01 mg/L、0.2720±0.04 mg/L和0.2736±0.03 mg/L;当CVP浓度为0.5 mg/L时,作用24 h和48 h后细胞凋亡率分别为26.36% 和63.81%;CVP处理HeLa细胞24 h后,Bcl-2基因的表达被显著下调。研究表明：CVP促进HeLa细胞凋亡,其作用机制与Bcl-2基因的表达下调有关,推测是通过Bcl-2介导的途径促进细胞凋亡。图4表1参30     

总状蕨藻盾叶变种多糖对小鼠T细胞亚群及NK细胞免疫功能的调节

目的:观察总状蕨藻盾叶变种多糖对正常小鼠T细胞亚群及NK细胞的免疫调节作用.方法:腹腔注射总状蕨藻盾叶变种多糖溶液,用流式细胞仪检测血中免疫参数(CD3 ,CD4 ,CD8 T细胞亚群百分比)和脾脏NK细胞百分比,并测定胸腺、脾脏指数.结果:总状蕨藻盾叶变种多糖能明显降低小鼠血中CD3 ,CD4 ,CD8 百分比(P＜0.05),同时增强脾脏NK细胞百分比(P＜0.05),并显著降低胸腺指数(P＜0.05),增加脾脏指数(P＜0.05).结论:总状蕨藻盾叶变种多糖对小鼠T细胞亚群和NK细胞具有双向的免疫调节作用.     

增强UV-B辐射对诸葛菜POD和CYT同工酶基因表达的影响

在室内人工条件下短期内增强UV B辐射(0 028～0 029J/(m2·s)),利用不连续非变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳技术对3个不同地理种源的诸葛菜叶片过氧化物酶(POD)和细胞色素氧化酶(CYT)同工酶基因表达变化进行了研究.发现各个种源材料的POD和CYT酶Pod 2,Pod 3,Pod 4(重庆种源处理组除外)和Cyt-2位点基因表达与对照组相比均有明显增强,Pod 1和Cyt-1位点酶基因被激活而表达.并由于UV B辐射诱导产生许多新的同工酶带,这表明,短期内一定程度增强UV B辐射可以加强诸葛菜叶片POD和CYT同工酶的基因表达.     

长期氮添加对落叶松和水曲柳人工林土壤碳、氮、磷含量和胞外酶活性的影响

【目的】氮(N)沉降速率的持续增加影响着森林生态系统的物质循环。本研究旨在探讨长期N添加对两种人工林土壤微生物生物量和胞外酶活性的影响。【方法】基于黑龙江帽儿山森林生态系统国家野外科学观测研究站落叶松(Larix gmelinii)和水曲柳(Fraxinus mandshurica)人工林的长期(16年)N添加[N添加速率为10 g/(m²·a)]试验,测定对照和N添加处理样地土壤的碳(C)、N、磷(P)各组分含量、微生物生物量以及C、N、P循环相关的胞外酶活性。【结果】长期N添加显著增加了两种人工林无机N含量,但降低了两种人工林微生物生物量C、N含量。N添加抑制了水曲柳人工林β-葡萄糖苷酶、过氧化物酶和酚氧化酶活性,但对落叶松人工林的这些C分解酶活性的抑制作用不显著。回归分析进一步发现微生物生物量、β-葡萄糖苷酶、过氧化物酶和酚氧化酶均随着土壤pH的降低而显著降低。几丁质酶活性在落叶松人工林中对N添加呈现负响应,却在水曲柳人工林中对N添加呈现正响应。然而,N添加均未显著改变两种人工林的磷酸酶活性、总有机C,以及酸水解法划分的C组分、全N、全P和有效P含量。【结论】长期N添加主要通过土壤酸化途径改变落叶松和水曲柳人工林土壤微生物生物量和酶活性,而N添加对胞外酶活性的影响因树种而异,这可能与两个树种的不同凋落物质量和菌根类型有关。N添加对土壤微生物和C分解酶活性的抑制作用并没有显著增加土壤C含量和改变C组分,其内在机制需要未来从土壤有机C的形成和稳定性方面进行揭示。     

硫化氢对白桦悬浮细胞中多胺和次生代谢物积累的影响

【目的】分析硫化氢(H₂S)对白桦悬浮细胞中多胺含量和次生代谢物积累的影响。【方法】将不同浓度的H₂S供体硫氢化钠(NaHS)添加到白桦悬浮培养体系中,采用高效液相色谱法和比色法分析不同形态的多胺含量、多胺合成酶和分解酶活性以及黄酮、多酚和三萜等次生代谢物含量。【结果】 NaHS处理后白桦悬浮细胞中总多胺含量呈先增加后降低趋势,其中1 mmol/L NaHS处理24 h时腐胺和亚精胺总含量达最高值,分别比对照增加了30.51%和12.37%; 除高氯酸不溶性结合态亚精胺外,NaHS处理后白桦悬浮细胞中游离态、高氯酸可溶性结合态和不溶性结合态腐胺和亚精胺含量均有不同程度的增加; 同样,NaHS处理后多胺合成酶(ADC)和多胺分解酶(PAO)活性基本呈增加趋势,增加幅度分别为15.91%～26.33%和137.50%～250.12%; 1 mmol/L NaHS与不同浓度的腐胺、亚精胺和精胺分别处理悬浮细胞,不同程度地提高了白桦悬浮细胞中多酚、黄酮和三萜含量。其中,5 mmol/L 腐胺与NaHS共同处理后白桦悬浮细胞中多酚、黄酮和三萜含量达最大值,分别比NaHS单独处理增加了26.69%、13.22%和 4.55%。【结论】H₂S处理提高了白桦悬浮细胞中多胺和次生代谢物含量,H₂S与多胺共同处理可进一步促进次生代谢物的累积。