乙醇酸氧化酶分子结构的研究和存在的问题

本文分析了乙醇酸氧化酶分子量相差很大的原因,但目前认为乙醇酸氧化酶为单一亚基所组成的观点难于解释为何乙醇酸氧化酶具有多个不是等电点,对等电点的正确认识将有助于揭示乙醇酸氧化酶分子结构。     

菠菜中高活性高等电点的乙醇酸氧化酶同工酶纯化方法的改进

通过缩短DEAE-celluloses柱长度,提高其洗脱液pH,可快速地从菠菜绿叶中纯化得到乙醇酸氧化酶同工酶,证实其具高活性113.0 U/mg·min和高等电点(pI)10.6.纯化后产率为0.14％,纯化倍数为66.5.经SDS-PAGE和毛细管电泳(CE-SDS)均只有40kD单带,说明已纯化至电泳纯.     

植物乙醇酸氧化酶的研究进展

乙醇酸氧化酶存在于细胞过氧化物酶体中,是光呼吸代谢的关键酶之一,能催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,催化乙醛酸生成草酸;光呼吸与农业生产关系紧密.乙醇酸氧化酶是一种黄素蛋白,不同来源的乙醇酸氧化酶全酶分子质量和亚基相差很大.     

甘蓝型油菜乙醇酸氧化酶(GO)基因片段的克隆及hpRNA表达载体构建

通过PCR从甘蓝型油菜(Brassica napus)华双4号基因组DNA中扩增出乙醇酸氧化酶(GO)基因片段,DNA序列分析表明扩增GO基因片段的外显子部分与报道序列相同.以扩增出的GO基因片段作模板从一端设计引物扩增出一个相应的小片段.将GO基因大小两个片段反向连接,插入到植物表达载体2300-nap的napin启动子和nos终止子之间,植物表达载体2300-35S的35S启动子和nos终止子之间,分别构建成可转录表达出发夹RNA(hairpin RNA,hpRNA)结构的种子特异型和组成型油菜hpRNA干扰载体.     

乙醇酸氧化酶底物诱导实验

乙醇酸氧化酶底物诱导实验徐杰（华南师范大学生物技术研究所广州５１０６３１）关键词乙醇酸氧化酶；底物诱导；６６ｋｕ蛋白中图分类号Ｑ９４６．５我们用改进后的方法，即粗蛋白在柱层析前加人适量的ＦＭＮ，硫酸铰质量分数分布范围改为１５％一２５％，其余按［１１纯...     

水稻乙醇酸氧化酶的纯化和特性分析

从水稻绿叶分离纯化得到一种单来基的乙醇酸氧化酶，其全酶分子量约为２６０ＫＤ，电泳特性表明该酶的ｐＩ〈８．３我们用改进的８％ＰＡＧＥ，结合Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ，测定水稻绍叶中还存在一种ｐＩ〉８．３的全酶Ｍｒ〉６６９ＫＤ的乙醇酸氧化酶。     

马铃薯乙醇酸氧化酶StGLO1对模拟水分胁迫的响应

为了解乙醇酸氧化酶在调控植物生长代谢及生物与非生物胁迫过程中发挥的作用。本研究以‘青薯9号’马铃薯为材料克隆乙醇酸氧化酶基因StGLO1,构建过表达载体并转化烟草,观察在干旱胁迫处理下转基因烟草和野生型烟草的长势,并测定了叶片中的游离脯氨酸、CAT、POD的含量以及转基因根茎叶中StGLO1基因的表达量变化,验证过表达StGLO1烟草在干旱胁迫下的响应。结果表明:StGLO1(GenBank登录号XM_006348318.2)基因CDS为1 116 bp,编码371个氨基酸;干旱胁迫下,转StGLO1基因烟草的生长优于野生型,转基因烟草StGLO1基因的表达量在叶片中最高;转基因烟草中的游离脯氨酸、CAT、POD的含量高于野生型,达到差异显著水平(P0.05)。该结果为进一步研究马铃薯干旱胁迫响应机制有一定参考价值,也丰富了马铃薯抗旱育种的基因资源。     

菠菜中不同等电点的乙醇酸氧化酶的提取和特性

从不同批次的菠菜绿叶中可纯化出5种不同活性和等电点（pI）的乙醇酸氧化酶（CO）．SDSPAGE表明它们均有40kD亚基,它们的比活会随蛋白浓度的增加而上升．第一种CO的pI〈8．3,比活为0．47U／mg,PAGE测定其全酶相对分子量（Mr）为280kD,280kD较稳定．第二种CO的pI〈8．3,但比活为3．44U／mg,PACE测定其Mr为560kD,但很快解聚为280kD．解释了前人报告CO的Mr大多为280kD．第三种CO的pI≈8．3,比活为8．4U／mg,放置后pI会下降至〈8．3,此时用PAGE测出其Mr为560kD．第四种CO的pI〉8．3,比活为27．8U／mg,放置pI也会下降为8．3．第五种CO的pI〉10．2,活性高达113U／mg,放置后其pI也会下降至〈8．3,由于CO的pI会下降,暗示低pI的CO可能并不存在于植物体内,而是实验中的娇作物．     

模拟污水中氮,磷对水稻劝苗过氧化氢酶和乙醇酸氧化酶…

以水稻为材料，研究了不同深度的模拟污水中Ｎ、Ｐ对幼苗过氧化氢酶（Ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ，ＥＣ１．１１．１．６）、乙醇酸氧化酶（Ｇｌｙｃｏｌａｔｅｏｘｉｄａｓｅ，ＧＯ，ＥＣ１．３．３．１）、过氧化和物酶（Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ，ＰＯＤ，ＥＣ１．１１．１．７）和叶绿素含量的影响。结果表明：低浓度Ｎ、Ｐ浓度分别超过８．５６ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１和０－０．２ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１范围）可诱导ＣＡＴ活性增大，而后下     

菠菜乙醇酸氧化酶基因家族的鉴定及表达分析

在菠菜全基因组中鉴定了菠菜(Spinacia oleracea L.)乙醇酸氧化酶(GLO)家族成员,并对其理化性质、亚细胞定位、基因结构、保守基序、同源关系及基因表达进行了分析,发现菠菜中存在5个SoGLOs蛋白,通过进化树分析,菠菜GLO蛋白与甜菜GLO蛋白亲缘关系较近.通过基因结构分析发现该家族基因由9～11个外显子构成.实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)结果表明:硝态氮仅能短期诱导SoGLOs的表达,而铵态氮可以持续抑制SoGLOs的表达,从而影响菠菜草酸的含量.在胁迫处理后,SoGLOs的表达均有明显变化,SoGLO1,SoGLO3和SoGLO5对盐胁迫的响应最明显,SoGLOs可能在菠菜的抗盐、耐高温、耐寒、抗旱以及抗氧化过程中起作用.植物激素的喷施普遍使SoGLOs的表达在短时间内增加,这可能引起菠菜体内草酸的快速积累.     

苏芸金杆菌187菌株的研究进展

苏芸杆菌１８７菌株自１９７８年发现以来，经近２０年的研究，现已在如下方面取得了重要成果：１．苏芸金杆菌１８７菌株的生物学特性；２．其毒力与对纹幼虫的致病机理；３．其伴孢晶体和芽孢的超微结构，生理生化与抗原特性，４．其发酵条件与特性，５．大田灭蚊应用研究。     

用2,4—二氯苯酚测定葡萄糖氧化酶活性的探讨

测定葡萄糖氧化酶(GOD,E.C.1.1.3.4)最广泛使用的方法,是利用葡萄糖氧化酶—辣根过氧化物酶—邻联茴香胺偶联反应,用分光光度法测定;但邻联茴香胺是致癌物,有必要选择毒性较低、灵敏度较高的新染料代替之。国外曾有报道,邻联甲苯胺、邻甲苯胺及2,6-二氯苯酚等一些染料可作为邻联茴香胺的代用品,但前二种仍有致癌性。国内虽有利用GOD酶法、用4-氨基安替比林偶联酚测定血清中葡萄糖含量(Trinder反应)的报道,并指出Barham及Trinder1972年提出用2.4-二氯苯酚代替酚,灵敏度更高,但直接用以测定GOD活性的方法尚未见报道。本文根据Trinder反应原理,选用2,4-二氟苯酚和苯酚共同做为该偶联反应的氧供体,选择了最佳测定条件,并进行了方法学评价。     

菟丝子鉴定方法的研究进展

本文从形态标记、细胞标记、生化标记、分子标记等技术的研究状况方面；概述了菟丝子属近年来的研究进展；分析比较了各鉴定技术的特点；探讨了分子标记在菟丝子近缘种鉴定中的应用前景，并对菟丝子快速检疫鉴定技术作了展望。     

金属离子对葡萄糖氧化酶活性测定的影响

本文研究了一些金属离子对葡萄糖氧化酶测定的影响，指出Ａｇ＋、Ｈｇ２＋具有较强抑制作用，最小抑制浓度分别为５ｕｇ／Ｌ及４ｍｇ／Ｌ，Ｉ５０分别为２０ｕｇ／Ｌ及７．７ｍｇ／Ｌ。     

茶碱对美味侧耳胞外多酚氧化酶和纤维素酶活性的影响

本文以美味侧耳为实验菌研究了茶碱对胞外多酚氧化酶和纤维素酶活性的影响.多酚氧化酶活性测定是用邻甲氧基苯酚为底物,用分光光度法测定.纤维素酶活性测定是以微晶纤维素和 CMC 为底物,用 DNS 法测定还原糖生成量.结果表明:当棉子壳培养基中茶碱浓度为0.5～2ppm 时,酶活提高极为显著,这一结果与茶碱促进菌丝生长和子实体形成的效应相吻合.