基于CYP24A1的癌症治疗研究进展

25-羟维生素D_3-24-羟基化酶(CYP24A1)是使1α,25-二羟基维生素D_3(1α,25(OH)_2D_3)和25-羟基维生素D_3(25(OH)D_3)代谢失活的关键酶。活性维生素D(1α,25(OH)_2D_3)不仅能够抑制细胞增殖、诱导细胞分化与凋亡、增强免疫调节作用,还可以降低癌症发生风险。有越来越多的证据表明,血清25(OH)D_3水平降低、CYP24A1基因高表达与多种癌症的发生率及不良预后密切相关,CYP24A1高表达可能促进维生素D的代谢降解,进而影响癌症的发生与发展。CYP24A1抑制剂或维生素D类似物与1α,25(OH)_2D_3联用能够显著提高1α,25(OH)_2D_3的抗肿瘤细胞增殖作用,这能为癌症的预防和治疗提供新的思路。回顾了CYP24A1在癌症中的研究进展,并就维生素D活性类似物及CYP24A1抑制剂在癌症治疗中的研究和应用进行了总结,以期为相关癌症的诊断和治疗提供理论参考。     

维生素D缺乏与神经退行性疾病相关性的研究进展

维生素D受体在成年人大脑皮质、海马、黑质、下丘脑等区域均有不同程度的表达,这些区域也是神经退行性疾病阿尔茨海默氏症、帕金森氏症、亨廷顿氏病的病原集中区域。越来越多的数据表明这几种神经退行性疾病患者的血清25(OH)D水平都呈现缺乏状态,维生素D缺乏提高了神经退行性疾病易感性,且1,25(OH)2D具有抗氧化应激和神经保护等作用。维生素D缺乏可能是引起神经退行性疾病发生和发展的病因之一。概述了近年来维生素D缺乏与神经退行性疾病的相关性及其机制的研究进展,可以为维生素D预防和治疗神经退行性疾病的应用提供理论参考。     

封闭Her—2蛋白拮抗碱性成纤维细胞生长因子对人肝癌细胞的粘连效应

目的：探索碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth,bFGF）影响癌细胞粘连的信号传递途径,提供抗癌治疗的线索。方法：以人肝癌细胞系（HepG2）为靶子,明确靶细胞存在Her-2蛋白表达的同时,利用Her-2蛋白抗体封闭靶细胞Her-2蛋白来研究bFGF作为配体与否的细胞粘连效应性。结果：靶细胞HepG2确实具有Her-2蛋白表达;利用抗体封闭靶细胞Her-2蛋白时,靶细胞明显地呈现拮抗bFGF作为配体的细胞粘连加强效应。结论：bFGF对人肝癌细胞粘连性的影响与Her-2基因蛋白介导的信号传递作用有关。     

基于网络药理与分子对接研究百合行治疗认知障碍的机制

为了研究百合治疗认知障碍的作用机制,采用网络药理学方法从TCMSP数据库中筛选出百合的7种主要活性成分及其潜在的465个作用靶点.在GeneCards,OMIM,PharmGkb,CTD,DrugBank数据库中获取认知障碍疾病靶点,然后取百合化学成分与认知障碍靶点两者交集,得到“药物成分—疾病”交集靶点44个.采用Metascape利用STRING数据库,构建交集靶点蛋白相互作用（PPI）网络图,筛选后得到核心靶点与核心成分,其中MAOB（单胺氧化酶B）、CASP3（半胱天冬氨酸蛋白酶3）、ESR1（雌激素受体）、JUN（1号染色体的基因）、CASP8（天冬氨酸蛋白水解酶8）、CASP9（天冬氨酸蛋白水解酶9）、PGR（类固醇受体基因）、AR（肾上腺素能受体）、SLC6A3（多巴胺转运蛋白基因）、PTGS2（环氧合酶-2）为百合药效成分抗认知障碍作用的关键靶点蛋白.利用DAVID和Metascape平台进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,采用AutodockVina平台实现分子对接.结果表明,百合的4个活性化合物与10个认知障碍关键核心靶标相关,参与调节的关键信号通路有30条.其中,度值较大的化学成分有豆甾醇、3-去甲秋水仙碱、β-谷甾醇、松香酸;度值较大的靶点蛋白有MAOB,PTGS2,CASP3,CASP9等;主要涉及的通路有神经活动配体—受体相互作用通路、钙离子信号通路、小细胞肺癌通路等.百合治疗认知障碍的作用机制可能是通过抑制单胺氧化酶B的活性,改善认知功能.     

北京地区部分汉族男性维生素D受体基因Tru9 I多态性与骨密度的关系

探讨维生素D受体(VDR)Tru9 I基因多态性与北京地区部分汉族男性骨密度(BMD)的关系.筛选长期居住北京地区无血缘关系的健康20～80岁汉族男性230人,应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法检测研究对象维生素D受体基因的Tru9 I基因型,使用双能X线吸收测定法检测随机抽取的106例受试者腰椎和髋部的BMD.研究对象中VDR基因Tru9 I的3种基因型TT、Tt、tt的频率分别为66.9%、30.5%、2.6%,符合Hardy-Weinberg定律;在各年龄组不同部位Tt与tt基因型BMD值之和大多偏高于TT基因型,但差异无统计学意义(P>0.05).但在20岁组的L2-4部位Tt与tt基因型BMD值之和明显高于TT型(P=0.058).校正年龄、体质量、身高和体质量指数对BMD的影响后,在各年龄组男性中Tru9 I不同基因型组间与腰椎、股骨近端部位的BMD值未见明显差异(P>0.05).因此VDR Tru9 I基因位点多态性分型对男性BMD的关系尚不明确,其基因型的检测对骨质疏松症发病机制的研究尚待展开更大样本的调查.     

橄榄苦苷对染砷小鼠大脑神经免疫相关基因表达的影响

为了研究橄榄苦苷(OP,oleuropein)对染三氧化二砷(As_2O_3)小鼠大脑神经免疫相关基因表达的影响.将昆明小鼠随机分成对照组、As_2O_3组和As_2O_3+OP组,按不同方式灌胃,连续5周后,利用基因芯片技术来评价OP对染砷小鼠大脑神经免疫相关基因表达的影响.与对照组比较,As_2O_3组小鼠大脑白细胞介素(IL, interleukin)家族基因IL-3、IL-10、IL-11、IL-1a、IL-15、IL-20、IL-23a、IL-31、IL-1f6、IL-13、IL-25和IL-24表达下调,IL-17d表达上调;白细胞介素家族受体基因IL-13受体α1(IL-13ral)和IL-2受体γ链(IL-2rg)表达上调,IL-17受体C (IL-17rc)表达下调;下丘脑-垂体-肾上腺轴受体相关基因精氨酸加压素(Avp)、精氨酸加压素受体1B(Avpr1b)、精氨酸加压素受体1A(Avpr1a)、精氨酸加压素受体2(Avpr2)、促肾上腺皮质激素释放激素受体1(Crhr1)、促肾上腺皮质激素释放激素受体2(Crhr2)表达下调,促肾上腺皮质激素释放激素(Crh)和阿黑皮素原α(Pomc1)表达上调.经OP干预后,As_2O_3致小鼠的神经免疫毒性明显减轻,大脑组织白细胞介素家族部分基因和下丘脑-垂体-肾上腺轴受体相关基因的表达水平与对照组表达无差异.OP可降低As_2O_3对小鼠神经免疫的毒性,其机制与影响大脑组织白细胞介素家族部分基因和下丘脑-垂体-肾上腺轴受体相关基因的表达有关.     

莱芜猪和沂蒙黑猪IGF-Ⅰ基因的多态性及生长性状的关联性分析

采用PCR-SSCP方法对莱芜猪（127头）和沂蒙黑猪（132头）的胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）基因exon3和exon4分别进行单核苷酸多态性分析.发现exon3上有多态性，且存在3种基因型（AA、AB、BB）.统计结果表明，3种基因型在两品种中的分布不一致，差异极显著（P〈0.01）.固定效应模型分析结果表明，初生重、断奶重和6月龄重基因型间差异不显著（P〉0.05）.最小二乘分析结果表明，BB基因型与其它2种基因型比较有较大的初生重，同AA和AB型比较差异极显著（P〈0.01），3种基因型在初生重的大小排列顺序为AA〈AB〈BB．因此，推测IGF—Ⅰ基因对个体的初生重存在一定的影响，选择带有B等位基因的个体，有望提高个体的初生重．     

用计算机对人类TSPYl基因P53结合位点的鉴定

根据p53下游基因在其调节区域（启动子或内含子）含有与P53蛋白特异性结合的一致性序列5’-RRRCWWGYYYN（0-13）RRRCWWGYYY-3’，R—G或A，W—T或A，Y—C或T，N—A，C，T，G。用计算机对人类基因组中P53结合位点进行了研究，发现Y染色体上的TSPY1基因内含子中含有这样的一致性序列5’-GGGCTAGTTTtgGAGCTAGCCT-3’，意味着TSPY1基因有可能是一个p53下游基因。     

人心脏发育候选基因hole在MAPK信号传导途径中的作用

MAPK信号传导途径是存在于真核细胞中的最广泛的一种调节机制,它与心血管的发育、心肌肥大等心脏疾病的发生有着密切的关系。利用荧光素酶的活性分析讨论人hole基因在MAPK信号途径中的作用。实验表明,COS-7细胞中过表达hole蛋白能够强烈抑制MAPK信号途径的2个下游转录因子AP-1和SRE的转录活性。hole的突变体报道基因分析表明,hole基因可能是通过其N′端的ERK结合区和C′端的多聚脯氨酸序列来行使其抑制作用的。研究表明,该基因可能通过参与MAPK信号途径而在心脏发育的过程中起作用。     

TNFα基因在小鼠成纤维细胞L929中的调控研究

质粒pEGFP-1是一种不含启动子序列的哺乳动物细胞表达载体，将系列缺失的TNFα基因启动子5‘UTR（untranslated region）和3‘UTR插入pEGFP-1中，构建了一组重组质粒，转染L929细胞后，发现当报告基因EGFP的上游含有包括5‘UTR在内的TNFα基因启动子序列时，重组质粒在L929细胞中均能表达EGFP，但是，当EGFP基因3‘端同时含有TNFα基因的3‘UTR时，重组质粒转染L929细胞后，均不能表达EGFP，因此，在L929细胞中，TNFα基因的3‘UTR对基因表达具有抑制作用，进一步研究发现，在L929细胞中，TNFα基因的3‘UTR对基因表达的抑制作用需要其5‘UTR的共同参与，而且，RT－PCR实验表明，LPS在其他细胞中对TNFα基因起诱导作用的机制在L929细胞中不存在。     

肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)在TNF信号传导中的作用

肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAFs)是经TNF受体超家族和IL-1R/TLR超家族信号传导通路的重要成分.TNF信号传导中,TRAF2作为接头蛋白和调控因子在几乎所有分支通路中起作用,在调节TNF-R1介导的NF-κB和JNK激活过程中起重要作用.近来的研究提示,TRAF2是凋亡信号传导和抗凋亡信号传导的分支点.本文主要阐述TRAF2的分子结构及它的结构与功能的关系,TNF信号传导的分子机制及TRAF2在其中的作用,重点关注TRAF2作为凋亡途径和NF-κB介导的存活途径,即这2条相互拮抗的信号传导途径的分支点的重要性.     

Ice-2和Ice-5基因在家蚕凋亡信号通路中的作用研究

细胞凋亡是细胞自主的有序死亡，caspase家族在细胞凋亡中起着重要的作用，ICE（Interlukin-1β—converting enzyme，白细胞介素-1β转换酶）是Caspase家族的一员，又称Caspase-1。为了了解家蚕ice-2和ice-5基因（GenBank登录号为：DQ360829和DQ360830）在凋亡信号通路中的作用，采用紫外线等刺激家蚕幼虫和家蚕细胞，利用荧光定量PCR的方法测定不同因素刺激下的ice-2和ice-5的表达量的变化。结果显示ice-2和ice-5都与家蚕的细胞信号转导有关，ice-5可能比ice-2起更重要的作用。     

射干-麻黄配伍治疗咳嗽变异性哮喘的分子机制探索

通过网络药理学方法预测射干-麻黄配伍治疗咳嗽变异性哮喘（cough-variant asthma,CVA）的可能分子机制。采用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）筛选射干、麻黄有效活性成分及对应治疗靶点,从GeneCards获取CVA疾病靶点基因,经过映射分析获得射干-麻黄活性成分直接作用的CVA目标靶点。构建中药-活性成分-靶点基因调控网络,通过String数据库进行目标靶点的蛋白质-蛋白质相互作用分析并筛选关键基因,借助生物信息分析工具预测靶点基因参与的基因本体生物学过程、京都基因与基因组百科全书信号通路。结果表明：从TCMSP获得射干-麻黄有效活性成分30个,直接调控的CVA靶点基因75个,射干-麻黄调控CVA存在多成分、多靶点的网络调控作用;靶点基因主要富集于核受体活性、直接配体调控序列特异性DNA结合的转录因子活性、泛素样蛋白连接酶结合、甾体激素受体活性、类固醇结合等98个生物学过程,以及PI3K-Akt信号通路、肿瘤中的微小RNA、乙型肝炎、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、人类巨细胞病毒感染等110条信号通路。射干-麻黄活性成分可能通过抑制气道炎症反应与高反应性、调节自身免疫功能等环节发挥治疗CVA的作用。     

氢同位素重水分子D2O（X~^1A1）的结构与分析势能函数

基于群论理论和原子分子反应静力学正确判断了D2O（X~^1A1）离解极限．使用多体项展式理论方法结合同位素效应，修正Born-Oppenheimer近似下的势能函数，计算了D2O（X~^1A1）分子的二阶力常数、正则振动频率和零点能．采用密度泛函B31yp／6-311＋＋g^＊＊方法，优化出D2O（X~^1A1）平衡几何、离解能和振动频率．首次导出基态D2O（X~^1A1）分子的分析势能函数，然后根据等值势能图讨论了D＋OD和O＋D2反应的势能面静态特征．结果表明：在D＋OD→D2O通道上反应为无阈能反应，而O＋DD→D2O存在鞍点，反应具有一定的方向性，以垂直D—D键的方向最为有利．     

β-淀粉样蛋白31—35及25—35片段对海马CA1细胞兴奋性和抑制性受体通道电流的影响

在Alzheimer病（AD）出现神经变性前的早期记忆功能障碍中,可溶性β-淀粉样蛋白（Aβ）发挥了重要作用,Aβ及其活性片段对海马长时程增强（LTP）的压抑效应与其对学习记忆认知行为的伤害作用具有密切联系,但其机制仍不清楚．鉴于突触后兴奋性和抑制性受体／通道在突触传递、包括LTP的诱导中起着关键性调制作用,利用全细胞膜片钳技术观察了β-淀粉样蛋白31—35片段（Aβ31-35）和25-35片段（Aβ25-35）对急性分离的海马CA1区锥体细胞谷氨酸（Glu）受体、N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体和γ-氨基丁酸（GABA）受体通道电流的影响．结果显示：急性给予Aβ25-35或Aβ31-35可对Glu受体电流和GABA受体电流产生相反的调制作用．Aβ25-35预处理剂量依赖性地减小了Glu和NMDA引起的全细胞内向电流,相反,GABA受体电流被明显增强;小片段的Aβ31-35也选择性抑制了Glu和NMDA受体电流,增强了GABA受体电流;然而,给予Aβ31-35的反序列Aβ35-31刊预处理后,Glu,NMDA和GABA引起的受体电流均未出现明显改变．这些结果表明,Aβ25-35和Aβ31-35片段急性处理可导致海马锥体细胞NMDA受体和GABAn受体分别受到抑制和易化影响,这可能有助于解释AD早期可溶性Aβ对海马LTP及认知行为造成的伤害作用．同时,Aβ25-35和Aβ31-35片段具有的类似效应提示,31—35序列很可能是Aβ发挥神经毒性作用的活性中心．     

维生素D_3与雌性生殖

综述了维生素D_3(vitamin D_3,VD_3)的代谢和作用机制、维生素D代谢酶和维生素D受体在雌性生殖系统中的分布、VD_3与雌性生育力、VD_3与雌性激素的关系,可以为推进VD_3影响雌性生殖的分子机制和临床治疗女性生殖相关疾病的研究提供理论依据。     

大豆遗传转化研究

用苯酚-氯仿-异戌醇-RNase法从草决明、玉米、栽培大豆周89⑦-2-Al、花生、豫豆12等作物幼叶中分离提取DNA，用柱头涂抹法将DNA导入栽培大豆，导入后的当代大豆成荚率为30%～40%，其后代（D1～D4）主要在株高、生育期、叶色、抗病抗倒状性和产量等性状上出现变异，其突变率为2%～4%。以大豆89⑦-2-2Al，玉米90-1和花生为供体的DNA导入受体周So3-1，周86①-1-1等组合的后代变异株，其抗病性提高，生育期缩短5～7d，产量比受体（ck）增加10%，SOD同工酶检测其变异株均多一条供体的谐带或谱带强弱有变化。     

FHIT抑癌基因在头颈部鳞癌中的研究进展(综述)

脆性组氨酸三联体基因(FHIT)是1996年新发现的一种定位于人类染色体3p14．2上的抑癌基因，其编码的蛋白质具有ApnA水解酶的特性，可通过水解ApnA(主要是Ap3A)而阻止细胞生长信号传导途径，从而抑制细胞的生长；另有观点认为FHIT可与Ap3A等结合成FHIT底物复合物，这种复合物可能是一种信号物质，其抑癌作用可能比其水解酶作用更重要。研究表明FHIT在肿瘤的发生中起着重要的作用，现就FHIT在头颈部鳞癌中的研究进展作一综述。     

环腺苷二磷酸核糖（cADPR）类似物的合成与诱导钙释放活性的研究

Ca²⁺信号传导通路是生物体内重要的胞内信号传导途径之一。局部钙信号主要来源于细胞内钙库释放,而这些钙信号受到各种第二信使的控制和Ca²⁺通道蛋白的调节。环腺苷二磷酸核糖（cADPR）作为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD⁺）的代谢物,发现于1987年,是一种信号传导分子,它广泛存在于各种生物系统中,通过介导兰诺定( RyR) 受体调节钙动员活性。研究cADPR以及具有不同生物活性的类似物之间的构效关系是探究分子内钙释放机制的主要手段,另外,一些结构新颖的拮抗剂和激动剂可以作为研究细胞系统复杂机制的研究工具。作者概括性地介绍了cADPR结构类似物——N¹-乙氧基甲基-环肌苷-5'-二磷酸核糖（cIDPRE）和N¹-[(磷酰基-O-乙氧基)-甲基-N⁹-[(磷酰基-O-乙氧基)-甲基-次黄嘌呤-环磷酸焦酯（cIDPDE）的合成与性质。这两种类似物cIDPDE和cIDPRE可作为研究完整细胞钙信号系统的膜透性激动剂。