双丁酰环腺苷酸对人胃腺癌体外培养细胞DNA合成的影响

应用~3H-TdR光镜和电镜放射自显影观察表明,MGc80-3 细胞标记指数达31.51％,标记银粒集中于分裂间期的S期细胞核中,细胞核呈重标记状态,绝大多数标记银粒分布于细胞核常染色质区域,少数见于核孔附近的常染色质或核孔附近的细胞质中,核仁未见标记,显示细胞内 DNA合成十分活跃。但经 dBcAMP诱导后,标记指数则降至 4.35％,细胞核呈弱标记状态,电镜放射自显影则未在细胞核内见到标记银粒,表明其DNA合成受到明显抑制。这种变化是由于dBcAMP诱导胃癌细胞内cAMP水平提高而实现的,认为DNA合成抑制是导致MGc80-3细胞走向分化的一个重要原因,对于癌变细胞恶性表型逆转具有重要作用。     

自主性细小病毒非结构蛋白NS1对转化细胞的毒性及其调控DNA复制和转录的机制

自主性细小病毒具有对转化细胞专一的毒性,它的非结构蛋白ＮＳ１在其中起着重要的作用．在病毒生活周期中ＮＳ１有着多种功能,包括调控ＤＮＡ 的复制和转录．其机制包括ＮＳ１对ＤＮＡ 复制的反式抑制、对基因表达的反式抑制和对转录的反式激活     

低表达长非编码RNA MALAT1对人宫颈癌HeLa细胞体外生长和迁移的影响

设计3个针对MALAT1不同靶序列的小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA), 筛选出有效的siRNA序列, 设计并构建短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)干扰质粒, 转染到HeLa细胞中, 构建低表达MALAT1的稳定细胞株.通过细胞的生长曲线和细胞划痕实验验证降低MALAT1对HeLa细胞增殖和迁移的影响.结果显示MALAT1表达水平在HeLa细胞中得到有效地降低, 低表达MALAT1的HeLa细胞生长速度和迁移速度减小.表明MALAT1在HeLa细胞中具有调控细胞增殖和迁移的能力     

粉防己碱逆转人早幼粒白血病HL60耐药细胞对三尖杉酯碱的耐药性

无细胞毒性浓度的粉防己碱（０．５ｍｇ·Ｌ－１），明显地增强三尖杉酯碱对人早幼粒白血病ＨＬ６０耐药细胞的生长抑制作用，降低集落形成率，但对敏感ＨＬ６０细胞没有增强作用。ＤＰＨ荧光标记法测定表明，粉防己碱对细胞膜流动性没有影响；提取经药物作用后的细胞ＤＮＡ，琼脂糖凝胶电泳显示，粉防己碱增加三尖杉酯碱引起的ＨＬ６０耐药细胞ＤＮＡ降解，使细胞以编程方式死亡。结果表明：粉防己碱能逆转人早幼粒白血病ＨＬ６０耐药细胞对三尖杉酯碱的耐药性，值得临床上进一步研究。     

无机砷化合物对人血淋巴细胞分裂和DNA合成的效应

本研究指出,低浓度的三氧化二砷、亚砷酸钠及砷酸钠对植物血凝素(PHA)刺激的人外周血淋巴细胞的有丝分裂未见影响,而对分裂周期有延缓作用,对该细胞DNA合成有显著促进作用;然而,上述三种砷化合物达到一定浓度时,对该细胞分裂、细胞周期及细胞DNA合成均有显著抑制作用。砷促进DNA合成的效应有明显的个体差异。不论对细胞DNA合成的促进作用还是抑制作用,三价砷比五价砷的作用更强。     

人胎肺细胞培养液中类血小板生成素的初步研究

人正常胎肺细胞用含１０％小牛血清的ＭＥＭ培养液原代培养,后用无血清的１９９培养液继续培养．硝酸纤维膜的斑点酶联免疫印迹法测定显示所收集的无血清培养液中含有能与人重组血小板生成素单抗结合的蛋白质．免疫细胞化学检测发现培养的肺细胞与血小板生成素单抗有明显阳性反应．用小鼠骨髓乙酰胆碱酯酶阳性细胞法测定肺细胞在不同培养时间所收集的培养液促血小板生成活性的大小,结果显示收集的培养液有明显刺激活性并且其活性与肺细胞的密度有相关性．     

微丝解聚对DNA合成的影响

G_0期细胞在10％血清培养液刺激后向S期行进的早期出现微丝解聚的变化.细胞松弛素B(CB)0.5mg·L~_(-1)使微丝发生部分解聚能加强血清对DNA合成的刺激作用.但随着CB剂量的加大,微丝解聚的加强,便逐步增强对DNA合成的抑制作用.发现用5,10mg·L~(-1)的CB短时间处理G_0期细胞可强烈刺激蛋白激酶C(PKC)活性,虽使微丝暂时完全解聚,但不影响向S期的过渡及DNA的合成.促癌剂TPA(12-tetradecanoyl phorbol-13-acetate)可刺激G_0期细胞PKC活性,并能促进血清对DNA合成的刺激作用,但小剂量CB和TPA促进DNA的合成均依赖于血清的存在。     

hSOD基因在大白鼠肺上皮细胞中的表达

本文以哺乳动物细胞表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ为运载体,构建了受控于ＣＭＶ启动子的ｈＳＯＤ基因的表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ＿ＳＯＤ,用脂质体转染法转染大白鼠肺上皮细胞Ｌ２细胞后,经抗生素Ｇ４１８选择性培养,获得与细胞染色体ＤＮＡ稳定整合的ｈＳＯＤｃＤＮＡ导入细胞,经ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔｓ和ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｓ分析,结果表明,ｈＳＯＤ在细胞中得到稳定表达,同时测定细胞ＳＯＤ酶活性,ｈＳＯＤｃＤＮＡ导入细胞的ＳＯＤ酶活性是空载体导入细胞和父本细胞的约２倍,并且在选择细胞克隆之后的６０天内是持续的．     

人体胃癌DNA转化细胞诱发裸鼠肿瘤的研究

从人体胃癌组织及胃腺癌细胞株SGC7901中分别提取DNA,用来转化NIH3T3小鼠细胞。第二轮转化细胞接种裸鼠体内后产生了肿瘤。就致瘤能力和诱发癌基因的表达水平而言,来源于胃腺癌细胞株DNA的转化细胞均低于来源于胃癌组织DNA的转化细胞及其诱发的肿瘤。人体胃癌细胞在裸鼠体内长成的肿瘤细胞,染色体数目减少,转化细胞引起的肿瘤,染色体数目无明显变化。