双抗体夹心ELISA检测禽流感病毒方法的初步建立

用饱和硫酸铵初步纯化的兔抗AIV-H9高免血清中的IgG作为包被抗体,利用抗AIV-NP-7B4单抗作为ELISA的第二抗体,建立了检测禽流感病毒(AIV)抗原的双抗体夹心ELISA方法. 经方阵滴定试验测定反应的最佳工作条件为:兔抗AIV-H9高免血清IgG包被稀释度为1: 8 000(浓度为3.531 ug/mL),抗AIV-NP-7B4单抗腹水最佳使用稀释度为1: 800,酶标二抗的工作浓度为1: 4 000. 与其他禽易感病毒(NDV、IBV、EDS-76V)等均没有交叉反应. 结果表明,本方法具有很高的特异性.     

ELISA双抗体夹心法检测鸡传染性腺胃炎

为探明鸡传染性腺胃炎的主要病原种类,采用ELISA双抗体夹心法对山东省青岛、枣庄、泰安等地区采集的传染性腺胃炎的腺胃样品进行检测。结果表明,上述地区发生的传染性腺胃炎的病原体为呼肠孤病毒。     

双抗体夹心ELISA法检测海产蟹血卵涡鞭虫方法的初步建立

以针对血卵涡鞭虫的特异性单克隆抗体为捕获抗体,纯化的抗血卵涡鞭虫的兔抗血清为检测抗体,初步建立了检测血卵涡鞭虫的双抗体夹心ELISA方法.方阵滴定确定最佳反应条件:包被的单克隆抗体浓度为10μg/mL,多抗兔血清工作浓度为14.3 μg/mL,待检样品稀释度为1:800;HRP-羊抗鼠IgG按1:20 000稀释.用建立的ELISA方法对86份已知背景样品进行检测,阳性检出为97.6%,血卵涡鞭虫抗原检测的灵敏度为100 pg/mL;与蟹血淋巴细胞、假丝酵母菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌等样本均无交叉反应.结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法灵敏度高、特异性强,可用于诊断梭子蟹乳化病血卵涡鞭虫病的检测.     

猴免疫缺陷病毒(SIV)双抗原夹心ELISA诊断试剂盒的研制及应用

目的研制灵敏、特异的检测血清中猴免疫缺陷病毒(Simian Immunodeficiency Virus,SIV)的双抗原夹心ELISA(dsELISA)诊断试剂盒并进行初步应用。方法采用原核表达系统表达并纯化的人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)包膜蛋白(gp41)作为包被用抗原,建立dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂,研制ELISA诊断试剂盒,经敏感性、特异性和重复性试验考核试剂盒的质量,并与美国BIORELIANCE公司试剂盒进行比较,将结果经美国VRL验证,判断本试剂盒与美国BIORELIANCE公司试剂盒两者之间的符合率。结果该试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。4℃条件下能保存8个月,与其他血清无交叉反应,与美国BIORELIANCE公司试剂盒检测结果的符合率为96%。结论研制成功的实验猴SIV ELISA检测试剂盒可用于临床检测。     

双抗原夹心ELISA检测抗鳗弧菌抗体效价的研究

建立检测抗鳗孤菌抗体效价的双抗原夹心ELISA法,评价其可行性。采用高碘酸盐法对鳗孤菌抗原进行辣根过氧化物酶标记,并通过血清抗体效价比较双抗原夹心ELISA与微量凝集法的优越性。结果显示：标记蛋白含量为2．5mg的抗原所需HRP的最适量为0．20rag。以超声破碎后鳗弧菌离心上清为最适标记抗原,其工作浓度为12．25mg／L．并且双抗原夹心ELISA操作简易具有较高的敏感性和特异性。     

重组毕赤酵母AiiA蛋白表达量的双抗体夹心ELISA测定

利用双抗体夹心ELISA的方法,建立了能对重组毕赤酵母表达Aii A蛋白进行定量测定的方法.双抗体夹心ELISA方法建立的标准Aii A蛋白曲线显示,随着Aii A蛋白质量浓度增大,显色后A410值增大,在Aii A质量浓度为1.11~35.5μg·m L-1的范围内具有良好的线性关系.经方法学分析表明,该方法对含有Aii A蛋白的发酵样品的检测具有良好的特异性和精确度,Aii A的检测限为0.80μg·m L-1,批内差异系数和批间差异系数分别为5.22%和10.30%.测定8.86,2.22,1.11μg·m L-13个质量浓度回收率分别为104%、97.3%和102%,能够满足定量要求.     

兔抗人M-CSF特异性抗体在夹心ELISA方法检测人M-CSF中的应用

用人尿来源经纯化的 M-CSF 免疫家兔制备抗 M-CSF 物异性抗体.经 ELISA试验证明该抗体可对天然和重组人 M-CSF 进行特异性识别,与人的 GM-CSF 和 IL-3无交叉反应,并且该抗体可中和天然人 M-CSF 集落刺激活性。用该抗体与人 M-CSF 标准品进行夹心 ELISA 实验,结果证明夹心 ELISA 方法测定的标准品 M-CSF 含量与实际相一致,并且与软琼脂骨髓细胞集落形成试验检测到的活性结果相平行。     

猴B病毒BVgD-多肽ELISA检测方法的建立

目的建立猴B病毒抗体BVgD-多肽ELISA检测方法。方法以Western-blot分析猴B病毒糖蛋白D(BVgD)上的多肽抗原决定簇(BVgD-多肽)的抗原性,采用方阵滴定法,确定ELISA法的最佳实验条件。用灭活BV全病毒、HSV-1和BVgD-多肽三种抗原系统对猴血清样品进行平行检测,比较分析了三种系统的抗原性特点。并且将检测结果与美国BV抗体检测试剂盒的检测结果进行了比较。结果建立了猴B病毒抗体的BVgD-多肽ELISA法,研究结果表明本方法与BV全病毒和以HSV-1病毒为抗原的试剂盒相比,敏感性较低、特异性较好,避免了制备BV抗原对实验室要求高和HSV-1抗原引起的非特异性问题。检测结果与美国实验室BV抗体检测结果的符合率达85%。     

一种适用于教学的酶联免疫吸附试验的抗原抗体系统制备

目的:探讨设计一种教学成本低、便于教学使用、有助于培养医学生综合实验设计能力和提高实验基本操作技能的酶联免疫吸附实验抗原抗体系统.方法:以提纯的人IgG免疫家兔获取兔抗人IgG抗体,再用其包被酶标反应板,以人血清(人IgG)作抗原,用酶标记羊抗人IgG抗体结合抗原及催化底物显色反应.结果:该双抗体夹心法,底物显色反应清楚肉眼即可作出判定,非特异干扰极小.结论:我们设计的酶联免疫吸附实验-双抗体夹心法原理清晰、便于理解和掌握、教学成本较低、结果易于观察、便于教学大量使用.     

两种抗原不同方法检测猕猴B病毒抗体的初步探讨

分别以人单纯疱疹病毒１型（ＨＳＶ－１）作抗原，采用玻片免疫酶法（ＥＩＡ）和以Ｂ病毒作抗原，采用ＤＩＡｄｏｔ法检测了６０份猕猴血清中的Ｂ病毒抗体。结果ＥＩＡ法检测的阳性率为５％，ＤＩＡｄｏｔ法检测的阳性率为１０％，两者的符合率为９５％。这一结果可为猕猴生产和出口单位提供参考。     

血清抗Sm抗体ELISA检测方法的建立

目的：建立血清抗Sm抗体的ELISA检测方法。方法：应用纯化的Sm抗原,采用棋盘滴定等方法确立ELISA方法检测血清抗Sm抗体的最适实验条件。结果：建立了血清抗Sm抗体的ELISA检测方法。SLE患者血清抗Sm抗体的阳性率为29．2％,正常人和其它自身免疫病患者未查到此抗体。结论：本文建立的血清抗Sm抗体检测方法敏感性达到国外进口试剂盒的水平,且操作简便,重复性好,因此临床很有实用价值。     

柠檬黄的ELISA检测方法的建立

利用免疫学基本原理，获取抗柠檬黄的单克隆抗体，以此建立了从食品中检测柠檬黄的间接竞争ELISA．试验表明：OVA—TE最适包被浓度为1μg／mL；酶标抗体最适工作浓度为1：3000；酶标抗体的作用温度和时间分别为37℃，lh；封闭液为1％明胶；底物显色时间为15min；对柠檬黄的最低检出量为26．34ng／mL；抗体的最适稀释倍数为1：12000倍；对该方法进行交叉性试验和重复性试验，结果表明此法是一种特异、灵敏、快速的检测方法，并适合大批量样品检测．     

新冠病毒核衣壳蛋白及其在病毒感染中的作用（英文）

新型冠状病毒感染引起的新冠肺炎传播已经导致了全世界数百万人的死亡。因此,深入了解新冠病毒的生物学基础对研发控制其传播的新手段至关重要。新冠病毒的核衣壳蛋白(N蛋白)是一个重要的诊断和治疗靶点,它在病毒生命周期中具有多种重要功能。目前已有多个关于新冠病毒N蛋白的结构与功能方面的研究报道。本综述总结了这个进化上高度保守的N蛋白的最新数据,以期提供有关该蛋白的结构和多种功能特征的全面信息。     

2021年新冠病毒变异、跨种传播及疫苗和药物研究热点回眸

概括了新冠病毒主要变异毒株的分类、时空分布和流行动态,以及关键变异位点和其对病毒生物学特性的影响;阐述了2021年新冠病毒基因进化起源研究进展和新冠病毒在人和动物间跨种传播的风险;论述了2021年新冠疫苗和药物的研发和使用现状,以及不完全免疫保护形势下病毒可能的变异动向;提出了疫情防控、病毒流行监测和疫苗药物研发的相应...     

用ELISA双抗体夹心法检测人重组白细胞介素2(rHuIL-2)在酵母菌中表达的研究

采用ELISA夹心法检测人重组IL-2在酵母菌中表达产物的免疫学活性.结果表明,本法具有特异性强、简易、快速和重复性好等特点,尤其对利用工程菌制备及纯化rlL-2过程中能较快地监测出是否有该产物表达.     

人工智能助力新冠肺炎疫情防控的实践情景

 分析了人工智能助力新冠肺炎疫情防控的实践情境,主要包括疫情监测预警、医疗诊断、病毒及药物研发等。人工智能技术的应用对控制疫情传播范围、缓解诊疗压力、提升研发效率等具有显著效果。根据人工智能助力疫情防控上面临的法规伦理、数据安全、算法偏见等现实难题,提出完善法律法规、保障数据安全、加强人才培养等发展建议。     

应用单克隆抗体建立快速狂犬病毒抗原检测方法及其应用的研究

该项目运用单克隆抗体技术快速检测狂犬病毒抗原，采用狂犬疫苗作为标准抗原，免疫动物，制备出抗狂犬病毒的单克隆抗体，再将获得的多株单抗混合，增加单抗的亲合力，捕捉狂犬病毒抗原，做成酶免疫双抗体夹心法试剂。用该试剂对不同来源的狂犬病毒株和不同来源的狂犬疫苗进行检测，结果与法国巴斯德研究所生产的试剂测试结果相同，     

新冠疫情下影响住院人数的因素

为了解新冠疫情下影响住院人数的因素,通过收集2019年和2020年第一季度江苏省某三级甲等医院的呼吸科住院人数、口罩消耗量、全国疫情确诊人数和中国网等六大主流媒体关于新冠疫情报道的篇数等信息,并应用最小二乘法分析春节期间住院人数发生的变化,探讨2019年与2020年住院人数差与全国疫情确诊人数、新闻报道数和口罩消耗量的...     

科学抗疫背景下新冠病毒密切接触者集中医学观察隔离点的网格化管理探析

探索并总结网格化管理在新冠病毒奥密克戎变异株无症状感染者的密切接触者集中隔离医学观察点疫情防控中的实践应用效果。实践证明,网格化管理在奥密克戎变异株密切接触者集中隔离医学观察点疫情防控中发挥了良好的效果。