细胞核移植鼠的问世

日内瓦大学的伊尔曼斯(K. Illmensee)和美国杰克逊研究所的休伯(P. C. Hoppe)两博士首次应用细胞核移植的方法育成实验鼠的细胞核移植系(遗传性完全相同的个体).实际上,这一细胞核移植实验的消息早在1979年7月已有报道.因此,这一实验在三年前就进行了。但是,其详细实验情况,这次还是第一次被弄清楚。     

不同品系间斑马鱼的细胞核移植

以斑马鱼AB品系囊胚晚期胚胎细胞为细胞核供体,以斑马鱼长鳍品系未受精的去核卵为受体,进行不同品系间斑马鱼的细胞核移植,采用显微注射法,操作胚胎1119枚,获得克隆鱼14尾,RAPD分析显示,克隆鱼与细胞核供体鱼的DNA扩增带纹一致而与受体鱼不同,表明克隆鱼的遗传物质来源于供体细胞核,模式动物斑马鱼的细胞核移植技术的建立,有望在研究动物发育过程的基因功能、细胞核的发育潜能及核质关系等重要问题上发挥作用。     

利用体细胞核移植技术生产转基因牛

通过电穿孔的方法, 将含有新霉素抗性(Neo^r)基因和增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的双标记选择载体导入胎牛输卵管上皮细胞, 获得了转基因细胞株. 以转基因细胞为核供体, 进行了牛的体细胞核移植. 重构胚胎424枚, 其中208枚体外发育至囊胚, 囊胚发育率为49.1%. 选择第7天转基因囊胚17枚移入17头同期发情的受体牛子宫角内, 共有5头受体牛妊娠, 妊娠率为29.4%. 经过正常的体内发育, 有3头转基因克隆牛出生, 产犊率为17.6%. PCR和Southern检测结果表明, 3头转基因克隆牛的基因组中都整合有外源目标基因. 并且, 绿色荧光蛋白在转基因克隆牛的耳部皮肤组织以及从耳部皮肤组织分离出的成纤维细胞中均有表达. 上述结果显示, 通过体细胞核移植技术可以有效生产转基因牛; 所构建的双标记选择载体可以有效筛选出转基因细胞和转基因克隆胚胎, 应用于转基因克隆动物的生产, 确保所培育的克隆动物均为转基因动物.     

体细胞核移植生产绿色荧光蛋白转基因猪

体细胞核移植转基因动物制作路线是目前生产转基因家畜的最佳方法. 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)转基因猪研究可以为转基因家猪育种、人类疾病模型和人类异种器官移植研究奠定良好的基础. 本研究对脂质体转染猪胎儿成纤维细胞的技术程序进行了筛选, 以绿色荧光蛋白基因转染后的阳性细胞作为体细胞核移植的核供体, 以体外成熟卵母细胞为核受体, 构建了绿色荧光蛋白转基因克隆猪胚胎, 并对重构胚在体外和体内发育情况以及绿色荧光蛋白表达情况进行了跟踪研究. 结果显示, 采用4.0 μL/mL脂质体转染试剂, 1.6 μg/mL质粒DNA, 转染6 h可以获得最佳的转染效果, 转染效率达3.61%; GFP转基因体细胞重构胚体外囊胚发育率为10%, GFP阳性胚胎率为48%; 重构胚移植于10头受体后, 有5头妊娠, 3头受体发育到期, 共出生克隆猪6头, 其中4头为GFP阳性, 经DNA检测确认为GFP转基因猪; 转基因克隆胚胎移植出生率为1.0%, 阳性个体出生率为0.7%. 结果表明, 脂质体转染试剂可以高效转染猪胎儿成纤维细胞, 获得的阳性细胞具有支持猪全程发育的潜能. 本研究对我国体细胞克隆转基因猪的研究具有重要的参考价值.     

间期细胞核的细胞核纤维网架结构

最近2—3年内,一种新的结构从多种细胞(从原生动物四膜虫到哺乳动物鼠肝)的细胞核中分离和鉴定出来,是蛋白质性质,将它称做细胞核蛋白质基质(Nuclear protein matrix)。这种结构成分参与细胞核机能和形状的调节作用,但对它们的组织结构情况知道的还很少。我们应用界面铺浮等项技术所制备的样品,在电镜下观察到间期(乃至分裂前期)细胞核双层膜系统内面具有一层纤维网架结构,我们把它叫做细胞核纤维网架(Nuclear fiber framework),现将观察结果作一简要报道。     

体细胞核移植牛肺脏中H19和Xist基因的DNA甲基化状态

在体细胞核移植中, 体细胞的供体核要经过表观遗传修饰的重编程才能获得发育的全能性, 目前认为不完全的表观重编程是导致克隆效率低的主要原因. DNA甲基化是基因组主要的表观遗传修饰方式, 是调节基因组功能的重要手段. 为了探求核移植过程中DNA甲基化的表观重编程是否充分, 利用亚硫酸氢盐测序法分析了印记基因H19和Xist在出生48 h内死亡的体细胞核移植牛和正常对照牛肺脏中的DNA甲基化状态. 结果发现, 体细胞核移植牛中H19基因甲基化程度较低, 与正常对照组相比差异显著(P < 0.05), 并且 9C3个体有3个CpG (第1, 2, 3位)表现出完全非甲基化; Xist基因甲基化程度在体细胞核移植牛和正常对照牛中都较高, 且没有显著差异.     

山羊(Capra hircus)胚胎细胞经继代细胞核移植后其发育能力的研究

细胞核移植是研究细胞核和细胞质相互关系问题的最理想的方法之一.继代细胞核移植或称再克隆(recloning)可以了解同一胚胎分裂球或细胞经继代细胞核移植之后,它们全能性的功能是否有变化,如有变化,在第几代开始有变化,如没变化则能稳定几代.如果继代细胞核移植可行的话,将会成为获得大量基因型等同的无性繁殖系动物的理想方法.本文主要研究山羊胚胎的分裂球或细胞经继代核移植后仍具有全能性发育的可能性.本实验结果首先在国内外获得了一批继代核移植后的小羊羔.为我国优质家畜克隆动物的繁育奠定了理论和技术的基础.     

从细胞核的全能性谈起

分化之谜大家知道,受精卵起初只是一个细胞,可是当它经过无数次分裂,形成动物个体的时候,竟会分化出许许多多的细胞类型。有的成为长长的神经细胞,有的成为圆圆的血红细胞,它们之间不论在结构、组成,还是在功能等方面都迥然有异。这种现象虽已习以为常,丝毫没有稀奇之处,可是解释起来却困难重重,令人绞尽脑汁。现在不妨让我们运用分子生物学知识,对它作一番追究:生物性状差异的基础是化学物质的差异;化学物质有些是蛋白质,有些是由酶支配下形成的,而酶本身也是蛋白质;合成蛋白质需要核糖核酸做模板;去氧核糖核酸决定了核糖核酸的特异性;去氧…     

鱼类的体温

一提到鱼类,常有人误认为它们和蛙、蛇一样,同属于冷血动物,其体温和周围的水温完全相同。但最近陆续发现了体温较高的鱼类,故“冷血动物”这种定论已不能通用了。那么,鱼类的体温如何测定呢?一般和测量青蛙或老鼠的体温一样,将温度计插入肛门测量,或利用热电偶(thermoc-ouple)的特殊装置来测量体温。鱼类体热比陆上动物更快速流失不限于鱼类,就是—般动物的体温之产生,是藉由分解食物,再将所获得的能量变成氧化热而来,而体温流失之主因乃是自己向周遭的环境传导,造成体热逃逸。特别是水的传导度平均为0.0014,比空气高20倍以上,因此,栖息于…     

鱼类的体温

一提到鱼类,常有人误认为它们和蛙、蛇一样,同属于冷血动物,其体温和周围的水温完全相同.但最近陆续发现了体温较高的鱼类,故"冷血动物"这种定论已不能通用了.那么,鱼类的体温如何测定呢?一般和测量青蛙或老鼠的体温一样,将温度计插入肛门测量,或利用热电偶(thermoc-ouple)的特殊装置来测量体温.     

鱼类的情感世界

一个人将身体俯向水面,在水上留下身影,一群小鱼连忙躲避到一边去了.可是另一群小鱼却向藏在不远处的一条鲈鱼游了过去,鲈鱼张开大口,小鱼便争先恐后地往口中钻去.     

鱼类的父爱

恋爱与婚姻不仅人类有,动物界也有。我国古代民间常用鹅作为结婚的聘礼,祝愿夫妻白头偕老。这是因为鹅在确定了自己"对象"后十分专一。人们熟悉的燕子,它们"夫妇"间的爱情也十     

鱼类的情感世界

一个人将身体俯向水面,在水上留下身影,一群小鱼连忙躲避到一边去了.可是另一群小鱼却向藏在不远处的一条鲈鱼游了过去,鲈鱼张开大口,小鱼便争先恐后地往口中钻去.     

鱼类的父爱

我国古代民间常用鹅作为结婚的聘礼,祝愿夫妻白头偕老,这是因为鹅在确定了自己的“对象”后十分专一。海洋中的一些鱼类,对婚姻爱情也十分忠实,且在生儿养女过程,鱼类的父爱表现更加突出,现列举数例介绍如下: 鱼的慈父——刺鱼 雄刺鱼是鱼类中的慈父,它体格强壮,性情温柔。每年一到繁殖的季节,雄刺鱼便格外地忙碌。它在海边或河岸浅水的水草间选择一个水流较缓和平稳的场所,就赶紧地筑起巢穴来,迎接雌刺鱼安息产卵。在卵孵化期间,雄刺鱼从一个殷勤忠实的伴侣变成了慈爱的父亲。它每时每刻左右不离地在巢穴周围巡视,守护着它的小宝贝们,并随时清扫或用新材料加固巢穴。 平时,雄刺鱼频频扇动胸鳍,使巢穴内部不断地增加新鲜的水流,让卵在孵化过程中得到充分的氧气。待卵孵化成小鱼了,雄刺鱼就把巢穴的上部立即拆掉,同时又进一步加     

鱼类趣事

鱼当"医生"在土耳其坎加尔温泉疗养区的水池中,有一些能帮人治疗牛皮癣等皮肤病的鱼类。每逢病人赤身裸体下到水中,它们就会立刻围拢过来,"轻吻"患者的疮疤,清除伤口上和病区表面的有害物质,使病人的疮疤在毫无痛感之下痊愈。     

细胞核迁移相关蛋白的研究进展

细胞核迁移是一种细胞核向细胞中特定位点移动的非随机现象, 对于生长、分裂以及发育等正常细胞活动至关重要. 大量研究表明, 这一过程涉及细胞骨架、分子马达和其他相关蛋白. 虽然在高等生物尤其是高等植物中的研究才刚刚起步,但是在酵母和丝状真菌中对于这些相关蛋白的研究已经很深入.     

鱼类趣事

鱼当"医生" 在土耳其坎加尔温泉疗养区的水池中,有一些能帮人治疗牛皮癣等皮肤病的鱼类.每逢病人赤身裸体下到水中,它们就会立刻围拢过来,"轻吻"患者的疮疤,清除伤口上和病区表面的有害物质,使病人的疮疤在毫无痛感之下痊愈.     

鱼类的电武器

在第一次世界大战期间,人类发明了声纳和雷达等先进探测装置,进入20世纪后,人类又发明了各种各样的电子武器,充分展示了人类的聪明才智。可是,近来科学家发现,远在人类出现之前,许多鱼类早已开始利用天然声纳和雷达来发现、跟踪以及定位猎物了。鱼类在使用“电武器”方面堪称人类的“老师”。     

会变性的鱼类

自然界中有些动物会雌雄变性,其机制是动物学家的研究对象,对此已提出了种种理论假说。本期封底是两种会变性的鱼类。上图是生活在红海岸边珊瑚礁中的一种小鱼,称为red anthia,这种鱼群的雌