余甘子果超氧化物歧化酶提取工艺优化及抗氧化性研究

采用超声波法,以余甘子果为原料、SOD酶比活力为指标,考查液料比、磷酸缓冲液pH、超声时间、提取温度对余甘子SOD提取率的影响,并根据单因素试验结果及响应面Box-Behnken中心拟合原理,以SOD酶比活力为响应值,进行4因素3水平试验设计,建立响应面优化超声波法提取余甘子SOD工艺的多元回归方程;同时采用DPPH自由基和羟基自由基清除法对提取出的余甘子SOD粗酶液进行了抗氧化性研究.实验结果表明：响应面优化超声波法提取余甘子SOD最佳工艺为液料比5∶1 (mL/g)、磷酸缓冲液pH值7.8、超声时间19 min、温度50℃,在此工艺下进行3次平行验证得到SOD酶比活值为(557.22±9.36)U/g(FW)·h,与模型预测值573.36 U/g(FW)·h误差为2.90%,误差值小于5%说明模型可靠性高;余甘子的SOD粗酶液对DPPH自由基清除率最高为97.41%,羟基自由基的清除率最高也可达到93.36%,且抗氧化性优于同等浓度的VC;优化后的余甘子中SOD的提取工艺稳定可靠,且SOD粗酶液具有良好的抗氧化活性.     

超声-微波协同法从马血中提取SOD的工艺研究

文章研究利用超声-微波协同法提取马血中SOD的最佳工艺。采用响应面法优化马血SOD超声-微波协同提取工艺条件,并采用正交分析法得到最佳化提取工艺参数。确定马血中SOD的最优提取工艺条件为:超声波功率为50W时,微波功率为500W、微波时间为8分钟、微波温度为40℃,在此条件下SOD比活力可达1036.59U/mg。该法简便快速,与传统法相比比活力提高了1.2倍。     

铜藻膳食纤维提取条件的研究

以铜藻为原料,采用化学与酶解结合的方法,经酶解、碱提取、沉淀、漂白、活化、烘干等工艺处理提取膳食纤维,研究了酶解、碱提取、漂白工艺条件对铜藻膳食纤维提取的影响,用正交设计法筛选出铜藻膳食纤维提取的最优工艺条件。由正交试验结果分析可知,酶解工艺的最优条件为:纤维素酶用量90U/g、木瓜蛋白酶用量5000U/g、酶解时间1.5h;碱提取工艺的最优条件为:20倍的200g/LNa2CO3溶液、处理时间2h、处理温度85℃;漂白工艺的最优条件为:3倍的0.3%Na-ClO溶液、pH7、漂白时间40min。结果表明:在该工艺条件下提取的铜藻膳食纤维的产率为35.4%,颜色较白,总膳食纤维干基含量为78.6%,膨胀力为85.8mL/g,持水力为4220.0%,蛋白质含量0.45%,总灰分含量为18.3%。该方法所提取的铜藻膳食纤维的产率较高。     

黔产山银花总黄酮提取工艺的优化及其含量测定

利用正交试验并结合紫外分光光度法对黔产山银花中生物活性成分黄酮的提取工艺进行优化,并以此考量不同发育时期黔产山银花及其叶片中总黄酮含量。试验结果表明:黔产山银花总黄酮的优化提取工艺为浸提时间20 min,浸提温度80℃,料液比1∶40(W/V,乙醇浓度为70%);在此条件下,幼蕾期花中总黄酮含量最高为43.669 mg/g(鲜重),其次为青色期花30.575 mg/g(鲜重)和成熟叶29.438 mg/g(鲜重),大白期花和幼叶中总黄酮含量相近,分别为22.792 mg/g(鲜重)和23.059 mg/g(鲜重),而银花期花中总黄酮含量最低,为12.161 mg/g(鲜重)。结论:总黄酮含量随花蕾发育呈线性降低;黔产山银花叶片和花有较为可观的黄酮含量,均可有效提高山银花资源的利用率。     

树莓叶片中主要抗氧化物质提取工艺优化研究

以澳洲红树莓叶片为研究材料,利用超声辅助乙醇提取法同时考察总黄酮含量、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)总活力和总蛋白含量3个指标.基于单因素实验结果,对乙醇质量分数、料液比、超声时间采用Box-Behnken实验设计和响应面法(RSM)优化提取条件,从而获得最佳的混合提取工艺.再用此工艺比较不同品种树莓间叶片中黄酮类化合物、SOD总活性和总蛋白含量的高低.实验获得的最佳提取工艺参数为:乙醇质量分数60%、料液比1∶40 g/mL,超声时间30 min,验证提取得到:产物总黄酮含量51.74 mg/g、SOD总活力为5 828.96 U、总蛋白质量分数为17.20 mg/g,实验结果与模型预测值接近,表明最佳工艺条件可行.同时将最佳提取工艺用于黑红莓、托拉蜜、诺娃(有刺)、诺娃、海尔特兹、来味里、马拉哈丁以及秋来斯和澳洲红共9个树莓品种,结果显示黑红莓、诺娃(有刺)和诺娃的叶片总黄酮含量、SOD总活力和总蛋白含量较高,海尔特兹和来味里较低,这与总抗氧化活性测定的结果相符.这些结果为树莓叶片醇提物的研究和引种选育工作提供数据支持.     

盐地碱蓬超氧化物歧化酶的提取及抗氧化活性的研究

以盐地碱蓬为原料提取超氧化物歧化酶(SOD),采用邻苯三酚自氧化法对其酶活进行测定。实验结果表明:10g盐地碱蓬中提取的SOD,经硫酸铵分级沉淀、氯仿/乙醇沉淀、丙酮沉淀及热处理后,酶活分别为427.035U/mg、648.6736U/mg和1181.856U/mg。     

响应面法优化白背毛木耳子实体多糖的酶法提取工艺

应用响应面法优化酶法提取白背毛木耳子实体多糖的工艺条件。使用纤维素酶辅助进行白背毛木耳子实体多糖的提取,在单因素试验的基础上通过响应面试验设计构建了模型并确定酶用量、pH值、提取温度、提取时间等4个主要影响因素的最佳工艺参数。结果表明,最佳的工艺条件为:纤维素酶用量3 774 U/g、pH为4.9、提取温度50.2℃、提取时间135 min,在此条件下白背毛木耳子实体多糖的提取率为15.47%,与模型预测值15.52%的相对误差仅为0.323%。     

酶法替代碱法提取琼脂生产技术开发

为了减少琼脂提取过程中的碱用量,开发琼脂的绿色清洁生产工艺,以凝胶强度为考察指标,通过单因素试验对酶法替代碱法提取琼脂的工艺进行了优化。结果表明,酶法辅助琼脂提取工艺最优条件为:碱质量分数3%,处理时间2.5 h,处理温度45℃,pH值7.0,加酶量4 U/mL;复合酶法工艺最佳提取条件为:酶处理温度50℃,处理时间2 h,纤维素酶单位活力14 U/mL,琼脂硫酸酯酶单位活力26.6 U/mL,料水比(m/V)为1∶18。在此基础上,分别开展了酶法辅助和复合酶法2种工艺的小试优化结果的验证与200 L放大试验。其中,小试工艺验证结果表明,酶法辅助和复合酶法2种提取工艺下,琼脂的凝胶强度分别为831.9 g/cm~2和377.2 g/cm~2,得率分别为18.9%和18.3%;200 L中试放大试验结果显示,2种工艺琼脂的凝胶强度分别为1001.3 g/cm~2和369.6 g/cm~2。说明,2种工艺均具有良好的稳定性和重复性。     

木瓜SOD的提取及其活性测定方法的优化

目的 建立能准确测定木瓜超氧化物岐化酶(SOD)活性的测定方法。方法 采用单因素试验分析法,通过探究邻苯三酚自氧化反应体系的最大吸收波长、测定时间段、缓冲液pH值、邻苯三酚浓度和反应温度对自氧化速率的影响,建立了测定木瓜SOD活性的邻苯三酚自氧化法最佳应用体系;通过建立的木瓜SOD活性检测方法优化木瓜SOD提取条件。结果 邻苯三酚自氧化法最佳测定条件为:检测波长319nm,测定时间范围3.5min,缓冲液pH8.20,反应温度25℃,邻苯三酚浓度4.5mmol/L。木瓜SOD最佳提取工艺为:pH6.8的磷酸盐缓冲液、超声功率600W、超声时间20min浸提木瓜SOD,丙酮分级沉淀法纯化木瓜中的SOD,最终所得SOD用邻苯三酚自氧化法测定活性为529.72U/mg。结论 建立了能准确测定木瓜SOD活性的检测方法,并筛选得到木瓜最佳SOD提取条件。     

Box-Benhnken设计优化长萼堇菜总黄酮提取工艺

目的:确定长萼堇菜总黄酮超声辅助提取较佳工艺条件.方法:在单因素实验基础上,选择料液比、乙醇浓度、超声时间为考察因素,以长萼堇菜总黄酮提取量为指标,采用Box-Benhnken设计优化其提取条件.结果:长萼堇菜总黄酮较佳提取工艺为:超声时间16 min、料液比1︰21(g/mL)、乙醇浓度81%.在此条件下,通过模拟得到的二次回归方程预测模型,预测的总黄酮得率为21.39 mg/g,实测值为21.21 mg/g,预测值与实测值符合良好.结论:采用BoxBenhnken设计法分析结果可靠,得到了长萼堇菜总黄酮超声辅助提取的较佳工艺条件.     

微波与超声波提取绞股蓝总皂甙比较研究

以绞股蓝全草为原料,采用微波和超声波对绞股蓝总皂甙提取进行了对比研究,两种方法分别采用单因素实验及正交试验,探讨了优化提取条件和参数.结果表明:微波提取的优化工艺参数,料液比为1g:25mL,微波处理时间为11min,微波功率为400W,总皂甙提取率为7.59%;超声波提取的优化工艺参数,料液比为1g:25mL,提取温度为70℃,超声波处理时间为20min,超声波功率为400W,总皂甙提取率为8.01%.     

多花胡枝子对干旱胁迫的生理响应初步研究

实验采用聚乙二醇6000(PEG6000)在室内模拟干旱条件,研究不同程度干旱胁迫对多花胡枝子相对含水量、相对电导率、丙二醛(MDA)、叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力和脯氨酸含量的影响,旨在探求其在沙质条件下的生存能力.结果表明:随着干旱胁迫的加强,电导率和丙二醛(MDA)明显增加,而叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和叶片相对含水量均呈显著下降趋势.以30%PEG6000处理对多花胡枝子的伤害最大.在胁迫处理12h,30%浓度处理的植株电导率高至(50.7%)比对照组高13.4%;SOD活性最低为100.4 U/g;在胁迫处理24h时,10%浓度处理的植株脯氨酸含量高达1 024 Ug/g,此后逐渐降低;在处理48h时,30%浓度处理的植株MDA含量为17.58 nmol/g,高于其他胁迫处理.在PEG6000处理过程中,处理0~12h为植株的抗性阶段,处理12~48h为植株的耗尽阶段.可见,在干旱胁迫下,多花胡枝子可以通过改变体内物质含量来提高抗性,渡过逆境.     

转人Cu,Zn-SOD基因马铃薯的研究

采用RT—PCR技术从人肝总RNA中分离扩增了490bp的人铜锌超氧化物歧化酶(hCM，Zn—SOD)基因的cDNA序列，进行了序列测定，结果和文献报道的一致；构建了CaMv35S启动子驱动hCu，Zn—SOD基因的植物表达载体PBICuSOD；用三亲交配法将重组质粒PBICuSOD转化到农杆菌LBA4404，转化马铃薯得到转基因植株。PCR和Southern—blot分析证明，hCu，Zn—SOD基因巳整合到马铃薯基因组中。Western blot分析表明，hCu，Zn—SOD基因在转基因马铃薯植株中得到表达。用NBT光还原法测定转基因马铃薯植株中的SOD酶活力，叶的总酶活为1066．6U／g(湿重，下同)，块茎的总酶活为10llU／g。     

中心组合设计优化苦菜多酚类物质的提取工艺

对苦菜多酚提取工艺进行优化研究.用单因素试验对提取溶剂进行筛选,结果表明乙醇和一定浓度的盐酸组成的复合体系是理想的提取溶剂,用析因试验、最速上升试验、中心组合实验对提取条件进一步优化.结果发现乙醇浓度、提取温度、提取溶剂的pH、料液比都对苦菜多酚提取产生一定的影响,其中pH和乙醇浓度的影响最为显著.最佳的多酚类化合物提取条件为料液比1∶30,提取溶剂为65%乙醇,其酸度为0.78 mol/L,提取温度60℃,此时苦菜多酚的得率为19.12 mg/g.     

小白菜中超氧化物歧化酶的提取及稳定性

对从小白菜中提取超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）进行了探索性实验。用盐析法提取粗品，然后经过透析，层析后制取了具有较高活性的ＳＯＤ，并对其在温度、时间、ｐＨ、紫外光条件下，稳定性的影响上进行研究。     

纽荷尔橙内皮中SOD的纯化及部分性质研究

利用有机溶剂分级沉淀法从纽荷尔橙皮内层中分离出超氧化物歧化酶(SOD),研究了分离纯化的最佳工艺条件,并对其性质进行了探讨.结果表明,当纽荷尔橙内皮(g)与磷酸缓冲液(mL)之比为13,磷酸缓冲液pH值为7.8,提取时间为20min,氯仿-乙醇混合物量为提取液的0.25倍,丙酮量为粗酶液的1.5倍时,分离效果最佳.该SOD酶型是Mn-SOD,30℃-60℃,pH值4-8,活力稳定.研究结果为SOD提供了新酶源.     

蛹虫草菌丝体胞内多糖提取方法的研究

文中以提取温度、料液比、提取时间和提取次数为因素,采用正交试验研究热水浸提的最佳提取条件,并以此为基础研究热水浸提、冷热交替浸提、盐酸溶液浸提和氢氧化钠溶液浸提对蛹虫草菌丝体胞内多糖提取率的影响. 结果表明:热水浸提的最佳提取工艺为:m(料): V(液) = 1: 40,提取温度75 ℃,提取时间2.5 h,提取2次,多糖的提取率为14.74%,其中料液比为影响多糖提取率主要的因素,其他因素依次是提取温度、提取时间和提取次数. 按照此工艺,热冷交替浸提(热水浸提2.5 h + 冷水浸提48 h)多糖提取率最高,为15.92%. 55 g.L-1的氢氧化钠溶液浸提多糖的提取率为6.31%;25 gL-1的盐酸溶液浸提多糖的提取率为9.93%. 因此,冷热交替浸提对蛹虫草菌丝体胞内多糖提取率最高,其次是热水浸提、盐酸溶液浸提和氢氧化钠溶液浸提.     

忍冬藤可溶性膳食纤维提取及性能分析

探讨纤维素酶法提取忍冬藤中水溶性纤维素的最佳工艺并对其性能进行分析。在单因素试验基础上,采用正交试验对提取工艺进行优化得到最佳工艺条件组合为p H=4.8,温度45℃,料液比1:12(g/m L),纤维素酶体积分数1.2%,提取时间6 h,浸提3次。在此条件下,水溶性膳食纤维的提取率为3.57%,所提取的水溶性纤维素持水力为6.1 g/g,膨胀力为5.3 m L/g,持油力为4.53 g/g,阳离子交换能力为0.58 mmol/g,DPPH自由基最大清除率为80.13%,具有较好的理化性能。研究认为,纤维素酶解法可用于提取忍冬藤中的水溶性膳食纤维。     

微波辅助萃取腺苷技术的研究

研究了微波提取蛹虫草固体培养物中腺苷的条件.用HPLC法测定提取液中的腺苷含量,通过正交试验,确定了微波提取腺苷的最佳条件.结果表明,在提取液用量10 mL,固液比1∶200,微波强度为中火,处理时间2 min,样品中腺苷的测定值达0.50 mg/g时,微波提取时间仅为超声波提取的1/45,且提取率高于超声波提取.