植物体细胞胚胎发生机理的研究进展

介绍了植物体细胞胚胎发生技术的产生历史及国内外的研究进展;从细胞学、生物化学和分子生物学等方面综述了体细胞胚胎发生机理的研究现状;分析了体胚再生植株的遗传稳定性以及体胚系统作为遗传转化系统的重要应用价值和最新研究成果;同时对植物体胚发生研究中试验设计的重要性作了述评。     

泡桐体细胞胚胎发生过程中过氧化物酶的变化

以毛泡桐、兰考泡桐和白花泡桐的叶片为外植体进行体细胞胚胎发生的诱导,探讨体胚发生过程中过氧化物酶同工酶的变化.结果表明,在兰考泡桐、白花泡桐和毛泡桐叶片体细胞胚胎发生过程中,均有4种过氧化物同工酶稳定出现在体胚发生的不同时期,反映出在泡桐体细胞胚胎发生过程中对这些酶的需求是稳定的.这些稳定出现的酶可能是维持细胞代谢的一些基因表达的产物.而其它种类的同工酶在体细胞胚发生的不同阶段出现或消失,有可能作为体细胞胚胎发生的标志酶.     

花卉体细胞胚胎发生研究进展

综述花卉体细胞胚胎发生途径、体细胞胚胎发生过程的生理生化变化及其影响因素、体细胞胚胎发生与胚性基因的表达和花卉体细胞无性系变异等方面的研究进展,植物体细胞胚胎发生研究在基因工程体细胞融合、细胞突变体诱导、人工种子、杂种合子胚的挽救、种质保存、苗木快速繁殖等诸多方面有着广阔的应用前景,也是遗传学、转基因工程体系、生理生化、植物发育过程的基因表达和调控、功能基因组研究等方面一个必不可少的新兴研究系统.     

诸葛菜外植体直接体细胞胚胎发生的研究

离体条件下诱导了诸葛菜和毛果诸葛菜的子叶片、真叶片、下胚轴、叶柄外植体直接发生体细胞胚状体，并长成小植株。在ＭＳ、改良ＭＳ附加ＢＡ及附加ＢＡ与ＧＡ３的几种不同培养基上，各组织切段发生胚状体的频率均为１００％。ＢＡ能强烈地诱导胚状体的发生；ＧＡ３对胚状体的发生并不是必需的，只对胚状体长成小植株有利。硝酸铵能促进胚状体的发生，但铵离子并不是必不可少的。     

落叶松体细胞胚胎发生的研究进展

落叶松体细胞胚胎发生属于间接体细胞胚胎发生途径，主要包括三个步骤：胚性培养物诱导、继代与增殖及其体胚成熟和萌发。供体植物的基因型及其培养基的成分等是影响落叶松体细胞胚胎发生的重要因素。体细胞胚胎发生是一种有效的大规模克隆繁殖方法，并且在许多有重要经济价值的树种中都取得了很大进展，目前已从30多种松柏类植物诱导出体细胞胚。落叶松体细胞胚胎发生的应用大多数集中于胚性培养物的超低温保存、原生质体培养、转基因等技术，并对落叶松体细胞胚胎发生的研究趋势作了展望。     

植物体细胞胚胎发生的理论研究

把体细胞胚胎发生现象看作开展生物学理论研究的良好模型，介绍了运用细胞生物学和分子生物学的原理与技术进行研究的成果，特别是体细胞胚胎发生相关基因的研究进展。     

人参体细胞胚胎发生过程中的生理变化

采用考马斯亮蓝G-250染色法、蒽酮法、愈创木酚法等方法,研究了人参体细胞胚胎发生中可溶性蛋白、多糖及淀粉含量和POD及PPo活性的变化,并对体细胞胚发生的不同时期培养物内源LAA和ABA含量进行了测定.结果表明,多糖和淀粉含量在早期胚时较低,可溶性蛋白含量、POD及PPO活性和IAA含量在早期胚时最高;在成熟胚时期,ABA含量最高,且ABA与IAA的比值在成熟胚时也较高.说明多糖和淀粉参与调节胚性细胞的分化和发育过程,POD及PPO和可溶性蛋白与早期胚形成密切相关;ABA与IAA比值高有利于体细胞胚的发育成熟.     

楸树体细胞胚胎发生的研究

以楸树近成熟种子培养无菌苗,以无菌苗子叶和下胚轴为外植体进行体细胞胚胎发生研究,观察了体细胞胚胎的发育过程,分析了不同生长调节物质对楸树体胚发生的影响。结果表明：各培养基均能诱导出愈伤组织;1/2MS+0.01 mg/L NAA+1.00 mg/L 6-BA可调整愈伤至胚性愈伤,是体细胞胚胎诱导频率最高的培养基;带少量愈伤的体胚可在1/2MS0和1/2MS+1.00 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA的培养基上增殖,且增殖系数较大。     

早实核桃品种间体细胞胚胎诱导差异和发生研究

早实核桃元丰和香玲的幼胚在7月3号到8月6号体细胞胚胎发生率没有明显差异,最佳的激素组合是KT2mg·L-1+BAP1mg·L-1+IBA0.01mg·L-1,体胚的诱导发生率高达89%.香玲核桃果实发育后期体细胞胚胎的诱导发生率显著高于元丰.1/2DKW+1/2MS培养基加上45g·L-1的蔗糖是最好次生胚增殖培养基.     

Molecular verification of the integration of Tripsacum dactyloides DNA into wheat genome through wide hybridization

RAPD and RFLP analyses of double haploid lines which derived from hybridization between hexaploid wheat (Triticum aestivum L.2n=42) and eastern gamagrass (Tripsacum dactyloides L.2n=4x=72) are reported.Two of the 340 Operon primers have been screened,which stably amplified Tripsacum dactyloides (male parent) specific bands in the double haploid lines.These results confirm the fact that Tripsacum dactyloides DNA has been integrated into wheat genome by sexual hybridization at molecular level.This idea has been further testified by RFLP analysis.Application and potentials of transferring Tripsacum dactyloides DNA into wheat genome by sexual hybridization in wheat breeding are discussed.     

Molecular verification of the integration ofTripsacum dactyloides DNA into wheat genome through wide hybridization

RAPD and RFLP analyses of double haploid lines which derived from hybridization between hexaploid wheat (Triticum aestivum L. 2n=42) and eastern gamagrass (Tripsacum dactyloides L. 2n=4x=72) are reported. Two of the 340 Operon primers have been screened, which stably amplified 处留情 (male parent) specific bands in the double haploid lines. These results confirm the fact that Tripsacum dactyloides DNA has been integrated into wheat genome by sexual hybridization at molecular level. This idea has been further testified by RFLP analysis. Application and potentials of transferring Tripsacum dactyloides DNA into wheat genome by sexual hybridization in wheat breeding are discussed.     

泡桐叶片DNA提取

以兰考泡桐组织培养苗叶片为材料,分别采用CTAB-Ⅰ、CTAB-Ⅱ、SDS-Ⅰ、SDS-Ⅱ四种方法提取叶片DNA,并对不同提取结果进行紫外分光光度、电泳、酶切、RAPD等方法的鉴定。结果表明,用四种方法提取的泡桐叶片DNA得率约为3.5-5.2μg/10mg,A260/A280约为1.7-1.8,A260/A230在2.0以上,分子量在23Kb以上,能够被EcoRⅠ、HindⅢ酶切,能够进行RAPD分析。综合考虑得率、纯度、质量等因素,以SDS-Ⅰ法为最佳方案。     

克隆植物珠芽蓼基因组DNA的提取及RAPD鉴定

高原植物体内所含有的酚类、多糖、色素等次生代谢物质严重影响提取其基因组DNA的得率和纯度,是导致后续分子操作失败的主要原因.运用一种新改进的CTAB法对变色硅胶保存的高原植物珠芽蓼(Polygonumviviparum)叶片进行基因组DNA的提取,采取常温下沉淀DNA,增加洗涤沉淀的体积分数为70%乙醇用量和洗涤时间等措施,有效地去除了酚类、多糖、色素等物质的干扰,减少了褐化现象的发生.样品检测所得DNA片段均在48 kb左右,电泳谱带呈线状,无拖尾现象;紫外分光光度计检测,A260nm/A280nm值在1.7~1.9之间.RAPD扩增结果表明,此方法提取的DNA无论在质量和纯度上都较理想.     

胡卢巴基因组DNA提取及RAPD引物筛选

以胡卢巴叶片为材料,利用改良CTAB法提取基因组DNA并进行质量检测和含量测定,在优化RAPD反应体系的基础上,对100条RAPD随机引物进行了筛选.结果表明,采用改良CTAB法能从胡卢巴叶片中提取到高质量的DNA,可以用于RAPD分析;从100条随机引物中筛选出了16条显示胡卢巴遗传差异的多态性引物,为胡卢巴遗传多样性研究提供分子依据.     

菊叶香藜（Chenopodium foetidum）基因组DNA的提取方法研究

文章通过传统CTAB法、改良CTAB法、SDS法、高盐低pH法和试剂盒法等5种方法,对菊叶香藜进行基因组DNA提取,旨在筛选一种菊叶香藜基因组DNA的适宜提取方法。同时用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳对5种方法所提DNA进行检测,并对改良CTAB法提取的DNA进行RAPD-PCR扩增检测。结果表明：改良CTAB法提取速度较快,便于操作,提取的DNA质量较好,进行的RAPD-PCR扩增条带清晰,能满足分子标记的要求。因此,改良CTAB法为菊叶香藜基因组DNA可靠并合适的提取方法。     

不同染色剂对荔枝胚性愈伤组织酯酶同工酶显色的影响

以α-萘酯醋酸(α-NA)和β-萘酯醋酸(β-NA)为废物,以坚牢兰B盐和坚牢兰RR盐为偶联剂,用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳技术研究了荔枝离体培养物的电泳显色。结果为:少数酶带只能用α-NA显色;绝大多数酶带可用α-NA或β-NA显色;用混合底物同时显色,较一些单独用α-NA或β-NA能显色的酶带的相对染色强度降低;用坚牢兰B盐与坚牢兰RR盐为偶联剂相比,某些酶带的相对染色强度增加。表明,各电泳酶带染色强度的相对强弱不一定反应各酶本身活性的相对高低。     

非损伤性取样的蚕类DNA提取及检测

对家蚕和蓖麻蚕的蚕蜕和蛾翅分别采用SDS裂解法和动物组织基因组试剂盒提取法提取DNS，并与常规方法以蚕蛹提取的DNA一起进行RAPD扩增图谱比较、分析，结果表明用非损伤性方法提取的DNA的RAPD图谱和常规方法提取的DNA的RAPD图谱基本一致。     

一种节肢动物模板DNA的快速提取方法

简要介绍一种高效、快速提取节肢动物模板DNA的方法,提取的DNA无污染物产生,完全能满足 RAPD等研究的需要.     

蝴蝶干标本DNA的提取及RAPD分析

通过对3种基因组DNA提取方法的实验比较,提出了适合蝴蝶干标本基因组DNA的提取方法,并成功地应用于RAPD-PCR的扩增,表明该方法可行．