日本血吸虫卵卵壳超微结构的研究——Ⅱ.应用扫描电镜对卵壳超微结构的观察

作者等(1981)于前文报告通过透射电镜查见日本血吸虫卵卵壳外侧具有微刺,并首次发现卵壳层中存在微孔和微管等结构。本文则报告应用描扫电镜对日本血吸虫卵卵壳表面形貌和结构进行观察的结果。     

利用基因表达谱芯片研究东方田鼠和小鼠感染日本血吸虫前后基因的差异性表达

利用大、小鼠基因表达谱芯片分别研究了Balb/c小鼠感染日本血吸虫7d时肺组织、东方田鼠感染日本血吸虫7d时肺组织、12d时的肺和肝组织基因差异表达方式.结果表明,小鼠感染日本血吸虫7d时肺丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor) 基因表达上调,同时没有免疫相关基因的表达变化;与之相反,东方田鼠感染日本血吸虫7d 时肺丝氨酸蛋白酶抑制剂基因没有表达变化,非特异性免疫相关基因,如溶菌酶(Lysozym e) 和各类组织蛋白酶(Cathepsin)基因表达上调,而且肺内特异性免疫相关基因如CD74、MHC Ⅱ和MHC Ⅰ等表达上调.这一现象得到东方田鼠感染日本血吸虫12d时肺和肝中特异性免疫和非特异性免疫相关基因的上调表达的进一步证实.而且,东方田鼠感染日本血吸虫12d时肺中丝氨酸蛋白酶抑制剂基因表达下调,肝组织中胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor 1,IGF 1)基因表达下调.提示日本血吸虫适宜性宿主小鼠和非适宜性宿主东方田鼠感染日本血吸虫前后两者有相反的基因表达方式.东方田鼠抗日本血吸虫机制可能包括免疫防御机制和阻止虫体获得宿主源促生长发育物质机制.     

丹顶鹤卵壳孵化前后超微结构与元素含量研究

为比较丹顶鹤卵壳孵化前后超微结构与元素质量浓度差异性，利用扫描电子显微镜观察卵壳超微结构，采用电感偶合等离子体光谱仪检测卵壳化学元素，对孵化前（对照组，n=8）后（实验组，n=12）2组卵壳进行比较。孵化前后卵壳表面晶体层、栅栏锥体层和壳膜层超微结构均有明显差异，孵化后卵壳厚度小于孵化前（P﹤0.05）；孵化后卵壳中有8种元素质量浓度（8/23）比孵化前卵壳显著减少（P﹤0.05）。结果表明，幼鸟在其卵壳内胚胎发育过程中，需要消耗卵壳中部分元素构成骨骼等器官组织，卵壳结构与功能随之发生相应变化。     

乌龟卵壳结构的研究

本文对乌龟卵壳在扫描电镜下的微观结构进行了研究.乌龟卵壳主要由钙质层与壳膜组成.钙质层由霰石状态的碳酸钙晶体组成,可分为许多个壳单位,每个壳单位由同一中心辐射出来的针状晶体构成.卵壳的外表面具有一定的饰纹,有些部位还分布有纵横交错的有机纤维和块状的有机物质.壳膜由多层网状纤维组成,没有内、外壳膜之分.龟卵在孵化过程中不形成气室.同时对孵化前后龟卵壳的结构进行了对比研究.     

乌龟卵壳结构的研究

本文对乌龟卵壳在扫描电镜下的微观结构进行了研究。乌龟卵壳主要由钙质层与壳膜组成。钙质层由霰石状态的碳酸钙晶体组成,可分为许多个壳单位,每个壳单位由同一中心辐射出来的针状晶体构成。卵壳的外表面具有一定的饰纹,有些部位还分布有纵横交错的有机纤维和块状的有机物质。壳膜由多层网状纤维组成,没有内、外壳膜之分.龟卵在孵化过程中不形成气室。同时对孵化前后龟卵壳的结构进行了对比研究。     

日本血吸虫蛋白水解酶对不同宿主血红蛋白降解作用的研究

日本血吸虫对终宿主—哺乳动物的选择性范围较广,但不同哺乳动物对血吸虫的相容性有所不同,本文就日本血吸虫蛋白水解酶(Hbase)对不同哺乳动物和非哺乳动物血红蛋白(HB)的降解作用进行了研究。结果证明,在相同条件下,日本血吸虫Hbase对其适宜终宿主人、牛、羊Hb的降解程度明显高于非适宜终宿主大鼠和非终宿主鸡。提示宿主对血吸虫的相容性与日本血吸虫Hbase对宿主Hb的降解能力有关。     

马鸡属鸟类卵壳元素成分研究

采用电感偶合等离子体光普仪测定了马鸡属4种鸟类卵壳中化学元素的质量含量,褐马鸡（C.mantchuricum),白马鸡（C,crossoptilon)和蓝马鸡（C.auritum)卵壳中测定出19种元素成分,哈曼马鸡（C.harmani)为21种元素,北京动物园饲养的褐马鸡,白以允许和蓝马鸡三者卵壳元素成分和含量基本相同;野生的褐马鸡和哈曼马鸡卵壳元素中P,Pb,Fe和Ti的质量含量有明显差异,同时褐马鸡野生个体和饲养个体比较,卵壳元素Zn,Fe,Al,Mn和Ti的质量含量差异明显。     

疫苗对日本血吸虫肝虫卵肉芽肿细胞的降解作用的研究

应用形态计量学的方法，研究了日本血吸虫尾蚴减毒疫苗作用于小鼠后，宿主对再感染肝内虫卵肉芽肿细胞核形态计量学参数的变化。结果表明，免疫组动物肝内形成的虫卵肉芽肿细胞数密度与面密度减小，与对照组有明显差异，Ｐ＜０．００１；细胞核的平均面积、平均周长、平均直径均改变明显，Ｐ＜０．０１；而细胞核凹凸度改变不大，Ｐ＞０．０５。揭示经疫苗作用后，宿主肝内虫卵肉芽肿反应向下调节现象明显，组织病理学改变减少，证明减毒疫苗产生保护性免疫力的机理。     

扁嘴海雀卵壳的超微结构观察

扁嘴海雀卵壳的扫描电镜和ＴＮ－５５００能谱仪研究表明，海雀卵壳由Ｃａ，Ｓｉ，Ｋ，ＣＩ，Ｓ等元素构成，可分表怪，海绵层，乳锥体层，壳膜层，其超微结构与卵壳的生理功能和遗传特点相关。     

日本血吸虫平衡型核苷转运蛋白3基因(SjENT3)的RNA干扰研究

血吸虫以雌雄合抱的方式生存,雌虫在合抱后才能发育成熟,雄虫通过某种非精子传递的机制调控血吸虫雌虫的生长发育,而成熟雌虫所产大量虫卵是血吸虫导致宿主严重病理损害和疾病再传播的根源,因此,了解雄虫对雌虫发育的调控对血吸虫的致病和传播具有重要意义.本实验室前期蛋白质组学研究结果显示日本血吸虫ENT3蛋白(SjENT3)在两性感染的合抱雄虫体内的表达高于其在单性感染雄虫体内的表达.本研究通过qRT-PCR发现SjENT3基因在日本血吸虫虫体各个检测时间点均转录,从7d到21d逐渐升高,在21d转录水平达到最高,随后逐渐下降;SjENT3基因在18,21,25,28,35,42d在合抱雄虫体内转录水平明显高于合抱雌虫;对合抱雄虫与单性感染雄虫转录水平分析发现其在21d,23d,25d3个检测时间点与蛋白质组学结果一致,在合抱雄虫体内高表达.利用筛选出效果较好的siRNA对SjENT3在血吸虫体内的转录进行长期干扰,结果发现:特异siRNA干扰显著影响SjENT3转录水平,和NC对照组相比,干扰引起宿主虫荷率下降24.44%(P0.05),宿主肝脏荷卵率下降57.47%(P0.01),干扰后雌虫肝产卵能力下降42.28%(P0.01).本研究结果初步表明SjENT3基因参与日本血吸虫尤其是雄虫的生长发育,并可能与血吸虫雌雄虫合抱及其相互间信息传递有一定的关系.     

白冠长尾雉(Syrmaticus reevesii)卵壳的超微结构及元素组成研究

对采自河南董寨国家级自然保护区的白冠长尾雉(Syrmaticus reevesii)卵壳样品进行了检测和研究,利用扫描电子显微镜观察了卵壳的超微结构,采用电感偶合等离子体光谱仪测定了卵壳中的化学元素.结果表明:白冠长尾雉卵壳的表面晶体层、栅栏锥体层和壳膜层的厚度分别为20.8,220.8和62.5μm,分别占卵壳总厚度的6.8%,72.6%和20.6%;栅栏层有很多蜂窝小孔,其直径为(0.32±0.08)μm(n=30);卵壳表面有许多圆形或椭圆形的气孔,可能与胚胎发育过程中的气体交换有关,气孔横断面呈细漏斗状,在其上半部有颗粒状填充物.同时比较了白冠长尾雉野生和笼养个体未孵化卵壳中21种化学元素的含量,发现在组成卵壳的化学元素中,野生白冠长尾雉的Ca,Mg,P,S的质量分数w>1 mg.g-1,其中Ca含量超过卵壳元素总含量的40%;Na,Si,S,K和Al次之,w=0.1~1mg.g-1;Fe,Zn,Pb,Mn,Cu,V,Ti元素的w=1~100μg.g-1;Ni,Cr,Co,Se,Cd的含量最低,w<1μg.g-1.与野生个体的卵壳相比,保护区人工饲养的白冠长尾雉的卵壳成分有显著差异,其中S,Cu,Fe,Al,Mn,Si,Sr,Se,Cr等元素野生个体与笼养个体相比,同种元素在不同个体上w的差异均达到20%以上.饲养个体对Fe,Mn,Si和Sr等4种元素摄入明显不足,而S,Cu,Al,Se,Cr等元素则显著偏高,这可能是造成董寨自然保护区白冠长尾雉卵受精率较低的主要原因.建议适当调整饲料中这些元素的配比,以保证饲养条件下白冠长尾雉拥有良好的营养供给,从而提高人工繁殖的成功率.     

四种鸟类卵壳的扫描电镜观察

利用扫描电镜对白鹇(Lophura nycthemera)、鹌鹑(Coturnix coturnix)、水雉(Hydrophasianus chirurgus)和灰卷尾(Dicrurus leucophaeus)卵壳的超微结构进行观察研究.结果显示，这四种鸟类的卵壳结构与其他鸟类的基本相似，由外而内依次为表层、海绵层、锥体层、乳突、壳膜层及贯穿卵壳的气孔道等.四种鸟类两两之间在海绵层小孔数、小孔直径、内表面气孔数、乳突数以及横断面厚度都存在显著差异.海面层小孔数由高到低依次为鹌鹑、白鹇、灰卷尾、水雉；海绵层小孔直径由高到低依次为水雉、灰卷尾、鹌鹑、白鹇；内表面气孔数由高到低依次为白鹇、鹌鹑、水雉、灰卷尾；内表面乳突数由高到低依次为鹌鹑、白鹇、水雉、灰卷尾；横断面厚度由高到低依次为白鹇、鹌鹑、水雉、灰卷尾.这种结构上的差异与种的特异性及其生存环境密切相关，卵壳的结构差异是鸟类对环境的一种适应.     

X射线衍射对3种雉类卵壳晶粒度的研究

采用多晶X射线衍射仪(XRD)测定了我国特产3种珍稀雉类的卵壳，即野生和笼养褐马鸡(Crossoptilon mantchurium)、哈曼马鸡(C.harmani)和白冠长尾雉(Syrmaticus reevesii)所产的卵壳．首次报道了褐马鸡、哈曼马鸡和白冠长尾雉卵壳晶粒的大小．野生环境下褐马鸡，哈曼马鸡和白冠长尾雉卵壳晶粒大小分别为104.5，211．8和145．3nm，差异较大；笼养环境下褐马鸡、哈曼马鸡和白冠长尾雉卵壳晶粒大小分别为224．0，308.7和162．5nm，差异较大．同一种类不同环境，其卵壳晶粒大小差别明显，3种野生卵壳均比其笼养卵壳晶粒度小，差别最大的是褐马鸡，其笼养环境卵壳晶粒与野生环境卵壳晶粒大小之比为2．144；差别最小的是白冠长尾雉，其比值为1．118；哈曼马鸡的比值居中为1．458．野生雉类卵壳的晶粒较小，因此其硬度将明显高于笼养卵壳，由此可推测出野生雉类所产卵的结构更为致密和坚实，因而对自然环境的适应能力更强．     

日本血吸虫成虫灌注收集法的改进

日本血吸虫尾蚴感染动物建立血吸虫病病理模型常用于寄生虫学教学及科研,本实验可直观的展示血吸虫病的生活史过程及血吸虫对机体损害情况,同时,可采集到血吸虫虫卵、童虫、成虫、血清等材料,提供教学、标本制作及进行相关的科学研究。血吸虫成虫的获取,一般先将动物处死后用针     

日本血吸虫天然抗病分子疫苗的结构与功能分析I.未成熟卵28KDa分子的快速分离纯化与鉴定

为了进一步研究日本血吸虫天然抗病分子（SIEA28KDa）的结构与功能,采用SDS-PAGE制备电泳和电洗脱法从日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原（SIEA）中快速分离纯化了SIEA28KDa抗原分子,纯化后抗原分子经梯度凝胶电泳分离,重复测定其分子量,同时,采用Western blot和ELISA检测SIEA28KDa分子的免疫活性及其生化纯度。证实获得的提取物SIEA28KDa抗原分子的纯度高、活性好;用该抗原分子免疫家兔获得的单特异性抗血清可同时识别日本血吸虫未成熟虫卵、雌虫和雄虫的28KDa抗原组分,说明该分子与日本血吸虫成虫（AWA）28KDa组分具有部分交叉抗原性。     

日本血吸虫天然抗病分子疫苗的结构与功能分析 Ⅰ.未成熟卵28kDa分子的快速分离纯化与鉴定

为了进一步研究日本血吸虫天然抗病分子(SIEA 28 kDa)的结构与功能,采用SDS-PAGE制备电泳和电洗脱法从日本血吸虫未成熟卵可溶性抗原(SIEA)中快速分离纯化了SIEA 28 kDa抗原分子,纯化后抗原分子经梯度凝胶电泳分离,重复测定其分子量。同时,采用Western blot和ELISA检测SIEA 28 kDa分子的免疫活性及其生化纯度。证实获得的提取物SIEA 28 kDa抗原分子的纯度高、活性好;用该抗原分子免疫家兔获得的单特异性抗血清可同时识别日本血吸虫未成熟虫卵、雌虫和雄虫的28 kDa抗原组分。说明该分子与日本血吸虫成虫(AWA)28 kDa组分具有部分交叉抗原性。     

褐马鸡卵壳、羽毛及机体器官中10种矿物元素含量的相关性研究

采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)和原子吸收光谱法(AAS),对成年褐马鸡卵壳、羽毛和机体不同器官中Fe、K、Zn、Mn、Cu、Ni、Cr、Mo、Pb、Cd等10种矿物元素进行了测定。应用两个独立样本检验的方法进行了元素含量的差异分析,应用Pearson相关系数进行了两变量关联性分析。结果表明:褐马鸡卵壳、羽毛中10种矿物元素的含量与机体器官中的含量无显著差异,卵壳、羽毛内矿物元素的含量与机体大多数器官的含量呈正相关关系,并且绝大部分呈显著(P0.05)或极显著(P0.01)正相关。通过测定褐马鸡卵壳、羽毛中的矿物元素含量,可以用来评估和掌握野生褐马鸡种群的营养、生理、繁育和生态环境的准确信息。     

基于转录本组和蛋白质组数据的日本血吸虫候选疫苗分子序列的预测和分析

预测了可能模拟致弱疫苗免疫保护性效果的日本血吸虫抗原分子,为实验鉴定抗日本血吸虫候选疫苗分子提供基础.实验基于已发表的辐照尾蚴转化的童虫的特征性转录本组(曼氏血吸虫)和蛋白质组(日本血吸虫)序列,用BLASTP算法等搜寻来源于正常日本血吸虫童虫和成虫的转录本组和蛋白质组中的序列;应用在线软件、相关数据库及文献对这些序列进行序列注释分析.结果获得了与辐照尾蚴转化的童虫特征性表达的分子同源或一致的日本血吸虫序列131条,它们较高比例地出现在正常童虫高表达的分子集类中;进一步文献分析预测得到了52个日本血吸虫候选疫苗分子,它们的序列特征与存在于血吸虫体被的一些分子和已知的抗血吸虫疫苗分子的相类似.用数据挖掘技术获得了一批日本血吸虫候选疫苗分子,为进一步实验研究奠定了基础.     

狮弓蛔虫卵卵壳的光镜及扫描电镜观察

本文用光学显微镜和扫描电子显微镜观察了狮弓蛔虫虫卵表面的微观形态。讨论和分析了其虫卵的形态学特征等。     

高山鸡卵壳及壳膜超微结构的观察

以捷描电镜观察了高山雪鸡卵壳和壳膜的超微结构。其卵壳由５层构成，由内向外分别是基层，乳突层，栅栏层，结晶层和护膜层。气道外孔有盖层。栅栏层有少量气泡。壳膜由３层膜构成，外层和中层为纤维膜，内层为非纤维结构的平滑的薄膜。本项观察发现了引导栅栏层形成的钙化桥。