IDO抑制剂LPM3480226联合不同化疗药物抗小鼠结肠癌CT26

研究吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂LPM3480226与不同化疗药物联合使用对小鼠结肠癌CT26移植瘤生长的抑制作用,为IDO抑制剂的应用提供临床前药效学依据.采用CT26皮下移植瘤小鼠模型,通过观察荷瘤小鼠体重、肿瘤体积、肿瘤重量等指标,考察LPM3480226分别与紫杉醇、伊立替康、力扑素(紫杉醇脂质体注射...     

HIIT和MICT运动方式对健康青年T淋巴细胞亚群凋亡的影响

选取35名无规律运动习惯的健康青年(年龄18～30周岁)分别完成一次急性高强度间歇训练(high intensity interval training, HIIT)和中等强度持续训练(moderate-intensity continuous training, MICT)(间隔一周),两种运动方式能量消耗相同(1 256 kJ).分别于运动前、运动后即刻、运动后3 h和24 h采集上述青年的静脉血,采用流式细胞仪对低分化T细胞(CD3⁺CD28⁺CD57^-)、高分化T细胞(CD3⁺CD28^-CD57⁺)、调节性T细胞(T_regs)(CD4⁺CD25⁺CD127^-)、造血祖细胞(CD45⁺CD34⁺)和内皮祖细胞(CD45^-CD34⁺KDR⁺)检测计数;采用膜...     

IDO抑制剂NLG919联合伊立替康抗小鼠结肠癌CT26研究

本文旨在研究吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)抑制剂NLG919及联合化疗药伊立替康的抗肿瘤作用以及潜在的作用机制.实验以IDO抑制剂NLG919为基础,采用小鼠结肠癌CT26荷瘤小鼠模型,研究了NLG919与化疗药物伊立替康联用的抗肿瘤作用及免疫机制.研究结果表明,NLG919与伊立替康联用时未增加其动物体重降低作用; NLG919可显著增强伊立替康的抗肿瘤作用,其机制与改善肿瘤免疫微环境有关,包括提高CD3+CD4+、CD3+CD8+效应T细胞比例和增强细胞因子γ-干扰素和白细胞介素-2的分泌.基于IDO抑制剂的免疫治疗与化疗药物联用可作为一种提高抗肿瘤效应的重要策略.     

抗干扰性智能索拉菲尼隐形印迹材料的制备及其释药性能研究

将分子印迹技术和隐形纳米技术相结合,用亲水性聚乙二醇对索拉菲尼印迹聚合物进行隐形化修饰,制备了具有抗干扰性能的智能索拉菲尼隐形印迹材料。研究发现该材料对含NaCl、KCl盐溶液具有较好的抗干扰性,当Na⁺、K⁺分别与索拉菲尼共存时,目标材料对索拉菲尼的吸附容量仅下降8.6%及19.2%。不仅如此,目标材料还对索拉菲尼现出良好的特异选择性,相对瑞戈非尼和甜菜碱而言,其分离因子各为2.33、4.63。释药性能结果表明,目标材料不仅在模拟肿瘤环境(pH为5.5)的累积释药率41.42%要明显高于在正常生理环境(pH为7.4)条件下的27.71%,而且于还原性物质谷胱甘肽存在的情况下,无论pH值为5.5还是7.4时,目标材料的药物累积释放率均显著增大,分别为63.77%及39.15%。目标印迹材料对索拉菲尼的缓释效果也不错,时长可达160 h。     

胡桃楸树皮抗肿瘤有效成分对H22荷瘤小鼠T细胞亚群的影响

 为测定胡桃楸树皮提取物(HT)抗肿瘤有效成分对H₂₂荷瘤小鼠T细胞亚群的影响,将昆明小鼠随机分为HT高剂量组、HT低剂量组、阳性药环磷酰胺组、模型组和正常组,采用接种法复制H₂₂肿瘤移植模型。利用荧光标记抗体-流式细胞术检测HT对建立的H₂₂荷瘤小鼠模型外周血中CD4⁺/CD8⁺细胞亚群比值变化; ELISA法检测CD4⁺细胞所分泌细胞因子IL-4和IFN-γ的含量,以测定Th1/Th2细胞亚群比例。结果显示,与阳性药注射用环磷酰胺(CTX)相比,HT高、低剂量组能显著降低机体CD8⁺亚群比例(P<0.01),HT低剂量组可明显提高CD4⁺/CD8⁺比值(P<0.05)。HT高、低剂量组的IL-4含量显著低于阳性药CTX组(P<0.001),明显低于模型组(P<0.05)。HT高剂量组的IFN-γ/IL-4水平明显高于阳性药CTX组(P<0.05)。研究表明,胡桃楸树皮提取物具有明显的抑瘤作用,能保护胸腺和脾脏,能减轻荷瘤机体的T细胞免疫功能的损伤。     

FOXP3+调节性T细胞与免疫细胞治疗

 CD4⁺CD25⁺FOXP3⁺调节性T细胞（Treg）负责维持机体免疫稳态、调节免疫耐受。Treg细胞通过调控机体对外来或自身抗原的免疫应答水平,在抗自身免疫及抗肿瘤免疫中均发挥重要作用。深入分析了Treg细胞功能的分子机理,通过FOXP3⁺Treg细胞体外扩增或对其进行修饰改造,可以使其在不同组织及炎症微环境下特异性促进对机体的有益作用,减少副作用,这一现象会为免疫细胞治疗提供新思路与新策略。     

胰腺癌细胞与神经相互作用对MIA PaCa-2转移侵袭的影响及机制研究

为了探讨胰腺癌细胞MIAPaCa-2与神经的相互作用对MIAPaCa-2增殖、凋亡、转移和侵袭能力的影响,及其在上皮间质转化和嗜神经侵袭进程中的作用,建立了MIA PaCa-2和小鼠神经共培养模型,收集上清,用其处理MIAPa-Ca-2 细胞,通过流式细胞术观察 CD133⁺/CXCR4⁺双染比例变化;Transwell 实验检测 MIA PaCa-2/神经相互作用和CD133对胰腺癌细胞转移侵袭能力的影响; Western blotting 检测不同处理组相关蛋白的表达;CCK-8检测其对MIA Pa-Ca-2增殖能力的影响.结果显示共培养上清处理过的MIA PaCa-2细胞中CD133⁺/CXCR4⁺双阳性比例显著高于普通培养基组(P<0.05),MIA PaCa-2/神经相互作用和 CD133 促进MIA PaCa-2增殖、转移和侵袭,提高其抗凋亡能力,上调Vimentin和Slug的表达.表明MIA PaCa-2/神经相互作用可提高胰腺癌细胞中CD133⁺/CXCR4⁺双阳比例,促进细胞增殖,抑制凋亡,调控细胞上皮间质转化进程,并诱导其转移侵袭.     

基于胆固醇代谢调控的肿瘤免疫治疗新方法

 免疫检测点阻断疗法等肿瘤免疫疗法近年在临床上取得了重大突破,但仍存在响应率低等显著缺点,需开发新的肿瘤免疫疗法以使更多肿瘤患者受益。胆固醇作为细胞质膜脂质的重要组成成分,其代谢可以影响T细胞的质膜环境及效应功能。本研究发现,通过调控胆固醇代谢可以增强CD8⁺ T细胞的抗肿瘤免疫反应。抑制关键胆固醇酯化酶ACAT1的活性,CD8⁺ T细胞质膜游离胆固醇水平上调,细胞的抗肿瘤免疫应答显著增强,这为肿瘤免疫治疗提供了新思路和新方法。     

低剂量Activin A通过激活CD8+T细胞发挥抗肿瘤效应

Activin A属于转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族中的多功能细胞因子,存在于多种免疫细胞中.CD8⁺T细胞是发挥抗肿瘤活性的主要免疫细胞类型.以H22细胞移植瘤模型旨在探讨Activin A对CD8⁺T细胞功能的调控和作用机制.本研究首先在分离出的CD8⁺T细胞上发现Activin A受体及下游信号分子的表达.体外实验表明Activin A对小鼠H22肝癌细胞系的凋亡及增殖无显著影响.H22荷瘤鼠的体内研究发现低浓度Activin A抑制肿瘤生长,高浓度Activin A促进肿瘤生长.在Activin A对肿瘤CD8⁺T细胞作用的研究中,发现大剂量Activin A处理的肿瘤中CD8⁺T细胞含量减少,小剂量Activin A处理组中CD8⁺T细胞含量则增加.以上数据表明,不同剂量的Activin A可能通过调控CD8⁺T细胞的浸润对肿瘤的生长发挥双重作用.     

表达抗PD-1抗体的溶瘤病毒在结肠癌腹腔移植瘤模型中的抗肿瘤作用

为了研究表达小鼠抗PD-1抗体(VT1093M)的溶瘤病毒对结肠癌腹腔移植瘤模型的抗肿瘤作用,利用BALB/c小鼠成瘤的小鼠结肠癌CT26-luc细胞株建立了结肠癌腹腔移植瘤模型。接种后第8天进行分组,设置生理盐水(normal saline, NS)组、病毒VT09X组和VT1093M组,每组5只,注射剂量为2.5×10⁷ pfu/250μL,NS注射250μL,每隔一天注射一次,共注射5次。末次注射后6 d,脱颈处死小鼠,提取外周血中CD45⁺细胞和腹水细胞,进行体外杀伤实验。治疗组初次出现荧光消失后第13天,进行再挑战实验。结果表明,造模实验确定最佳接种条件为200μL的2.5×10⁶个/mL细胞悬液;药效实验中,VT09X组和VT1093M组较NS组具有明显的肿瘤抑制效果,VT1093M组治疗期间出现肿瘤消失情况,较VT09X组抑瘤效果明显,但差异无统计学意义;再挑战实验中,VT1093M组均未出现肿瘤再次生长;在体外杀伤实验中,注射病毒组的外周血CD45⁺细胞在靶效比为1∶40时对CT26...     

FOXP3蛋白复合体及调节性T细胞功能研究进展

 FOXP3⁺CD4⁺CD25⁺调节性T 细胞（FOXP3⁺Tregs）负责正常机体免疫稳态的维持。人类许多重大免疫性疾病均与调节性T 细胞的功能异常相关。叉头状家族转录蛋白FOXP3 是调节性T 细胞中特异性表达的关键转录因子,对调节性T 细胞的发育与功能有着重要作用。近年来的研究表明,FOXP3 蛋白转录调控复合体的装配及其翻译后修饰调节对调节性T 细胞的功能至关重要,相关生理过程受到各种炎症微环境的动态调节。深入研究FOXP3⁺Tregs 活性调节的分子机制将为攻克人类重大免疫及相关性疾病提供创新性线索。     

艾曲波帕与大剂量地塞米松治疗原发免疫性血小板减少症患者的临床疗效及安全性评价

探讨艾曲波帕与大剂量地塞米松治疗原发免疫性血小板减少症(ITP)患者的临床疗效及安全性。选取医院于2020年4月—2021年5月收治的110例ITP患者，运用随机数字表法将其分为研究组和对照组，各55例。给予对照组患者艾曲波帕与常规剂量地塞米松进行治疗，研究组患者则使用艾曲波帕与大剂量地塞米松治疗，1个月后，评估2组患者临床疗效，同时记录2组患者血小板计数恢复正常时间、血小板计数达到峰值时间以及住院时间，对比2组患者治疗前后T淋巴细胞(CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺)水平，并对2组患者治疗过程中不良反应发生情况进行对比。治疗后，研究组治疗总有效率为96.36%，显著高于对照组的83.64%(P<0.05)，血小板计数恢复正常时间、血小板计数达到峰值时间、住院时间明显比对照组短(P<0.05)，且研究组患者CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺水平均较对照组高(P<0.05)，研究组与对照...     

有氧和力竭游泳运动对DNA疫苗免疫效果的影响及机制研究

将48只雌性C57BL/6小鼠随机分成对照组(16只),有氧游泳运动组(16只)和力竭游泳运动组(16只).在小鼠分别进行6周有氧和力竭游泳运动后,肌肉注射DNA疫苗3次,每次间隔14d.末次免疫后14d,处死小鼠,收集血液和脾细胞,检测抗原特异性的体液和细胞免疫反应.为了进一步研究不同强度有氧运动影响疫苗的免疫效果的作用机理,小鼠运动6周后,处死小鼠,收集脾细胞分析CD4⁺CD25+CD25⁺调节性T细胞(Treg)的数量及其抑制功能和IL-2的变化.结果显示:和对照组比,有氧运动增强了抗原特异性的细胞免疫反应和细胞毒T淋巴细胞反应(CTL);与之相反,力竭运动抑制抗原特异性的细胞免疫反应和CTL反应.但两种不同强度的游泳运动都不影响血清中抗体的产生.机理研究发现,力竭运动增加Treg细胞的数量及抑制功能,而有氧运动并不影响Treg的数量和功能,但增加脾细胞IL-2的表达.以上结果表明:1)有氧和力竭运动不影响DNA疫苗的体液免疫效果;2)有氧运动可能通过增加脾细胞中IL-2的产生而增强DNA疫苗的细胞免疫效果;3)力竭游泳运动可能通过改变Treg的数量及其抑制功能而削弱DNA疫苗的细胞免疫效果.     

海参寡肽:免疫调节作用及机制研究

 为研究海参寡肽对小鼠的免疫调节作用及机制,试验选取250只SPF级雌性BALB/c小鼠,随机分为5组:空白对照组,乳清蛋白组(0.30 g/kg),0.15、0.30、0.60 g/kg海参寡肽组。连续灌胃30 d后,通过测定ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素水平、小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、自然杀伤(NK)细胞活性,观察海参寡肽对小鼠细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬和NK细胞活性的影响,并通过流式细胞术对脾脏T淋巴细胞亚群进行分析。结果表明:海参寡肽显著提高了小鼠细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能及NK细胞活性(P<0.05),且效果优于乳清蛋白。通过T淋巴细胞亚群分析表明,海参寡肽显著提高了脾脏CD3⁺百分比和CD4⁺百分比(P<0.05)。由此可知,海参寡肽可能通过增加T淋巴细胞数和Th细胞比例,介导细胞免疫、体液免疫功能、单核-巨噬细胞吞噬能力和NK细胞活性的增强作用,起到增强免疫功能的效果。     

微生态疗法治疗婴幼儿轮状病毒临床疗效及安全性分析

分析微生态疗法治疗婴幼儿轮状病毒临床疗效及安全性。收集2018年1月—2020年1月在本院收治的87例轮状病毒感染导致腹泻患儿的临床资料。根据治疗方式不同,将患儿分为对照组(常规治疗)38例与观察组(微生态疗法治疗)49例。比较治疗效果。治疗后对照组总有效率为81.58%,观察组总有效率为95.92%,观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05);在治疗后,观察组患儿止泻时间、退热时间、呕吐消失时间明显低于对照组(P<0.05);治疗后均有所改善,但观察组患儿CD4⁺、CD3⁺水平明显低于对照组,CD4⁺/CD8⁺水平明显高于对照组(P<0.05);2组患儿治疗后均未出现有严重不良反应。微生态疗法治疗婴幼儿轮状病毒临床疗效显著,可加快患儿恢复速度,改善患儿免疫功能,安全性高。     

不同形式高原训练对运动员免疫功能及抗氧化能力标志物影响的网状Meta分析

[目的]探讨不同形式高原训练对运动员免疫功能及抗氧化能力标志物的影响效应.[方法]检索国内外权威数据库关于运动员参与高原训练的研究文献.[结果]网状Meta分析显示与常规训练比较,1)高住高练、高住高练低训及高住低练可显著提高运动员白细胞水平;2)高住高练、高住低练及间歇性低氧训练可显著提高运动员CD4⁺/CD8⁺水平;3)高住高练较低住低练可显著提高运动员血清肌酸激酶水平;4)间歇性低氧训练及低住高练可显著降低运动员血清丙二醛水平;5)高住高练,高住高练低训,高住低练及低住高练可显著降低运动员血清超氧化物歧化酶水平.[结论]高原训练可能显著抑制运动员免疫功能及抗氧化能力,间歇性低氧训练对运动员白细胞计数影响最显著,高住低练最易诱发CD4⁺/CD8⁺失衡,低住高练最易导致丙二醛功能受损,高住高练对血清肌酸激酶和超氧化物歧化酶的影响最显著.     

一种中药复方对小鼠脾脏淋巴细胞PD-1/PD-L1表达的影响

为了探讨中药复方对小鼠脾脏淋巴细胞PD-1/PD-L1的表达情况,以及CD3~+CD4~+和CD3~+CD8~+T淋巴细胞比例的影响,采用传统熬制中药的方法得到中药复方提取液,按低、中、高3个浓度对小鼠灌胃给药(1次/d),2周后,采用脑脊髓脱臼法处死小鼠,利用Real-time PCR和流式细胞仪检测脾脏PD-1/PD-L1的表达情况以及淋巴细胞亚型的变化。结果表明,随着中药提取液浓度的增加,脾脏淋巴细胞PD-1的表达显著降低,而PD-L1的表达无显著变化;CD3~+CD4~+型和CD3~+CD8~+型T淋巴细胞的比例均显著增加。所研制的中药复方能抑制淋巴细胞PD-1的表达,激活免疫辅助细胞和效应细胞,有望应用于抗肿瘤的免疫治疗。     

槲皮素抑制胆管细胞癌HCCC-9810细胞上皮-间质转化并上调抗肿瘤药物对其杀伤作用

胆管细胞癌是原发性肝癌的一种,是目前肝癌诊疗的最大难点。检测槲皮素(Quercetin)对抗肿瘤药物作用于人肝内胆管细胞癌细胞系HCCC-9810的影响,确定其在胆管癌细胞治疗中的潜在作用。使用系列浓度梯度的槲皮素作用于HCCC-9810细胞,使用MTT法计算抑制率,确定槲皮素作用于HCCC-9810细胞的量-效关系。检测系列浓度梯度的抗肿瘤药物索拉菲尼(Sorafenib)、奥沙利铂(Oxaliplatin)和多西他赛(Docetaxel)对HCCC-9810细胞的杀伤作用,确定抗肿瘤药物作用的量-效关系。选取适宜的作用浓度,利用MTT法检测槲皮素对上述抗肿瘤药物杀伤HCCC-9810细胞的影响。利用蛋白印迹实验,检测槲皮素对上皮细胞标识物E-Cadherin以及间质细胞标识物N-Cadherin、Vimentin表达的影响。结果是槲皮素、索拉菲尼、奥沙利铂和多西他赛等能够剂量依赖地抑制HCCC-9810细胞的存活;选取2μmol/L为后续实验中的槲皮素作用浓度,该浓度的槲皮素预处理HCCC-9810细胞能够显著上调其对抗肿瘤药物的敏感性。索拉菲尼、奥沙利铂和多西他赛作用于HCCC-9810细胞的半数作用浓度(IC_(50))依次从(2.75±0.22)μmol/L、(0.83±0.12)μmol/L和(0.05±0.01)μmol/L下调为(0.31±0.5)μmol/L、(0.15±0.02)μmol/L和(0.01±0.00)μmol/L。作用机制实验结果表明,槲皮素处理能够下调HCCC-9810细胞中的间质细胞标识物N-Cadherin和Vimentin的表达,上调上皮细胞标识物E-Cadherin的表达。槲皮素能够通过抑制胆管癌细胞系EMT上调抗肿瘤的效能,在肝脏胆管细胞癌诊疗中具有潜在应用价值。     

Wnt/β-连环蛋白通路在免疫检查点抑制剂耐药中作用的研究进展

Wnt/β-连环蛋白信号通路是癌症领域最热门的分子靶点之一,与许多恶性肿瘤的发生和发展密切相关. Wnt/β-连环蛋白信号通路还广泛应用于肿瘤免疫调节,异常活化的Wnt/β-连环蛋白与肿瘤免疫抑制微环境密切相关.目前,免疫检查点抑制剂的研究和应用已相当广泛,但是以靶向程序性死亡受体1 (programmed cell death protein 1, PD-1)/程序性死亡配体1 (programmed cell death ligand 1, PD-L1)和细胞毒性T淋巴细胞抗原4 (cytotoxic T lymphocyte antigen-4, CTLA-4)为代表的免疫检查点抑制剂存在患者响应率低和耐药的问题. Wnt/β-连环蛋白的激活会抑制肿瘤微环境CD8⁺T细胞的浸润,抑制抗肿瘤免疫反应并诱导免疫检查点抑制剂耐药.重点讨论了Wnt/β-连环蛋白信号通路与免疫检查点的关系,并对Wnt/β-连环蛋白抑制剂联合免疫检查点抑制剂治疗恶性肿瘤的研究进展进行综述.     

TiO_2光催化降解亚甲基蓝机理的研究

进行了亚甲基蓝光解、吸附及光催化对比实验,以及·OH清除剂叔丁醇、电子空穴对(e^-,h-,h⁺)结合抑制剂过氧化氢、空穴(h_(VB)+)结合抑制剂过氧化氢、空穴(h_(VB)⁺)清除剂碘化钾、单线态氧(+)清除剂碘化钾、单线态氧(¹O_2)清除剂叠氮钠、超氧自由基(O_21O_2)清除剂叠氮钠、超氧自由基(O_2^(·-))清除剂苯醌对TiO_2光催化降解亚甲基蓝降解率的影响实验,同时测定了光催化反应过程中H_2O_2的生成,证明了TiO_2光催化降解亚甲基蓝体系中主要活性氧形态为·OH,O_2(·-))清除剂苯醌对TiO_2光催化降解亚甲基蓝降解率的影响实验,同时测定了光催化反应过程中H_2O_2的生成,证明了TiO_2光催化降解亚甲基蓝体系中主要活性氧形态为·OH,O_2^(·-)和(·-)和¹O_2.