基于核糖体DNA大亚基片断序列探讨中国东海海域赤潮原甲藻的分子分类

采用PCR扩增技术对分类上有争议的中国东海赤潮原因种(被称为东海原甲藻．本简称：东海株系)的基因组DNA进行了核糖体DNA大亚基片断(LSU rDNA)的扩增和测序．并与一同扩增的来自美国CCMP的被称为具齿原甲藻(本简称：CCMP株系)的同源序列进行分析比较。结果表明，两710bp的LSUrDNA同源序列中仅存在7个碱基的差异．遗传相似度高达99．01％．遗传差异为0．99％．进一步与Genebank其他3种原甲藻即P．mezicanum、P．mieans和P．minimum的同源序列进行比较，发现其他3种原甲藻两两问的种间遗传相似度在91．1％～95．5％之间．而P.micans和P．minimum种内不同株系的遗传相似度为99．4％～99．9％．均为99％以上．综合这些数据说明东海株系与CCMP株系之间的0．99％的遗传差异应视为种内差异．原甲藻的东海株系与CCMP株系当属异名同种．因此本试验结果从分子水平支持了被称为东海原甲藻的原甲藻与被称为具齿原甲藻(P．deantatum)的原甲藻同为一种的观点。     

东海原甲藻的培养及色素分离分析

以自行培养的赤潮藻东海原甲藻（Prorocentrum donghaiense Lu）为材料,采用薄层层析（TLC）和高效液相色谱（HPLC）法对稳定生长的藻体色素进行了分离和分析．结果显示,东海原甲藻适宜生长于18—22℃,经活化、培养,一般于接种后的第4—5天进入稳定生长期．采用硅胶薄层层析方法（最适展层剂配比为石油醚：乙酸乙酯：乙醚：乙醇=20：6：3：2）从藻体色素抽提液中成功地分离到12条色素带,经颜色、极性、迁移率比对,以及荧光观察和吸收光谱分析,确定为1条Chla、1条ChlC2、1条β-胡萝卜素、1条去镁Chlα、1条多甲藻素以及硅甲藻黄素和硅藻黄素等其他4条叶黄素带,此外还有2—3条Chla或ChlC2衍生物带．进一步摸索了反相C18柱高效液相色谱（HPLC）分离东海原甲藻色素的条件,选用440nm波长检测,可得到至少30种组分．分离结果为进一步了解东海原甲藻的生长和光合特性以及赤潮研究提供了理论依据．     

东海原甲藻和链状亚历山大藻对硝酸盐和氨盐的生理响应

比较研究了硝酸盐和氨盐培养下,两种甲藻(东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense Lu)和链状亚历山大藻(Alexandriumcatenella DH01))对氮营养盐的生理响应.结果表明,两种赤潮生物的最大比增长率均随着培养液中硝酸盐浓度的升高(20～80μmol/L)而增加,且硝酸盐培养下的最大比增长速率高于同浓度的氨盐,表明在高浓度下,硝酸盐是适宜的氮源.东海原甲藻硝酸还原酶活力(1.14～5.20 fmol/(cell.L.min))与硝酸盐吸收速率呈正相关,链状亚历山大藻中则未检测到硝酸还原酶活力;两种赤潮生物谷酰氨合成酶活力对硝酸盐和氨盐的响应存在差异,链状亚历山大藻谷氨酰胺合成酶活力(10.93～30.97 pmol/(cell.L.min))要远高于东海原甲藻(0.34～0.95 pmol/(cell.L.min)).两种赤潮生物对硝酸盐和氨盐的不同生理响应可能是引起赤潮期间种群更替的一个重要原因.     

植物功能基因组研究进展

基因组学研究已开始从结构基因组学转向功能基因组学。对功能基因组学研究的重要意义及内容、方法进行了综述，并对植物功能基因的研究进展及应用前景作了介绍。     

细胞凋亡相关因子的研究进展

主要论述了细胞凋亡的特征、细胞凋亡的调控因子及其调控机理,简要说明了细胞凋亡的生物学意义.     

从EST出发克隆人基因组Xq13区段一个候选基因的初步研究

人类基因组表达序列筛选是寻找候选基因的重要路线之一，外显子陷阱法，ｃＤＮＡ直接筛筛选法，它们可分别根据表达序列的结构及表达特点进行筛选，ＥＳＴ是表达图的位标，它们是一些位点专一的表达序列位标，根据ＥＳＴ的特征，在国内首次建立了一种从ＥＳＴ出发的筛选候选基因的新方法，用睦方法已在人Ｘ染色体Ｘｑ１３区段筛选得到了一个新的ｃＤＮＡ，总测序徇的１３９８ｂｐ包含了完整的３末端。     

人类ADAM家族成员ADAM23a的克隆

应用与ADAM家族成员高度同源，来自人胎脑的EST（espressed sequence tag)为探针，从人22周胎脑cDNA文库中分离到3．0kb长的cDNA片段，除了C末端缺少91nt外，与ADAM23同源性达100％，编码的蛋白未能形成明显的跨膜区，定名为ADAM23a，在检测中发现，该基因与ADAM23的C末端相同位置的氨基酸序列中，分析其金属蛋白酶功能域(metalloproteinase domain)，不含有结合Zn的活性位点，去整联蛋白功能域（Disintegrin domain)与ADAM部分成员具有同源性，在人16种组织的Northern blot检测，ADAM23a仅在心脏和脑中表达，由于2种cDNA从不同发育时期的胎脑及脑中分离得到，有可能是在发育过程中受到了调节，可能通过去整联蛋白功能域与脑和心脏中的整联蛋白（integrin)相互作用。     

细胞凋亡的基因调控研究进展

细胞凋亡的调控是细胞生理死亡和肿瘤等疾病发生的重要机制。分别对线虫和哺乳类动物细胞凋亡的基因调控研究进展进行了综述 ,阐述了bcl 2基因家族、c myc基因、p5 3基因、白细胞介素Ⅰβ转化酶基因家族、Fas/FasL基因对细胞凋亡的调控作用。     

Identification of genes associated with cotyledon senescence in upland cotton

Leaf senescence in plants is an essential develop- mental phase, and an understanding of senescence is important not only for pure scientific reasons, but also for practical purposes. During the last decade, a number of senescence-associated genes (SAGs) …     

Isolation and expression pattern analysis of novel ESTs from human fetal brain

In order to learn the mechanism of brain development and differentiation, 90 expressed sequence tags (ESTs) were isolated by differential display from the cerebrum and cerebellum of 13-week and 33-week fetal brains. After searching database, 74 of them represented novel genes, some of them were homologous to the brain development related genes. Using total cDNA probes, 79 of the ESTs and their expression differences in fetal brain were further characterized.     

Programmed cell death involved in the schizolysigenous formation of the secretory cavity in <Emphasis Type=Italic>Citrus sinensis</Emphasis> L. (Osbeck)

The developmental types of secretory cavities in Citrus remain unclear and whether or not programmed cell death is involved in the developmental process of secretory cavities remains an enigma. Regarding cavity formation in Citrus sinensis fruits, this work uncovered novel evidence to delineate secretory cavity formation in schizolysigeny, supporting the possibility of utilizing secretory cavities as a new cell biology model for investigating the molecular mechanism of plant programmed cell death.     

钙离子可能参与放线菌素D诱导的玉米细胞凋亡

钙在动物细胞凋亡的信号转导中起重要作用,其最直接的作用是激活钙依赖性核酸酶,导致DNA的特异片段化.然而,关于钙在植物细胞程序性死亡中的作用的报道很少.本文以玉米根尖分生组织为材料,利用RNA合成剂放线菌D诱导细胞死亡,并从形态和生化方面检测到这种细胞死亡是一种程序性死亡(programmed cell death,PCD).利用钙离子特异性结合荧光染料wazo-1研究的结果表明,在死亡程序启动的瞬间,胞质内钙离子浓度急骤上升.意味着钙信号转导途径可能参与了这种PCD.这种PCD在DNA严重断裂之前是可以逆转的.     

中华绒螯蟹基因组研究概述

概述了近年来中华绒螯蟹基因组研究的进展情况，现已对13种基因的核苷酸序列进行了分析，并通过概念性翻译获得了8种蛋白质(或其亚基)的氨基酸序列，还对中华绒螯蟹的微卫星序列和序列表达标签开展了初步研究，总体上，中华绒螯蟹基因组研究较薄弱，处于起步阶段．今后应加强中华绒螯蟹基因组的广泛深入研究，重点突破一些重要功能基因的结构与功能的分析，为中华绒螯蟹的遗传改良提供理论基础。     

烟草花粉低温处理过程中超微结构变化的研究

利用环氧树脂半薄切片、超薄切片、电子显微镜技术以及氯化三苯四氮唑(TTC)法研究了烟草花粉经不同时间低温处理后的结构和活力的变化。在半薄切片中发现低温处理后一部分花粉细胞质收缩,整个细胞变瘪变空的衰退现象。随着处理时间的延长,衰退的花粉占花粉总量的比例也逐渐增大。超微结构观察表现出同样的但更加精细的结构变化趋势。从各种细胞器的变化来看,低温处理中首先是高尔基体、质体,然后线粒体发生衰退,细胞核可见的结构变化较晚。花粉衰退过程中液泡和内质网起重要作用。通过液泡膜的部分或完全消失,液泡不断侵蚀和消化邻近的细胞质。随着低温处理时间的延长,内质网大量增生、形成自噬泡,吞噬细胞质。最后花粉细胞质皱缩,变成一团深黑色无定形物质,花粉死亡。TTC法检测低温处理后花粉细胞活力变化的结果表明,随着低温处理进行,有活力的花粉占花粉总数的比例不断下降。到低温处理20d后,几乎所有的花粉都丧失了活力。结果表明：花粉在低温处理后的衰退过程是逐步的,有显著的时序性和特异性。这种衰退过程是细胞编程死亡。     

Temporal and spatial changes in Ca2+ distribution during the programmed cell death of tracheary elements

The changes in Ca²⁺ distribution in the tracheary elements (TEs) of the pepper leaves were studied using the cytochemical method of potassium antimonate. At the early stage of TEs formation, the vacuole and the nucleus held large volume, and antimonate Ca²⁺ deposits were observed mainly in the intercellular space and the cell wall. As the thickening of secondary wall occurred, the vacuole, nucleus and other organelles began to rupture, concomitant with the increase of calcium deposits in the cytosol, showing the influx of Ca²⁺ into the cell. With the further rupture of cytoplasm and other organelles, the number of calcium deposits at the non-thickening cell wall increased, but declined at the thickening bands of the secondary wall. When the cytoplasmic contents disappeared completely, the level of Ca²⁺ decreased at the non-thickening wall, but by contrast, increased at the thickening bands of the secondary wall. These observations indicated that the dynamic changes in Ca²⁺ distribution spatially and temporarily might have a close correlation with its distinct roles played during the formation of the secondary walls.     

植物细胞程序性死亡的研究进展

细胞程序性死亡是在植物体的一定发育阶段普遍发生的受特定基因调控的自然的细胞死亡过程.本文就植物PCD的一般特征、普遍性及其机理等方面的研究进展进行综述.     

植物组织培养中细胞凋亡的初步研究

细胞凋亡是指由基因控制的、细胞遵循自身程序,主动结束生命的过程。现在,许多检测细胞凋亡的方法已经建立,还发现了许多凋亡相关基因和蛋白,并基本阐明了凋亡信号的转导途径。但这些成果多来自对动物的研究。本实验旨在培养愈伤组织,利用紫外线（UV）和过氧化氢（H2O2）诱导愈伤组织的细胞凋亡,通过苯酚品红染色观察,对植物愈伤组织细胞在凋亡过程中的形态变化（主要是细胞核的形态变化）进行初步的研究。结果显示：植物愈伤组织细胞凋亡的初期,染色质断裂、聚缩,并趋向贴附于核膜;中期,细胞核膨大、破裂;晚期,出现凋亡小体。另外,UV对植物愈伤组织诱导的效果比H2O2更好。