重金属铬对黑斑蛙胚胎和蝌蚪生长发育的影响及血细胞DNA损伤效应

运用单细胞凝胶电泳技术研究了不同浓度重铬酸钾(K2Cr2O7)溶液(2.5,12.5,62.5μmol.L-1)对黑斑蛙(Rara nigromaculata)外周血细胞DNA的链断裂损伤效应,并观察了重铬酸钾对黑斑蛙胚胎和蝌蚪生长发育的影响.结果表明,12.5和62.5μmol.L-1的重铬酸钾具有明显的DNA链断裂损伤诱导效应,染毒15 d的DNA损伤率分别为85%和98%.在测试浓度范围内,重铬酸钾对黑斑蛙胚胎发育的影响不明显;低浓度<(12.5μmol.L-1)重铬酸钾对黑斑蛙蝌蚪生长发育的影响不明显,高浓度(62.5μmol.L-1)重铬酸钾对黑斑蛙蝌蚪的生长发育则具有明显的抑制作用.     

三氯杀螨醇对黑斑蛙蝌蚪的急性毒性效应研究

采用标准水生生物毒性的测量方法研究三氯杀螨醇对黑斑蛙蝌蚪的急性毒性效应,结果表明,在15～20℃下,三氯杀螨醇对黑斑蛙蝌蚪的24 h、48 h和72 h的半数致死浓度(LC50)分别为17.861、3.82和8.21 mg/L,95%可信区间分别是15.37～20.751,2.62～15.147,.81～8.63 mg/L。安全浓度(SC)为2.49 mg/L。     

硒盐对黑斑蛙蝌蚪红细胞微核及核异常的诱导

采用静态水质接触染毒法,研究硒酸钠和亚硒酸钠对黑斑蛙(Rana nigromaculata)蝌蚪红细胞微核及核异常的影响。结果显示,不同质量浓度的硒酸钠(1.25~20 mg/L)和亚硒酸钠(0.25~4 mg/L)染毒处理7 d后,黑斑蛙蝌蚪红细胞的微核细胞率,随染毒剂质量浓度的升高呈先增大后减小的趋势,核异常细胞率、总核异常细胞率均随染毒剂质量浓度的升高而增大。亚硒酸钠的毒害作用明显强于硒酸钠,对黑斑蛙蝌蚪红细胞均存在较强的细胞遗传毒性。     

pH和温度对黑斑蛙消化道脂肪酶活力的影响

采用聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法,对黑斑蛙(Rana nigromaculata)消化道不同部位脂肪酶活力进行了测定并考察了pH和温度对脂肪酶活力的影响.结果表明,黑斑蛙消化道不同部位脂肪酶活力由高到低依次是中肠、后肠、前肠、胃和食道.pH和温度对脂肪酶活力的影响较大,二者与脂肪酶活力的关系曲线均呈单峰型,胃和肠道脂肪酶的最适pH值分别为5.0和7.5,最适温度均为40℃.此外对蛙类的人工养殖提出了几点建议.     

六种农药对黑斑侧褶蛙的毒理效应

稻-蛙种养是一种绿色农业的发展模式,为了筛选高效低毒农药,优化稻-蛙种养体系,为农药的合理使用与两栖动物资源保护提供基础资料,测定了6种农药对农田常见的黑斑侧褶蛙的毒理效应.结果表明：在水温(25±1)℃条件下施毒96 h后,对黑斑侧褶蛙的毒害作用由强到弱依次为阿维菌素、戊唑醇、毒死蜱、氰氟草酯、吡虫啉和噻虫嗪;以稻田常用农药吡虫啉和戊唑醇为实验试剂进行生长毒性实验后发现,黑斑侧褶蛙生长发育随着这2种农药质量浓度和作用时间的增加而减缓,表明这2种农药在黑斑侧褶蛙体内有一定的蓄积作用,短时间就可以对蛙的生长发育造成较大的影响;不同天数及不同浓度的染毒组都可以激活黑斑侧褶蛙体内的氧化应激机制,低浓度吡虫啉和戊唑醇处理后,黑斑侧褶蛙的过氧化氢酶(CAT)酶活降低、谷胱甘肽(GSH)含量下降;升高2种农药浓度,该抑制现象更为显著,机体自由基清除和抗氧化防御系统被破坏,同时丙二醛(MDA)含量显著上升,引起生物体内蛋白质和核酸等交联聚合,产生毒害作用.研究结果可为稻-蛙综合种养体系的完善提供参考依据.     

除草通对黑斑蛙红细胞核异常的诱导效应

采用旱田除草剂除草通对黑斑蛙进行染毒试验,研究其以不同浓度在不同时间范围内对黑斑蛙红细胞核异常的诱导效应,结果表明:核异常现象与除草剂浓度的相关性有一定的范围;随着时间的推移,黑斑蛙红细胞核异常率呈现先上升后下降的规律性变化.从整个实验结果看,旱田除草剂对水体的污染性不容忽视.     

Zn2+对黑斑蛙早期发育的影响

以黑斑蛙受精卵为实验材料,采用人工配制的不同质量浓度的锌离子（分别为0,1,5,10,20,30,45,60,80mg/L）作为培养液,研究锌离子对黑斑蛙胚胎出膜及蝌蚪生长发育的影响.其结果表明,不同质量浓度的锌离子会显著缩短黑斑蛙胚胎50%出膜时间（P〈0.05,n=8）,但对黑斑蛙蝌蚪的最终出膜率没有显著影响（P〉0.05,n=8）;与对照组相比,染毒组蝌蚪的畸变率大大增加,且畸变类型具有多样性,表现为：尾部呈泡状膨大、尾部呈‘S’型、头部呈泡状膨大、个体形态较小（是正常个体的50%-65%）,总体表现是锌离子浓度越大,毒性效应越强,致畸率越高,与对照组相比,染毒组蝌蚪的畸形比率受锌离子浓度影响差异极其显著（P〈0.01,n=8）,且蝌蚪尾部的弯曲程度也随锌离子浓度的增加更趋严重,这与锌对尾部神经系统的毒害有关;锌离子对黑斑蛙蝌蚪的死亡率也有很大的影响,实验初期各质量浓度组蝌蚪死亡现象不明显,个体的死亡多发生在出膜后第5天到第10天,在肌肉感应期出现死亡高峰,与对照组相比锌处理组的蝌蚪死亡率明显增加,而且浓度越高死亡率越高.     

Pb~(2+)对黑斑蛙早期生长发育影响的研究

研究了Pb~(2+)质量浓度在10,20,30,40和50mg/L时对黑斑蛙(Rana nigromaculata)胚胎期及Pb~(2+)质量浓度在0.07,0.30,1.00mg/L时对黑斑蛙蝌蚪期生长发育的影响.结果表明,Pb~(2+)对胚胎期的毒性于孵化期和开口期表现显著,其余各期毒性不如这两期明显.Pb~(2+)能影响黑斑蛙胚胎期和蝌蚪期的生存率,对蝌蚪的生长发育具有明显的抑制作用(P0.01),但组间差异均不显著(P0.05);同时质量浓度为30,40,50mg/L时会导致孵化期胚胎畸形,致畸率50mg/L质量浓度水平最高(4.41%),40mg/L水平次之(3.33%),30mg/L水平最低(2.39%).各质量浓度水平均导致蝌蚪头部泡状膨大、S型尾和形体较小(为正常体长的0.50-0.67)等,致畸率1.00mg/L质量浓度水平最高(2.25%),0.30mg/L水平次之(2.00%),0.07mg/L水平最低(0.50%).并对致毒原因进行了初步分析.     

间二硝基苯对小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤作用的SCGE研究

采用小鼠睾丸支持细胞/ 生殖细胞共培养法以及单细胞凝胶电泳技术,研究了间二硝基苯对小鼠睾丸生殖细胞DNA的损伤作用.结果表明:间二硝基苯能够导致生殖细胞DNA链断裂,而且其受损率与剂量具有明显的剂量效应关系,与对照组相比均具有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05);间二硝基苯可以引起离体小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,具有生殖毒性.     

几种抗氧化剂对DNA的损伤和保护作用

采用单细胞凝胶电泳法研究了几种抗氧化剂对人外周血单核细胞DNA的损伤及对由H2O2引起的DNA损伤的保护作用.结果表明,槲皮素可引起明显的细胞DNA损伤,并呈浓度依赖性;芦丁在较高浓度时,引起损伤.7,8-二羟基-4-甲基香豆素,7-羟基-4-甲基香豆素即使浓度达100μmol/L也不引起细胞DNA损伤.Vc、亚硒酸钠和甘露醇,在较高浓度时均可引起微弱的损伤,只有Vc引起的损伤较严重.当预先用抗氧化剂保护细胞后再用50 μmol/L H2O2处理,发现7,8-二羟基-4-甲基香豆素的保护作用最强,槲皮素次之,保护作用具浓度依赖性.而芦丁、7-羟基-4-甲基香豆素、Vc和亚硒酸钠在浓度≤50 μmol/L时,无任何保护作用.甘露醇在低浓度可起明显的保护作用,在较高浓度25 μmol/L和50 μmol/L时则保护作用丧失.     

黑斑蛙早期胚胎发育过程中蛋白酶活性

本文采用活性电泳方法,对黑斑蛙（Ｒａｎａ ｎｉｇｒｏｍ ａｃｕｌａｔａ）早期胚胎发育过程中蛋白酶活性进行了研究．结果如下：尾芽期以前未检测到蛋白酶活性;中性条件下,心跳期检出分子量分别为８０、７２、６６ｋＤ的三种蛋白酶;随着胚胎的发育,蛋白酶的种类逐渐增多、活性逐渐增强;三种ｐＨ 条件下各时期所检出的酶的种类及活性并不相同,但以中性条件下酶的种类多、活性强．     

黑斑蛙、虎纹蛙和牛蛙皮肤的比较组织学

应用H.E和V.G胶原染色法对黑斑蛙(Rana nigromaculata)、虎纹蛙(Rana rugulosa)和牛蛙(Rana catesbeiana)皮肤进行了组织学观察和参数测量与比较.结果表明:三种蛙皮肤组织结构相似,但皮肤厚度、各组织层相对厚度及腺体密度存在较明显的种间差异和部位差异.虎纹蛙的皮肤最厚(0.44-0.68mm),牛蛙其次(0.28-0.60mm),黑斑蛙最薄(0.19-0.38mm);在三种蛙中,黑斑蛙躯体多数部位表皮相对厚度为15.1%-22.6%,较虎纹蛙(10.9%-17.7%)和牛蛙(9.9%-21.8%)厚.虎纹蛙和牛蛙皮肤胶原纤维层相对厚度分别为59.9%-68.7%和51.6%-75.3%,较黑斑蛙(44.4%-69.0%)厚;黑斑蛙和虎纹蛙躯体多数部位的颗粒腺密度(4.5-23.1个/mm2;8.9-25.3个/mm2)和粘液腺(54.1-152.2个/mm2;68.6-127.5个/mm2)较牛蛙(1.4-10.8个/mm2;16.8-39.3个/mm2)高.研究结果可供蛙类皮肤的合理开发利用参考.     

牛奶对东北林蛙蝌蚪生长发育及变态的影响

在水温21~23℃条件下,采用单因子试验方法研究牛奶对东北林蛙蝌蚪生长发育及变态的影响.结果表明:牛奶影响蝌蚪生长发育及变态;添加牛奶的3组(T_2,T_3,T_4)蝌蚪的活体质量及相对生长自23日龄起较空白组逐渐显出优势;T_2组蝌蚪成活率及变态率最高,T_4组最低;各试验组之间的变态幼蛙初始质量差异极显著(P0.01).随着牛奶添加量的增加,变态幼蛙初始质量增加,但变态开始日龄延后及历时延长;蝌蚪最大活体质量、开始变态日龄、变态期历时及变态幼蛙初始质量与牛奶添加量呈正线性相关,相关系数分别为0.728,0.968,1.000,0.987;变态率与牛奶添加量呈负线性相关,相关系数为-0.724;适宜的牛奶添加量为每100只蝌蚪0.5~1.0 m L.     

一氧化氮对食管癌细胞核DNA的损伤作用

以硝普钠 ( Sodium Nitroprusside,SNP)作为 NO( Nitric oxide)的体外供体 ,以食管癌细胞系 EC1 0 9作为细胞模型 ,采用单细胞凝胶电泳法检测不同浓度的 NO作用不同时间后 ,食管癌细胞核 DNA被损伤的情况 .检测结果表明 ,在一定的条件下 ,NO对食管癌细胞核 DNA的损伤作用具有明显的浓度和作用时间依赖性特征 ,总的来讲 ,NO的浓度越大 ,NO对细胞作用的时间越长 ,细胞核 DNA所遭受的损伤越重 .     

虎纹蛙蝌蚪与幼蛙肌肉蛋白质的双向电泳图谱对比分析

双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术之一。通过对虎纹蛙蝌蚪与幼蛙的肌肉进行双向电泳并对其图谱对比分析,为其今后进行蛋白质组学的研究打下基础。     

Ce(NO3)3对不同细胞DNA的损伤作用研究

以体外培养３Ｔ３ 细胞和ｌｏｖｏ 细胞为研究对象, 运用单细胞凝胶电泳技术, 探讨了Ｃｅ（ＮＯ３）３ 对这２ 种细胞ＤＮＡ 的损伤作用．结果表明Ｃｅ（ＮＯ３）３ 对２ 种细胞均有损伤作用： 低浓度（１ ｍｍｏｌ／Ｌ） 时,ｌｏｖｏ 细胞的ＤＮＡ 损伤率要明显高于３Ｔ３ 细胞ＤＮＡ 的损伤率, 高浓度（５ｍｍｏｌ／Ｌ） 时, 则２ 种细胞的损伤率几近相同, 提示较低浓度Ｃｅ （ＮＯ３） 对正常细胞和癌细胞存在着不同的作用, 稀土对癌细胞具有选择性杀伤作用; Ｃｅ （ＮＯ３） 具有一定的遗传毒性     

蜀本草多糖对植物DNA损伤的修复

研究蜀本草多糖对植物DNA损伤的修复作用,以蜀本草为原料,通过热水提法提取蜀本草多糖。经过浓缩、脱色、脱蛋白获得蜀本草多糖粗品。用不同浓度重金属溶液处理生长中的蚕豆幼苗,72 h后通过单细胞凝胶电泳检测蚕豆幼苗DNA损伤情况;采用不同浓度的蜀本草粗多糖溶液培养受损的蚕豆幼苗,检测其对蚕豆幼苗DNA损伤的修复作用。结果:20μmol CuSO_4对蚕豆幼苗叶片细胞诱导出了明显的DNA迁移。用蜀本草多糖溶液培养此浓度CuSO_4胁迫受损的蚕豆幼苗,其DNA受损情况得到一定改善,当蜀本草多糖浓度为200μmol时,彗星图像尾部明显缩短,修复效果明显。蜀本草多糖对植物DNA损伤修复存在一定的作用,但其作用的具体机制需要更进一步研究。     

铅化合物体外诱导人的淋巴细胞DNA损伤的遗传毒性

在体外对人的淋巴细胞，用不同浓度的硝酸铅Ｐｂ（ＮＯ３）２和硫酸铅ＰｂＳＯ４处理１小时，ＤＮＡ损伤的程度采用单细胞琼脂糖凝胶电泳技术进行比较研究．这两种铅化物均不同程度的显示了剂量反应关系．ＤＮＡ损伤的程度从８×１０－４ｍｏｌ／Ｌ起与空白对照相比，呈现有意义的增加（ｐ＜０．０５）．细胞ＤＮＡ断裂频率的增加与毒性呈现为线性增长的关系即为试验试剂的浓度愈高，则出现彗尾的细胞个数愈多，两种化合物在同样的实验条件下显示了相似的分裂剂的潜能．该试验初步证明铅化合物具有一定的遗传毒性