提高芜菁花叶病毒得率的方法

改进了芜菁花叶病毒的分离纯化方法，避免了分离纯化芜菁花叶病毒过程中通常遇到的病毒粒子聚集的现象，提高了病毒的得率，这为研究芜菁花叶病毒提供了有效的分离纯化方法。     

斑点免疫结合法检测3种植物病毒

研究了改进的斑点免疫结合法在检测芜菁花叶病毒、烟草花叶病毒和小西葫芦黄化花叶病毒中的应用.无论是使用全抗血清还是纯化的免疫球蛋白,检测感染组织粗汁液中的病毒或纯化的病毒,均获得了满意的结果.同时进行的斑点免疫结合试验、酶联免疫吸附试验和免疫吸附电子显微术等的比较结果表明:无论是检测纯化病毒还是感染组织粗汁液中的病毒,斑点免疫结合法的检测敏感性均优于后2种方法,病毒的可测感度芜菁花叶病毒为0.65ng,烟草花叶病毒为0.39 ng,小西葫芦黄化花叶病毒为0.45 ng;应用碱性磷酸酶标记抗体及羟基吲哚磷酸盐和氮兰四唑为底物较为合适,这种底物可在室温下长期保存,并且反应产物为不褪色的紫色,易于观察和保存.     

芜菁花叶病毒衣壳蛋白降解原因的初步研究

通过对广州郊区芜菁花叶病毒芜菁毒系的研究，表明该病毒的衣壳蛋白为单一组分，分子量为２００００。当纯化病毒或病毒蛋白在４℃冰箱中放置两个月后，蛋白质已部分降解，高效液相色谱分析得到两个吸收峰，聚丙烯酰胺凝胶电泳得到分子量为２００００和８７７０的两种组分。降解是由于病毒衣壳蛋白自身的原因造成的。     

在新疆发生的芜菁花叶病毒的鉴定

从新疆感染病毒的萝卜(Raphanus sativus)分离到一株线状病毒,该病毒在人工接种条件下可经汁液传播侵染属于9科的25种草本植物;该病毒可经桃蚜以非持久性方式传播;染病组织粗汁液和提纯病毒制备物在SDS双向免疫扩散试验和酶联免疫吸附(ELISA)试验中与芜菁花叶病毒抗血清发生强烈的免疫反应;该病毒的病毒粒子为长约750 nm的线形病毒粒子;以差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯了该病毒,纯化病毒的A260/A280为1.26;用提纯病毒制备了ELISA试验所用效价为1∶106的抗血清,证明该病毒株应属于芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus)的一个株系.     

芜菁花叶病毒崇明大白菜Y_(12)分离株的生物学鉴定

上海郊区青菜上流行的病毒病,经过近几年的研究,初步明确病毒主要属于以下三个类群:烟草花叶病毒(群)(TMV)、芜菁花叶病毒(T_PMV)和黄瓜花叶病毒(CMV).1980年前徐来升等已自青菜上分离出属于TMV群的长叶车前花叶病毒上海分离株(RMV(?));1980～1981年徐来升等又自崇明大白菜上分离出芜菁花叶病毒崇明分离株     

中国油菜芜菁花叶病毒1号株系的生化性质研究

对中国油菜芜菁花叶病毒１号株系进行了生化性质分析，中国油菜芜菁花叶病毒１号株系的病毒粒子平均大小为７９０×１３ｎｍ；纯化的病责制剂对紫外线呈典型的核蛋白吸收，Ａ＿（２６０）／Ａ＿（２８０）＝１．２２。核酸含量为５％＝０．１５％；衣壳蛋白经Ｎ－末端分析和ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳表明为单一组分，Ｎ－末端氨基酸为丝氨酸，分子量为２１０００Ｄ；衣壳蛋白由１８８个氨基酸残基组成     

基于公共sRNAs库的病毒检测分析研究

以公共的small RNAs(sRNAs)新一代测序数据为材料,通过生物信息学的分析方法检测生物实验系统样品中存在的病毒,讨论病毒与宿主间的关系,病毒的种属特性,进而指导生物实验设计.从GEO Datasets数据库下载917个已发表的sRNAs高通量测序数据,通过生物信息学分析共检测出来自334个样品库的2,107条高度同源的病毒序列和2,930条疑似的病毒序列.这些病毒主要是正链RNA病毒、反转录病毒和双链DNA病毒,集中在花椰菜花叶病毒科、反转录病毒科、杆状病毒科和芜菁黄花叶病毒目.     

邻联茴香胺—H2O2—辣根过氧化物酶伏安酶联免疫分析检测四种 …

将邻联茴香胺（ＯＤＡ）－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析体系于测定南芥菜花叶病毒、黄瓜花叶病毒、南方菜豆花叶病毒和芜菁地病毒等四种重要植物病毒,其灵敏度高地酶联免疫吸附显色光度法（ＥＬＩＳＡ）。     

甘蓝黑环斑病毒的生物学鉴定

1980年,文[14]报导了自上海郊区青菜上分离的长叶车前花叶病毒(RMV);同年,徐来升等从崇明大白菜上分离出芜菁花叶病毒的一个分离株——崇明分离株(T_PMV_(c.m.))(另文讨论);不久,郑礼等又在同种大白菜上分离得芜菁花叶病毒另一分离株——Y_(12)株(T_PMV-Y_(12)).这两个T_PMV分离株虽分离自同一种寄主,但寄主范围和症状却有很大差异,它们代表了T_PMV毒株的两种类型.     

高温对本氏烟抗病毒机制影响的研究

为探究温度和植物抗性的相互作用,本研究对本氏烟(Nicotiana benthamiana, Nb)被芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus, TuMV)侵染后在不同温度下的表现进行实验,通过分子研究手段测定了温度对植物抗病毒能力的影响.结果显示,与常温(23°C)处理相比,病毒侵染在高温(30°C)处理下被抑制;且高温处理下水杨酸羟化酶(NahG)转基因烟草更显著.进一步检测表明,高温能够显著提高NahG烟草中抗氧化酶的活性.在侵染后期,高温促使染病植株中茉莉酸(Jasmonic acid, JA)相关基因表达显著上调.同时,RNA沉默相关基因的表达量在高温处理下的NahG烟草中均上调.上述结果表明,高温通过刺激RNA沉默及相关抗逆激素途径提高了植株对病毒的抗性.     

长叶车前花叶病毒的免疫电镜观察

长叶车前花叶病毒(Ribgrass Mosaic Virus 简称RMV)是危害上海郊区蔬菜较普遍的病毒之一.本文简要报导关于电子显微镜观察RMV与其相应免疫球蛋白反应后的形态. 材料和方法1.RMV(上海分离物,下同)抗原的纯化:将感染RMV的青菜病叶捣碎后,用正丁     

西瓜花叶病毒-2新疆株的纯化

研究了西瓜花叶病毒 2新疆株的纯化 .感病西葫芦叶组织在含有w =0 .2 %巯基乙醇和 0 .0 1mol·L- 1乙二胺四乙酸二钠 (EDTA)的 0 .5mol·L- 1的磷酸钾缓冲液中匀浆 ,用匀浆体积 1/4的氯仿澄清 ,粗提取液中的病毒经含有 φ =1%TritonX 10 0和w =3%NaCl的w =6 %聚乙二醇沉淀 ,并以含有 0 .5mol·L- 1尿素、w =0 .1%的巯基乙醇和 0 .0 1mol·L- 1EDTA的 0 .5mol·L- 1磷酸钾缓冲液悬浮 ,后经含有w =0 .1%巯基乙醇和 0 .0 1mol·L- 1EDTA的w =10 %～ 4 0 %蔗糖密度梯度离心 ,获得了经电子显微镜、紫外检测和接种试验证实侵染活性为 94 .8%的纯化病毒 .纯化病毒的A2 6 0 /A2 80 =1.2 1,A2 6 0 /A2 4 5=1.15 ,纯化病毒产量约为每kg西葫芦感病叶组织中可提取 16mg .     

天麻中多糖的提取、纯化及含量分析

采用水浸提的方法提取了天麻中的多糖,并进行了纯化和含量分析,同时对影响天麻多糖提取的因素进行了考察.实验结果表明,在选择的最佳提取条件下,天麻中粗多糖得率为12.93%,纯化后多糖得率为9.22%,纯化多糖中多糖含量的为54.57%,粗多糖中多糖含量为38.42%.     

中国禾谷多黏菌传麦类病毒研究现状与展望

禾谷多黏菌属于根肿菌纲,为一种专性寄生于植物根部的真核低等生物.它本身没有致病性,但能传播大麦黄花叶病毒属和真菌传杆状病毒属的9种麦类病毒,从而引起禾谷类作物严重病害,并导致中国及其他地区禾谷类作物严重减产.相关大麦黄花叶病毒属成员包括大麦黄花叶病毒(BaYMV)、大麦和性花叶病毒(BaMMV)、小麦黄花叶病毒(WYMV)、小麦梭条斑花叶病毒(WSSMV)和燕麦花叶病毒(OMV),相关真菌传杆状病毒属成员包括土传小麦花叶病毒(SB-WMV)、燕麦金色条纹病毒(OGSV)以及新鉴定的中国小麦花叶病毒(CWMV)和土传禾谷类花叶病毒(SBCMV).测定了所有这些病毒的基因组全序列,研究了它们的地理分布.由于这些病毒能存活于禾谷多黏菌的休眠孢子内,因此可以持续十多年保持其侵染能力.研究了SBWMV、OGSV和OMV的自发缺失突变现象,发现这些突变体均不能被禾谷多黏菌传播.由于这些病毒病害的持续土传特性,目前惟一的有效防治方法是使用抗病品种,通过田间抗性筛选,已获得了一大批抗性种质资源.     

芜菁皱缩病毒P38蛋白的原核表达及抗血清的制备

从感染芜菁皱缩病毒(TCV)的拟南芥中提取总RNA,通过反转录PCR(RT-PCR)扩增得到TCV的外壳蛋白基因P38.在目的基因ORF框两边引入酶切位点BamHⅠ和SacⅠ,并连接到表达载体pET30-a上,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,37℃经0.5mM/L IPTG诱导6h后获得了分子量约为48kD的融合蛋白.经Ni-NTA纯化目的蛋白,注射大白兔制备抗血清.Western blot结果表明制备好的抗血清能成功检测感染TCV的拟南芥.     

澳栗精胺衍生物的酶法合成研究

澳栗精胺具有调节植物生长、抗炎症病变、免疫抑制缺陷和肿瘤转移等方面的功能,澳栗精胺的一些衍生物在抑制人类免疫缺陷病毒和丙肝病毒等方面比澳栗精胺本身活性更高.该文系统地优化了在有机溶剂中酶法合成澳栗精胺衍生物的条件,并且纯化得到了6-O-丁酰澳栗精胺.结果表明:合成澳栗精胺衍生物的最优条件为Lipozyme RM IM在四氢呋喃中、30 ℃下催化反应60 min,其中澳栗精胺的转化率为84.3%,6-O-丁酰澳栗精胺的得率为39.2%.纯化得到的6-O-丁酰澳栗精胺与标准品在高压液相色谱中的保留时间相同.     

山东省科技成果选介

TS制剂能有效地防治植物病毒病,促进植物生长,提高产量。特别对烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒、番茄花叶病毒、麦子黄矮病毒、玉米谷子红叶病等病毒病害防治有特效;对牧草、林木、果树等病毒病害防治效果也显著。TS粉剂为白色粉末,具有可湿性,其有效成份含量为2.5％,技术指标符合国家鉴定推荐标准.     

长叶车前花叶病毒上海株(RMVsh)外壳蛋白基因的克隆、序列分析及原核表达

长叶车前花叶病毒上海分离株（RMVsh)是从上海郊区的青菜（Brassica chinensis)上分离鉴定的，以提纯的病毒为材料，SDS－酚法纯化的基因组RNA作为模板，通过RT－PCR方法克服了该病毒的外壳蛋白基因（CP），DNA序列测定结果表明，外壳蛋白基因全长474个碱基，编码157个氨基酸，将CP基因插入原核表达载体pBAD/His-C中，转化E.coli Top10后，诱导表达，经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈－特异性的蛋白条带，Western blot检测表明，表达产物与RMVsh抗血清呈阳性反应，RMVsh CP基因的核苷酸序列及氨基酸序列与烟草花叶病毒属中其他能侵染十字花科作物的成员相比，同源率分别为83．5％－98．9％和87．9％－99．4％，并讨论了RMVsh的分类地位为烟草花叶病毒属侵染十字花科植物2个亚组中的第一亚组的代表。     

新疆五种芫菁同工酶电泳酶谱的比较研究

本文报道了用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析比较了新疆五种常见芜菁——草原斑芜菁Mylabris frolovi Germ。四点斑芜菁M.quadripunctata L.单纹斑芜菁M. monoxona Well。天山斑芜菁M. quadrisigtata, F. —M. 红头豆芜菁Epicauta erythrocephala Pall.的乳酸脱氢酶(LDH),酯酶(EST),苹果酸脱氢酶(MDH)和醇脱氢酶(ADH)的电泳酶谱。研究结果表明:1.每种芜菁都有不同的特征性酶谱;2.属间的酶谱差异性明星大于种间的酶谱差异性;3.同属芜菁具有共同的特征性酶带;4.酯酶在四种同工酶中活性最高。     

黄瓜花叶病毒研究进展

介绍了近年来对黄瓜花叶病毒(CMV)在生物学特性、血清学特性、基因组研究、卫星RNA以及该病毒的防治等方面的最新研究进展.此外,由于黄瓜花叶病毒株系众多,其株系的划分和分类对研究致病机理和各个株系之间的关系具有重要的作用,重点介绍了根据生物学、血清学以及最新的分子生物学研究结果对黄瓜花叶病毒株系的不同分类方法.