漂洗和氧化剂对罗非鱼鱼糜凝胶性能的影响

比较了漂洗和氧化剂（双氧水、次氯酸钠）对罗非鱼鱼糜的凝胶强度、白度及保水性的影响.结果表明：漂洗和氧化剂都显著（p〈0.05）提高了鱼糜凝胶的白度和凝胶强度;在氧化剂用量较小时,氧化剂虽然提高了鱼糜凝胶的白度,但是对鱼糜凝胶强度的提高程度与漂洗一次相比无显著差异（p〉0.05）;漂洗和添加少量的双氧水提高了鱼糜凝胶的保水性;电泳图显示,氧化剂的作用导致鱼糜凝胶中部分蛋白质的含量降低.     

仙人掌多糖的超滤膜分离提取及其影响因素

应用不同截留分子质量的超滤膜对仙人掌多糖浸提液进行分离、纯化和浓缩,并分析了超滤压力、超滤温度、纯化时间、料液体积流量、浓缩倍数等对超滤过程的影响,得出了最适宜的操作条件.研究结果表明,当选用截留分子质量为10000 ku的超滤膜、超滤压力为0.20MPa、超滤温度为25℃、料液体积流量控制在0.04~0.05 L/min、浓缩倍数为5~7倍时,粗多糖得率达0.95%.与传统的真空浓缩法相比,超滤浓缩法的粗多糖得率较高,所得多糖的品质也得到了改善,减轻了后续工艺进一步分离纯化多糖的负担.     

超声波辅助凝胶化对罗非鱼糜凝胶性能的影响

分析了超声波辅助凝胶化对罗非鱼鱼糜凝胶强度的影响,发现在鱼糜低温（40℃）凝胶化时用不同功率和频率的超声波处理对鱼糜凝胶的强度有显著提高(p<0.05)。其中功率100W,频率28kHz的超声波对凝胶的强度提高最显著。超声波处理也提高了凝胶的压出水分。电泳图(SDS-PAGE)和电镜图(SEM)显示,超声波处理对鱼糜凝胶强度有显著提高的可能原因是超声波促进了蛋白质分子间的交联和交叠。响应面分析结果显示,超声波辅助凝胶化的最优条件为58℃凝胶化13min;用所建立的数学模型预测凝胶化温度和时间,结果显示与40℃凝胶化20min的常用凝胶化条件相比,超声波辅助凝胶化可以缩短凝胶化时间。     

蛹虫草发酵产物新纤溶酶的分离纯化

笔者所在项目组的前期研究发现,蛹虫草深层培养可以产生至少两种纤溶酶.基于此,文中对蛹虫草深层培养产生的纤溶酶的分离纯化展开了研究.采用硫酸铵盐析、Sephadex G-25凝胶色谱、Phenyl-Sepharose HP疏水相互作用色谱、CM-Sepharose FF弱阳离子交换色谱和Superdex 75凝胶色谱对纤溶酶进行分离.最终纯化后的纤溶酶Ⅰ比活力达1467.44U/mg,纯化倍数为36.07,回收率为5.79%.纤溶酶Ⅱ比活力达1681.58U/mg,纯化倍数为41.33,回收率为4.00%.两种纤溶酶经电泳鉴定均达到电泳纯,相对分子质量分别约为28000和32000.     

蓝圆鲹骨骼肌GPI的纯化及其对肌原纤维降解的抑制

通过硫酸铵分级沉淀、Q-Sepharose阴离子交换层析和SP-Sepharose阳离子交换层析等方法,从蓝圆鲹骨骼肌中分离纯化得到葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI).SDS-PAGE结果显示,GPI分子质量约为56 ku;Western-blot分析显示,纯化的蛋白质与抗白姑鱼GPI多克隆抗体有很强的阳性反应,表明其为GPI;GPI的最适pH值和最适温度分别为8.0和40℃;GPI能有效抑制蓝圆鲹肌原纤维蛋白在55℃下的自身降解,且随着GPI添加浓度的增加,肌原纤维蛋白的降解逐渐受到抑制,提示GPI可用于鱼糜制品生产以提高产品的凝胶强度.     

黑曲霉糖化酶启动子区CCAAT框与反式作用因子AngCP结合的分析

依次通过20%～40%饱和硫酸铵、凝胶过滤、肝素柱层析及DNA亲和层析纯化了黑曲霉糖化酶启动子区CCAAT框DC(-489 bp～-414 bp)结合蛋白(AngCP1)及CCAAT框PC(-390 bp～-345 bp)结合蛋白(AngCP2).凝胶过滤分析和SDS-PAGE结果表明AngCP1和AngCP2的分子质量均约为120 ku,由分子质量为34 ku和50 ku的亚基组成.Western blot显示两者的34 ku亚基均能特异性地与鼠抗AngHapC抗体产生反应,进一步的电泳迁移率实验证实AngCP1和AngCP2为同一蛋白质,称为AngCP.Southwestern blot显示34 ku亚基结合于DC,而50 ku亚基结合于PC,并且34ku亚基与DC的结合能力强于50 ku亚基与PC的结合.上述AngCP具有与DC,PC不等结合强度的特点暗示三者在糖化酶表达调控中有着重要作用.     

巴戟天多糖的分级纯化及结构分析

对巴戟天多糖的柱层析分级纯化和一级结构进行了研究．采取热水浸提、乙醇沉淀的工艺获得巴戟天粗多糖MOHP,经离子交换和凝胶柱层析得到了MOHP-I,MOHP-Ⅱ,MOHP－Ⅲ和MOHP－Ⅳ4　个组分,通过红外光谱、液相和气相色谱等分析手段对分级后的MOHP－Ⅰ和MOHP-Ⅲ进行了初步的结构分析．结果表明：MOHP—Ⅰ的单糖组成为葡萄糖和果糖,分子质量约为2ku,呋喃糖环结构;MOHP-Ⅲ是一种均一的糖蛋白物质,其组成单糖为阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、果糖以及半乳糖,分子质量约为35ku;高效凝胶渗透色谱显示两组分均达到了较高的纯度．     

红枣添加量对鱼糜制品凝胶特性的影响

以红枣、鱼糜制品为研究对象,探究红枣添加量对鱼糜制品凝胶特性的影响并确定最适添加量,以空白组为对照,以凝胶强度、pH、白度、持水性、蒸煮损失和微观结构为评价指标,探究不同添加量(1. 25%、2. 50%、3. 75%、5. 00%、6. 25%)对鱼糜制品凝胶特性的影响,同时结合电子鼻、电子舌技术分析红枣对鱼糜制品风味特性的影响.结果表明:当红枣添加量为1. 25%时,凝胶强度达到最大值5505. 4 g·mm,比对照组增加32. 3%;持水性达到最大值83. 7%,蒸煮损失达到最低值4. 0%.随着红枣添加量的增加,鱼糜凝胶pH值逐渐降低,红枣添加量为6. 25%时,达到最低值6. 95;在风味特性方面,电子鼻总贡献率为98. 14%,可以用来区分挥发性气味的变化;苦味和鲜味均呈现逐渐增强趋势.     

重组类人胶原蛋白Ⅰ的层析分离

目的研究重组类人胶原蛋白的基因工程下游工艺对阴离子交换树脂（DE52）和阳离子交换树脂（CM52）的吸附效果。方法将基因工程菌E．coil BL 21经超声破碎、硫酸铵盐析、超滤浓缩后，再进行批量层析进一步分离纯化。结果得到最佳实验条件：采用阴离子交换树脂，pH值为6．0。盐浓度为0．2mol／L，蛋白进样浓度为0．4％（质量分数）。结论在HCBI的纯化过程中，阴离子交换树脂（DE52）较阳离子交换树脂（CM52）的分离效果更优，最终产物的纯度达到95．98％，回收率为91．7％，纯化倍数为5．3。纯化的类人胶原蛋白Ⅰ经SDS—PAGE电泳测定为电泳纯，分子质量为90ku。     

冷冻-解冻循环对鳞鲀(Abalistes Stellaris)鱼糜蛋白变性的影响

研究了冷冻-解冻循环对鳞鲀鱼糜蛋白变性的影响,测定指标为蛋白质盐溶性、Ca2+ -ATPase活性及鱼糜凝胶的破断强度、凹陷深度、压出水分和白度.结果表明:随冷冻-解冻循环次数增加,鳞鲀白肉鱼糜及全肉鱼糜蛋白的盐溶性和Ca2+ -ATPase活性均下降,表明鱼糜蛋白发生了变性;鱼糜凝胶的破断强度、凹陷深度及持水性也下降(白度除外).因此,在加工中应避免反复冷冻-解冻,以保证鳞鲀鱼糜质量.     

十二烷基硫酸铵对烟草多酚氧化酶的激活作用

本文对从新鲜烟叶中分离纯化了两种多酚氧化酶,分别命名为多酚氧化酶(PPO )和多酚氧化酶(PPO ),并对其活性做了深入研究,发现对大多数蛋白质有抑制作用的十二烷基硫酸钠(SDS)对其有激活作用。在SDS浓度为0.5mM的条件下,PPO 和PPO 的活性分别提高了50%和86%。在pH值为6.5,T=50℃时PPO 的活性达到最大,在此条件下加入SDS后PPO 的活性提高了29.6%。SDS与PPO 的物质的量比在1.2时,PPO 的活性达到最大。     

Isolation, chemical characteristics and immunity activity of an extracellular polysaccharide EPSⅠ isolated from Antarctic bacterium Pseudoalteromonas sp. S-15-13

A new extracelluar polysaccharide (EPS) was isolated and purified from Antarctic bacterium S-15-13, identified as Pseudoalteromonas sp. After being separated and purified by DEAE-Sephadex A-50 ionexchange and Sephadex G-100 gel chromatography, two mains fractions (EPSⅠ and EPSⅡ ) were obtained. EPSⅠ was composed of mannose, glucose and galactose with a molecular weight of 23kDa and EPSⅡ was composed of mannose only with a molecular weight of 62kDa. The effect of the polysaccharide EPSⅠ on the cellular immune response of mice was investigated. Results demonstrated that EPSⅠ could markedly facilitate lymphocyte proliferation, and might be a strong immunomodulator.     

甜叶菊化学成分及其甜度的研究

以工业化的提取分离工艺从甜叶菊干叶中分离提纯得到了甜菊糖苷粗品;利用正相硅胶层析柱以及葡聚糖凝胶、十八烷基硅烷键合硅胶、聚苯乙烯树脂等反相层析柱,分离纯化甜菊糖苷粗品得到5个化合物;再利用薄层层析色谱,质谱,核磁共振等分析手段对所得各单体进行了结构鉴定。结果表明分离得的5种化合物分别为6-羟基-11（β-D-吡喃葡萄糖基）-2-十二酮（-hydroxy-11-(β-D-glucopyranosyl)-2-cyclododecanone,Ⅰ）、莱鲍迪A苷（rebaudioside A,Ⅱ）、莱鲍迪B苷（rebaudioside B,Ⅲ）、莱鲍迪M苷（rebaudioside M,Ⅳ）和葡萄糖（glucose,Ⅴ）,其中单体Ⅰ为新的化合物。利用甜度定量预测模型对化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ进行甜度分析,其甜度分别为蔗糖的113.6、225.0、325.0、29.4倍。     

纤维素酶液中β-葡萄糖苷酶的分离纯化

通过(NH4)2SO4分级沉淀、HiPrep 26/10 Desalting脱盐柱、Source15Q阴离子交换柱、Source 15 S阳离子交换柱、HiTrap 16/60 Sephacryl S 200 HR凝胶过滤等技术,分离纯化3种来源里氏木霉、黑曲霉、里氏木霉与黑曲霉混合纤维素酶液中的β-葡萄糖苷酶。结果表明,经SDS PAGE电泳鉴定均为电泳纯,测得黑氏木霉、黑曲霉单独培养β-葡萄糖苷酶相对分子质量分别为68、129 ku,而混合菌培养分离得到两种β-葡萄糖苷酶分子质量大小分别为66.2、134 ku。与单独培养的β-葡萄糖苷酶相似。3种来源的β-葡萄糖苷酶经多步分离纯化后的纯化倍数分别为37.25、40.21、30.12,酶活回收率分别为20.1 2%、23.21 %、28.56 %。     

中华锯齿米虾卵黄蛋白的纯化鉴定

为了研究中华锯齿米虾卵黄蛋白的性质,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳,采用不同的染色方法对其进行分析鉴定,并采用电泳洗脱法从中华锯齿米虾成熟卵巢中将其分离纯化.研究结果表明,中华锯齿米虾成熟卵巢中的卵黄蛋白为糖脂复合蛋白,该蛋白分子质量为434 ku.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析该卵黄蛋白由3个主要亚基组成,分子质量分...     

梧桐花粉主要变应原的分离纯化

以离子交换和凝胶过滤层析对梧桐花粉变应原进行分离和纯化,采用生物素-链霉亲和素酶联免疫吸附分析法（BSA-ELISA）测定其抗原活性,得到两个具高活性的单一变应原组分PT13和PT53。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得它们的分子质量分别为20ku和18ku。     

地衣中酚酸类化合物研究

利用反复硅胶柱层析法、Sephadex LH-20、制备薄层层析法（PTLC）和重结晶等技术手段分离指状珊瑚枝地衣（Stereocaulon paschaleHoffm.）的化学成分.通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构,从指状珊瑚枝地衣的乙酸乙酯部位分离并鉴定3个酚类化合物,分别为赤星衣酸乙酯（uthyl haematommate,Ⅰ）、β-苔黑酚酸甲酯（methyl-βorcinolcarboxylate,Ⅱ）、赤星衣酸（haematommate acid,Ⅲ）.化合物Ⅰ~Ⅲ均为首次从指状珊瑚枝地衣中分离得到.     

折苞斑鸠菊中的黄酮类成分

用硅胶、反相硅胶、凝胶和薄层色谱等方法从折苞斑鸠菊(Vernonia spirei Gandog)甲醇提取物的乙酸乙酯部分中分离黄酮类成分,得到2个化合物,通过光谱和波谱分析,分别鉴定为:5,7,4’-三羟基-6,3-二甲氧基黄酮(Ⅰ)、5,7,4’-三羟基-6,3-二甲氧基黄酮(Ⅱ)。以上化合物均为首次从该植物中分离得到。     

鸡腿菇子实体多糖分离纯化和光谱分析

从鸡腿菇子实体中提取纯化多糖,鉴定其纯度并测定其结构.利用水浴浸提、乙醇沉淀多糖、TCA法去除蛋白质等工艺提取粗多糖;将得到的粗多糖通过DEAE-52柱层析和Sephadex G-200柱层析进行分离纯化,收集得到4个糖组分Ccp-Ⅰ-A、Ccp-Ⅰ-B、Ccp-Ⅱ-C和Ccp-Ⅱ-D;采用紫外分光光度计、红外光谱仪对多糖结构进行初步的光谱分析.     

西南鬼灯檠的化学成分研究

目的：对西南鬼灯檠化学成分进行初步研究。方法：采用溶剂法提取西南鬼灯檠的化学成分,常规硅胶柱层析、凝胶过滤层析和薄层色谱分离纯化,根据化合物的物理、化学性质和波谱解析鉴定了4个化合物。结果：4个化合物分别被鉴定为儿茶素（catechin,Ⅰ）、儿茶素-3—O-没食子酸酯（epicatechin-3—O-gallate,Ⅱ）、岩白菜素（bergenin,Ⅲ）和齐墩果酸（oleanoli cacid,Ⅳ）。结论：这4个化合物均是首次从西南鬼灯檠中分离得到。