重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂疗效观察

目的：评价重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂的疗效及安全性。方法：采用多中心、随机、双盲、基质平行对照试验，按病例接纳顺序随机表分治疗组120例、对照组90例，观察时间为6周。结果：重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂痊愈率50．0％，总有效率98．3％，与对照组比较，有显著性差异（P〈O．05）。结论：重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂有较好的临床疗效，使用方便安全。     

重组人干扰素α-2b工程菌培养条件的优化研究

对重组人干扰素α-2b工程菌的培养条件、诱导条件进行研究.提高菌体目标蛋白表达量.通过实验条件的优化确定了适合重组人干扰素α-2b表达的诱导温度、诱导时间和诱导收获时间等.改进工艺后,目的蛋白的表达量大大提高,为进一步的下游工艺的开发奠定了基础.     

重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂疗效观察

目的 评价重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂的疗效及安全性.方法 采用多中心、随机、双盲、基质平行对照试验,按病例接纳顺序随机表分治疗组120例、对照组90例,观察时间为6周.结果 重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂痊愈率50.0%,总有效率98.3%,与对照组比较,有显著性差异(P＜0.05).结论 重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂有较好的临床疗效,使用方便安全.     

重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂疗效观察

目的评价重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂的疗效及安全性。方法采用多中心、随机、双盲、基质平行对照试验,按病例接纳顺序随机表分治疗组120例、对照组90例,观察时间为6周。结果重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂痊愈率50.0%,总有效率98.3%,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论重组人α-2a干扰素栓治疗宫颈糜烂有较好的临床疗效,使用方便安全。     

重组人干扰素α-2b水针、粉针的稳定性及与干扰素标准品的比较研究

研究重组人干扰素α-2b(商品名:安福隆)的稳定性.采用细胞病变法(CPE)检测在4℃贮存条件下放置不同时段的干扰素α-2b水针、粉针和干扰素标准品的抗病毒能力,与标准品比较,评价了水针和粉针的稳定性.结果显示,在4℃的贮存条件下,干扰素α-2b水针和粉针的抗病毒能力基本相同;经两年贮存后,也没有明显地变化,且均比标准品抗病毒能力强.说明干扰素α-2b水针和粉针稳定性均较好,其辅料配方合理,可有效保护干扰素α-2b,减少其降解.     

按大肠杆菌高表达序列设计的人干扰素α-2b基因的化学合成和克隆

根据大肠杆菌高表达序列重新设计了人干扰素α-2b基因编码区的核苷酸序列,应用化学合成的方法合成了多个互补DNA片段,经互补片段分别退火和连接后,将完整编码区分两段分别克隆于pUC19质粒中,进行DNA序列分析,分别选取序列完全正确的两种克隆片段进行重组.获得了与设计序列完全一致的含有完整编码区的人干扰素α-2b基因.     

ASP—ChIFN-α融合基因的构建及表达

利用PCR技术从宁夏地方三黄肉鸡肝组织中扩增出α干扰素基因,构建成原核重组表达质粒pET-28a/(ChIFN-α从埃希氏菌属大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ(L-Asmraginase,ASP)信号肽基因,并与原核重组质粒pET-28a/ChIFN-α连接,构建成分泌型表达重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α将重组质粒经IPTG诱导5 h.用SDS-PAGE分析表达蛋白含量,并用鸡α-干扰素ELISA(Western-blot)试剂盒检测表达的重组蛋白的特异性.结果表明,包涵体型重组质粒pET-28a/ChIFN-α和分泌型重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α在23 kD处均表达出目的蛋白,蛋白含量分别为27%和38%,pET-28a/ASP-ChIFN-α的蛋白表达含量比pET-28a/ChlFN-α的蛋白表达含量要高出11%,表达的重组蛋白具有特异性.实验实现了鸡α-干扰素成熟蛋白基因的高效表达,筛选出了可应用于临床的鸡α-干扰素高效表达菌株BL21(DE3)(pET-28a/ASP-ChIFN-α).     

α一干扰素、异搏定协同逆转肾癌细胞药物耐受性

目的：探讨α-干扰素(α-IFN)、异搏定(VRP)对RCC-925肾癌细胞阿霉素敏感性的影响。方法：(1)将RCC-925肾癌细胞分别与不同浓度的逆转剂α-干扰素或异搏定或α-干扰素+异搏定及与不同浓度阿霉素(ADM)共同培养;MTT法检测肿瘤细胞的存活率。(2)图像分析仪检测逆转前后PgP(P-glycoprotein)表达。结果：单独应用α-干扰素无逆转作用;联合应用α-干扰素、异搏定显著逆转肿瘤细胞的耐药性,效果优于单用异搏定(P＜0．05);2．5 mg/L异搏定+500pg/mLα-干扰素共同与细胞作用后,PgP表达降低。结论：α-干扰素、异搏定作为逆转剂联合使用,能显著逆转RCC-925细胞的耐药性,可望为临床耐药肿瘤的治疗提供一种新的方法。     

脉冲电离子联合α-2b干扰素预防尖锐湿疣复发疗效探讨

为探讨脉冲电离子联合α-2b干扰素预防尖锐湿疣复发的疗效和作用机制，采用随机对比法，两组均电灼去掉疣体后，治疗组病损处注射α-2b干扰素，对照组全身肌注α-2b干扰素，比较4个月后复发率分别为8．9％和28．9％．提示电灼联合α-2b干扰素局部给药是降低尖锐湿疣复发率新的有效途径．     

重组人干扰素α-2b联合盐酸伐昔洛韦片治疗老年人带状疱疹临床疗效观察

目的观察比较重组人干扰素α-2b联合盐酸伐昔洛韦片与单用盐酸伐昔洛韦片治疗老年带状疱疹患者效果。方法将2010-2014年收治的66例带状疱疹患者随机分为观察组和对照组;观察组32例,对照组34例。观察比较两组患者接受治疗前后临床指标、治疗过程中副反应、临床疗效及带状疱疹后遗神经痛发生率等情况。结果 1观察组疗效明显优于对照组(P<0.05)。2治疗后,观察组疼痛评分低于对照组(P<0.05)。3治疗后,两组患者的后遗神经痛发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组人干扰素α-2b联合盐酸伐昔洛韦片治疗老年带状疱疹疗效优于单用盐酸伐昔洛韦片,且未增多药物副反应。但对减少带状疱疹后遗神经痛方面未发现明显效果。     

融合胸腺素α1的猪干扰素α在毕赤酵母中的表达及效价测定

猪干扰素α(IFN-α)是在特定条件下由细胞产生的一种具有广谱、高效抗病毒活性的可溶性糖蛋白,胸腺素α1(Tα1)是一种具有免疫调节的活性肽.本研究中将Tα1基因与去掉信号肽序列的猪IFN-αN端融合,构建酵母表达载体PHBM-Tα1-IFNα,同时构建单独表达IFNα的重组质粒PHBM-IFNα,重组质粒电转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株,甲醛诱导表达.利用SDS-PAGE法检测融合蛋白的表达,并用细胞病变抑制法测定干扰素的效价.实验结果表明,酵母表达上清中IFNα的效价为2.916×10~6U/m L;Tα1-IFNα的效价为2.860×10~7U/m L,该结果证实胸腺素α1可提高融合表达蛋白猪干扰素的活性,因此,通过酵母表达体系获得高活性胸腺素-猪干扰素融合蛋白,可为高效、低成本获得抗病毒药物提供一种新的模式.     

α—干扰素、异搏定协同逆转肾癌细胞药物耐受性

目的：α－干扰素（α－ＩＦＮ）、异博定（ＶＲＰ）对ＲＣＣ－９２５肾癌细胞阿霉素敏感性的影响。方法：（１）将ＲＣＣ－９２５肾癌细胞分别与不同浓度的逆转剂α－干扰素或异搏定或α－干扰素＋异搏定及与不同浓度阿霉素（ＡＤＭ）共同培养;ＭＴＴ法检测肿瘤细胞的存活率。（２）图像分析仪检测逆转前后ＰgP(P-glycoprotein)4表达。结果：单独应用α－干扰素无逆转作用,联合应用α－干扰素、异搏定显著逆转肿瘤细胞的耐药性,效果优于单用异搏定（Ｐ＜０．０５）;２．５mg/L异搏定＋５００pg/mLα－干扰素共同与细胞作用后,PgP表达降低。结论：α-干扰素、异搏定作为逆转剂联合使用,能显逆转RCC－925细胞的耐药性,可望为临床耐药肿瘤的治疗提供一种新的方法。     

重组人干扰素α-1b和利巴韦林治疗儿童手足口病疗效对比研究

目的:探讨重组人干扰素α-1b治疗儿童手足口病的疗效和安全性。方法:将388例手足口病患儿随机分为两组,两组患儿给予相同的对症和支持治疗。治疗组184例用重组人干扰素α-1b肌肉注射,1岁1 ug/(kg·d),2~10岁10 ug/d,1次/d;对照组204例用利巴韦林〔10~15 mg/(kg·d)〕静脉滴注。结果:治疗组与对照组比较,在退热时间,手足皮疹及口腔溃疡愈合方面均优于对照组(P0.01),除个别患儿有发热外,治疗组未发现明显副作用。结论:干扰素治疗儿童手足口病安全有效,值得临床推广使用。     

rhIFNα2b与EDQM rhIFNα2b化学参比物质结构对比研究

通过高分辨率分子量、圆二色谱、氨基酸组成、质量肽图、N-末端序列、反相纯度研究,进行重组人干扰素α2b(rhIFNα2b)与欧洲药品质量管理局(EDQM)rhIFNα2b化学参比物质(欧洲对照品)结构对比。     

按大肠杆菌高表达序列设计的入干扰素α—2b基因的化学合成和克隆

根据大肠杆菌高表达序列重新设计了人干扰素α—2b基因编码区的核苷酸序列，应用化学合成的方法合成了多个互补DNA片段，经互补片段分别退火和连接后，将完整编码区分两段分别克隆于pUC19质粒中，进行DNA序列分析，分别选取序列完全正确的两种克隆片段进行重组，获得了与设计序列完全一致的含有完整编码区的人干扰素α—2b基因。     

HPV感染重型宫颈病变患者应用LEEP联合重组人干扰素α-2b栓治疗的效果评价

目的探讨人乳头状瘤病毒(HPV)感染重型宫颈病变患者应用宫颈环形电切术(LEEP)联合重组人干扰素α-2b栓治疗的应用价值。方法选取2016年12月至2017年12月间于佛山市口腔医院诊治的HPV感染重型宫颈病变患者78例,按随机数字法分为对照组和观察组,其中采用LEEP术治疗的患者39例(对照组),采用LEEP术联合重组人干扰素α-2b栓治疗的患者39例(观察组)。比较两组临床疗效、HPV转阴率、围术期指标和并发症情况。结果观察组的治愈率及有效率、治疗后12周HPV转阴率均高于对照组,观察组患者复发率明显低于对照组;观察组患者术后创面愈合时间、阴道出血时间及阴道渗液时间均少于对照组;观察组术后并发症发生率明显低于对照组。以上对比均有统计学意义(p0.05)。结论应用LEEP联合重组人干扰素α-2b栓治疗HPV感染重型宫颈病变可提升疗效,减少阴道出血和渗液,促进切口愈合,减少并发症,降低复发率,值得在临床应用中推广。     

产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌的耐药性监测

目的：探讨大理地区产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌的耐药情况。方法：采用VITEK-32型全自动微生物鉴定仪将葡萄球菌属鉴定到种，头孢硝噻吩滤纸片法检测β-内酰胺酶，药物敏感试验采用K-B法。结果：61株金黄色葡萄球菌中产β-内酰胺酶13株，产酶率21．3％，产酶株对万古霉素最敏感，其次为左氧氟沙星，对其他抗生素的耐药率前四位分别是氨苄西林92．4％，青霉素G92-4％，红霉素84．7％，克林霉素69.3％。结论：金黄色葡萄球菌的β内酰胺酶检测应作为常规项目开展，产β-内酰胺酶的金黄色葡萄球菌对青霉素类，大环内酯类抗生素高度耐药，万古霉素无耐药菌株，为首选药物，应在药敏试验指导下合理选用抗生素。     

重组猪α-干扰素的纯化及生化性质鉴定

对巴斯德毕赤酵母高效分泌表达的猪α-干扰素(PoIFN-α)纯化工艺和纯化后重组蛋白的部分生化特性进行了研究,结果表明:猪α-干扰素(PoIFN-α)发酵液经离心、透析、过滤处理之后,依次利用亲和层析和离子交换层析使目的蛋白得到了纯化.经N端氨基酸测序,Westem-blot,对酸、热、巯基乙醇的稳定性和糖基化程度等检测后发现,所表达的猪α-干扰素N端氨基酸序列(前5个)正确,对酸和热基本稳定,二硫键对目的蛋白的活性至关重要,没有发现目的蛋白的糖基化.     

重组人干扰素α2b和胸腺肽αl融合蛋白的分离纯化

考察了大肠杆菌E.coli表达的重组人干扰素α2b和胸腺肽αl融合蛋白包涵体的变性、复性及融合蛋白的分离纯化过程。实验结果表明：包涵体经7mol/L盐酸胍,10mmol/L DTT变性;1mol/L尿素,2mmol/L还原型谷胱甘肽,0.2mmol/L氧化型谷胱甘肽脉冲加样稀释复性;金属螯合层析收集0.3mol/L咪唑洗脱峰,冷干后经重组肠激酶30℃酶切24h、Sephadex G50 柱纯化,可得到纯度达90%的重组人干扰素α2b和胸腺肽αl融合蛋白,且最终目的融合蛋白产量达68mg/g干菌体。     

中华绒螯蟹弧菌病及病原检验

对一起自然发生的中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis H．Milne-Edwards）病例进行了检验,结果表明该病是由鳗利斯顿氏菌（Listonella anguillarum）所引起的病害。对从病（死）蟹肝胰腺中分离做纯培养的6株菌（HF010522-1至HF010522-6）进行了形态特征、主要理化特性等方面的鉴定;同时,选择代表菌株（HF010522-1）对健康蟹进行了人工感染试验,结果显示出较强的致病作用;另外,测定了HF010522-1菌株的16S rRNA基因序列、构建了系统发育树;选用37种抗菌类药物对3株菌做药敏试验,结果均表现对头孢噻肟等31种药物呈现敏感或高度敏感、对头孢拉啶低度敏感、对青霉素G等5种耐药。