纯化抗原半定量检测幽门螺杆菌感染

目的：鉴定并提取幽站螺杆菌（Ｈｐ）特异性抗Ｈｐ抗体的半定量免疫酶技术。方法：１０株Ｈｐ可溶性蛋白用于十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹分析，凝胶怪析提取特异性抗原，方阵滴定建立免疫酶方法。纯化怕与全菌抗原同批检测１３６例患，以免疫印迹分析作为金标准。结果：Ｈｐ主要特异性怕分子量为６６０００，６９０００，３１０００和２５０００，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析第１提取物含其中三种怕成分。     

结核分支杆菌H37Rv株抗原成份分析

通过免疫印迹技术（Western blotting），用结核杆菌的单克隆抗体及兔抗结核菌多克隆抗体对结核分支杆菌H37Rv的菌体蛋白和培养液蛋白成份进行了初步分析，发现固体培养菌与液体培养菌的菌体具有基本一致的多肽抗原成份，而培养液中的抗原成份与前两者差异稍大。通过筛选和鏊定结核分枝杆菌的特异性和保护性抗原，研究结核杆菌的免疫反应特点，为探索结核病的诊断和治疗的新途径奠定了一定的基础。     

催化杀虫剂西维因水解的抗体酶制备

以杀虫剂西维因酯解反应中间过渡态的结构信息进行分子设计，合成了α－萘基磷酸氢酯半抗原，将其与载体蛋白牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和鸡卵清蛋白（ＣＥＡ）偶联，制得了具有不同抗原价（４－２２）的合成抗原，经小鼠免疫学实验，优选出可产生滴度高，特异性强之抗血清的免疫用抗原（Ｈａｐ－ＢＳＡ）经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定，用该免疫原制得的鼠抗血清滴度可达１：３２０００优选的Ｈａｐ－ＢＳＡ可被用作产生催化相     

催化杀虫剂西维因水解的抗体酶制备(Ⅰ)抗原的分子设计、合成与优选

以杀虫剂西维因酯解反应中间过渡态的结构信息进行分子设计，合成了α－萘基磷酸氢酯半抗原，将其与载体蛋白牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和鸡卵清蛋白（ＣＥＡ）偶联，制得了具有不同抗原价（４～２２）的合成抗原．经小鼠免疫学实验，优选出了可产生滴度高、特异性强之抗血清的免疫用抗原（Ｈａｐ－ＢＳＡ）．经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定，用该免疫原制得的鼠抗血清滴度可达１∶３２０００．优选抗原Ｈａｐ－ＢＳＡ可被用作产生催化西维因水解之抗体酶的免疫原．     

免疫核糖核酸作用机制的研究──免疫核糖核酸传递抗绵羊红血球免疫力

本文用热酚法从 ＳＲＢＣ致敏的豚鼠的牌和淋巴结提取了免疫核糖核酸（简称ｉＲＮＡ）。该ｉＲＮＡ能够传递抗ＳＲＢＣ的体液免疫反应。核糖核酸酶能破坏其活性，但蛋白酶和脱氧核糖核酸酶对其活性没有影响。用抗 ＳＲＢＣ的 ｉＲＮＡ和抗 ＣＲＢＣ（鸡红血球）的 ｉＲＮＡ的实验表明，ｉＲＮＡ的免疫功能传递作用既有抗原特异性也有非抗原特异性。对ｉＲＮＡ作用的特异性进行了讨论。     

气味沙雷氏菌（Serratia odorifera）核糖体16ku组分的分离和体？…

将气味沙雷氏菌（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｏｄｏｒｉｆｅｒａ）核糖体与该核糖体抗血清进行免疫印迹方法（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ），发现分子质量为１６ｋｕ的蛋白质与抗血清有特异怀免疫反应。用制备电泳从核糖体中分离得到１６ｋｕ组分，发现其特异性免疫活性依然存在，同时对荷Ｓ１８０实体瘤小鼠有明显的保护作用，对荷瘤小鼠的巨噬细胞和巨噬细胞和Ｔ淋巴细胞增殖活性有激活作用，并能刺激体内ＮＫ细胞，使之产生ＮＫ活性，且作     

工程菌表达马铃薯钙调素(PCM 6)的抗体制备及鉴定

PCM6是马铃薯钙调素亚型中与其他植物钙调素在氨基酸序列上最为保守的一种，利用大肠杆菌表达系统，表达并纯化了这种蛋白，以纯化的重组马铃薯CaM(PCM6）蛋白为抗原，免疫新西兰兔，获得了高效价（1：16000）抗体，免疫印迹检测表明，制备的抗体与植物钙调素有特异性的免疫交叉反应。     

牦牛肝片吸虫四种抗原交叉免疫印迹分析

用牦牛肝片吸虫四种抗原分别制备四种抗血清，其ＥＳＩＳＡ效价 １：８００，１：１６００，１：３２００和１：８００．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳区带组分分别为２５，２４，１８和９条带；免疫印迹结果，各种抗清与相庆抗原作用的主要抗原成份分别为５，１０，７和３；四种抗原中存在的共同抗原为１７．２ｋＤ；特征抗原ＨＡ为２９．９ｋＤ，ＳＡ为２７．２ｋＤ的２４．３ｋＤ；正常兔血清与各个抗原间均未出现免疫反应。     

腐食酪螨和粉尘螨的共同抗原

目的：探讨腐食酪螨和粉尘螨之间是否存在共同抗原.方法：对粉螨过敏患者进行腐食酪螨和粉尘螨特异性IgE相关性分析，用SDS-PAGE分析腐食酪螨和粉尘螨变应原，并对螨特异性IgE阳性血清进行免疫印迹试验及抑制试验.结果：42例粉螨过敏患者血清粉尘螨和腐食酪螨特异性IgE光密度值相关性较高（r=0.641 5，P＜0.01）.SDS-PAGE分析知腐食酪螨和粉尘螨变应原分子量均为10 kD～110 kD.免疫印迹抑制试验表明，腐食酪螨变应原可与粉尘螨变应原发生交叉反应.结论：腐食酪螨和粉尘螨间存在共同抗原.     

气味沙雷氏菌(Serratia odorifera)核糖体16ku组分的分离和体内抑瘤及免疫增强作用

将气味沙雷氏菌（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｏｄｏｒｉｆｅｒａ）核糖体与该核糖体抗血清进行免疫印迹反应（Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ）,发现分子质量为１６ ｋｕ 的蛋白质与抗血清有特异性免疫反应．用制备电泳从核糖体中分离得到１６ ｋｕ 组分,发现其特异性免疫活性依然存在,同时对荷Ｓ１８０ 实体瘤小鼠有明显的保护作用,对荷瘤小鼠的巨噬细胞和Ｔ 淋巴细胞增殖活性有激活作用,并能刺激体内ＮＫ 细胞,使之产生ＮＫ 活性,且作用时间较菌苗更持久．研究结果表明,１６ｋｕ 组分能通过刺激机体的免疫功能抑制肿瘤细胞的生长,是气味沙雷氏菌中抗肿瘤有效成分     

痢疾志贺氏菌8型O-抗原基因簇的破译和特异基因的筛选

志贺氏菌是引进细菌性痢疾的重要病原菌，尤其对发展中国家卫生条件不平衡的地区，可造成爆发性流行．本研究用鸟枪法对痢疾志贺氏菌8型的O—抗原基因簇进行测序，得到序列全长为9227bp．用生物信息学的方法进行序列分析，共发现7个基因，分别是：单糖合成基因gne，糖基转移酶基因(4个)；O—抗原转运酶基因wzx和O—抗原聚合酶基因wzy．并用PCR的方法筛选出了针对痢疾志贺氏菌8型细菌的特异基因，可以用于基因芯片或PCR方法对痢疾贺氏菌8型细菌的快速检测．     

肝细胞癌特异抗原的筛选

应用重组克隆表达抗原的血清学鉴定技术,从广西肝细胞癌中初步筛选出９个基因克隆,与肝癌患者及其他人血清的反应证明对肝癌有特异性。ＤＮＡ测序结果与基因库核对,发现其中７个有同源结构;２个为无同源结构的新分子。     

结核分枝杆菌特异性抗原的N末端氨基酸序列分析

把ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ分析抗原抗体反应的高度特异性与ＰＶＤＦ膜作为载体进行蛋白质氨基酸序列分析的高度敏感性相结合对结核分枝菌的特异性抗原表位刊物筛选和分析鉴定,获得了一个分子质量为３１ｋｕ,Ｎ末端为ＡｌａＧｌｕＶａｌＡｓｐＬｅｕＶａｌＰｈｅＡｌａＶａｌＳｅｒＴｒｐＰｒｏＶａｌＧｌｙ的结核分枝杆菌抗原。     

Sperm antigen MSH27 participates in sperm-egg membrane fusion

A monoclonal antibody (mAb), MSH27 has been selected from an mAb library which has been prepared with separated mouse sperm heads as antigens. Three aspects of evidence indicated that the MSH27 antigen was involved in the process of sperm-egg membrane fusion. After the acrosome reaction, the antigen was located at sperm equatorial segment and in postacrosomal area, where, it was widely accepted, the sperm-egg membrane fusion initially occurred. In in vitro fertilization, the MSH27 antibody could decrease the index of sperm-egg membrane fusion, but made no effects on sperm approaching and binding to the plasma membrane of eggs. The inhibition showed an antibody concentration-dependent manner, with a rate decrease of 90% at 600 μg/mL immuno-globulin lgM. Furthermore, the antigen was able to affect the sperm-egg membrane fusion directly. The fusion index was obviously reduced after the zona-free eggs were exposed to the antigen purified by immuno-affinity chromatography. These, all together, demonstrated that the MSH27 antigen played an important role in sperm-egg membrane fusion.     

印迹膜测序法分析结核分枝杆菌抗原蛋白

把WesternBlot技术分析抗原抗体反应的高度特异性与用PVDF膜作载体进行蛋白质氨基酸序列分析的高度敏感性相结合对结核分枝杆菌 (Mycobacteriumtuberculosis,TB)的特异性、保护性抗原进行筛选和分析鉴定 ,获得了分子量为 31KDa、30KDa的抗原 这两种抗原与抗结核分枝杆菌的单克隆抗体和结核病人血清均发生阳性反应 ,而与正常小鼠血清和健康人血清呈阴性反应 用印迹膜测序法测出 31KDa抗原蛋白的N 末端序列为AlaGluValAspTrpLeuValPheAlaValSerTrpProValGly ,30KDa蛋白序列为PheSerArgProGlyLeuProValGluTry 印迹膜测序为分子生物学研究提供了一种有效的新途径     

大肠杆菌O96 O-抗原基因簇的破译和特异基因的鉴定

大肠杆菌O96血清型的大肠杆菌近年来频繁地出现于分离到的致病菌株中,在发展中国家和发达国家均有发现,有造成爆发性流行的可能．本文利用鸟枪法对大肠杆菌O960～抗原基因族进行测序,序列全长9415bp,用生物信息学的方法进行序列分析,共发现7个基因,分别是：吡喃型UDP-半乳糖变位酶基因(glf),O-抗原转运酶基因(wzx),O-抗原聚合酶基因(wzy)和糖基转移酶基因(4个)．本文分析了大肠杆菌O96和K12(016)的O-抗原基因族中吡喃型UDP-半乳糖变位酶基因和O-抗原转运酶基因的进化关系,确定了吡喃型UDP-半乳糖变位酶的基序;用PCR的方法筛选出了2个针对大肠杆菌O96的特异基因,可以用于基因芯片或PCR方法快速检测大肠杆菌O96。     

Actin-based motility of vaccinia virus mimics receptor tyrosine kinase signalling.

Studies of the actin-based motility of the intracellular pathogens Listeria monocytogenes and Shigella flexneri have provided important insight into the events occurring at the leading edges of motile cells. Like the bacteria Listeria and Shigella, vaccinia virus, a relative of the causative agent of smallpox, uses actin-based motility to spread between cells. In contrast to Listeria or Shigella, the actin-based motility of vaccinia is dependent on an unknown phosphotyrosine protein, but the underlying mechanism remains obscure. Here we show that phosphorylation of tyrosine 112 in the viral protein A36R by Src-family kinases is essential for the actin-based motility of vaccinia. Tyrosine phosphorylation of A36R results in a direct interaction with the adaptor protein Nck and the recruitment of the Ena/VASP family member N-WASP to the site of actin assembly. We also show that Nck and N-WASP are essential for the actin-based motility of vaccinia virus. We suggest that vaccinia virus spreads by mimicking the signalling pathways that are normally involved in actin polymerization at the plasma membrane.     

四环素人工抗原的合成与鉴定

采用碳二亚胺法将四环素半抗原与载体蛋白BSA连接制备人工免疫抗原,并用同样方法将四环素与载体蛋白OVA连接制备人工包被抗原.经紫外扫描分析和动物免疫试验证实人工抗原合成成功,为检测试剂盒的研制奠定了基础.     

几种寄生虫抗原组分的SDS-PAGE电泳比较分析

通过提取制备猪带绦虫、猪囊尾蚴虫体、猪囊虫囊液、多房型束球绦虫、肝片吸虫、细颈囊尾蚴、细颈囊尾蚴囊液和羊绦虫等8种寄生虫抗原，运用SDS－PAGE电泳法比较各种抗原的蛋白质的组成，不连续SDS－PAGE电泳结果显示猪带绦虫、猪囊尾蚴虫体、猪囊虫囊液、多房示绦虫、肝片吸虫、细颈囊尾蚴、细颈囊尾蚴囊液和羊绦虫等几种抗原的蛋白质在凝胶中分别有31，23，18，17，21，22，8和24条带，分子量在13kD-134kD之间，8种抗原的电泳带之间既有相似性又有特异性，其抗原的共同蛋白质亚基带的分子量为63kD,38kD和24kD。