辐照交联改性透明质酸的研究

采用高能γ射线改性透明质酸(HA),先将甲基丙烯酸缩水甘油酯(GM)接枝到透明质酸去离子水溶液形成GMHA衍生物,再将GMHA衍生物配置成不同质量分数的溶液进行辐照改性交联。该方法制备的透明质酸凝胶分子量从10万增加到100万,透明质酸溶胀比变小;随着质量分数的上升,透明质酸凝胶的溶胀比急剧下降,GMHA质量分数1％～15％的变化能引起透明质酸溶胀性从150g/g减小到20g/g;当辐照剂量增加时,单位时间内产生的自由基数量增加从而提高交联度。因此可以通过控制这些影响因素来实现透明质酸改性的交联度可控。     

辐照交联透明质酸的降解特性研究

用甲基丙烯酸缩水甘油酯（GM）对透明质酸（HA）进行接枝改性,制备交联透明质酸衍生物（GMHA）,通过辐照获得透明质酸凝胶。分光光度计测定吸光度表明所制备的HA凝胶是一种可降解的生物材料。其稳定性受到制备条件和环境条件的影响：如HA的分子量为70万时在相对长时间内比分子量为10万时表现的相对稳定;当分子量相同,辐照剂量为1kGy时降解明显,辐照剂量为5kGy时表现出较好的稳定性;HA凝胶在中性环境条件下容易引起降解,在pH=4时表现的相对稳定;中低温度有利于HA凝胶的稳定,在高温50℃时降解迅速。     

颗粒化交联透明质酸钠凝胶的制备及其抗酶解性能

选用聚乙二醇20 000为交联剂,制备交联透明质酸钠凝胶,经醇沉、干燥、间歇瞬时制粒、颗粒分级、复溶、灭菌一系列工艺得到颗粒化的交联透明质酸钠凝胶.以凝胶的抗酶解率为指标,采用正交试验考察乙醇加入量、干燥温度及干燥时间对制备工艺的影响.得到颗粒化凝胶的最佳制备工艺条件为:加入95%乙醇量为凝胶体积的6.5倍,沉淀在50.0℃下干燥5.0h.所得的颗粒化交联透明质酸钠凝胶抗酶解率为80.53%,透明质酸钠水凝胶抗酶解率为38.54%.     

鸡冠中透明质酸提取工艺条件的研究

以新鲜公鸡冠为原料对透明质酸的提取方法进行研究.以透明质酸得率为指标,确定采用乙醇处理为最佳方法,选择乙醇体积分数、料液比、提取时间为影响因素,通过单因素和正交试验确定了透明质酸的最佳提取条件:透明质酸提取液与乙醇体积比为1∶2;乙醇体积分数为85％;提取时间为26 h,得到该工艺条件下制备的透明质酸得率为4.84％.通过紫外光谱法检测,显示该提取物质与标准品峰形位置一致,确定该提取物质是透明质酸.     

透明质酸发酵流加过程的研究

研究了透明质酸发酵的流加过程,对碳源的简单分批流加、指数流加、前中期指数流加+后期控制糖浓度的流加以及前期指数流加+中期控制糖浓度的流加这四种不同流加方式进行了探讨,得到最佳流加方式,透明质酸发酵水平稳定在4g/L以上。     

响应曲面法优化鸡冠中透明质酸提取工艺条件

对乙醇浸泡鸡冠并提取其中透明质酸的方法进行研究,通过单因素和相应曲面实验考查了提取时间、乙醇体积分数、料液比对透明质酸得率的影响,确定了乙醇处理鸡冠中透明质酸的最佳工艺条件为:提取时间为25.70 h、乙醇体积分数90.00%、料液比100∶177(g/mL),在此条件下制备透明质酸的得率为27.31%.通过对该物质进行紫外光谱检测,显示该提取物质与标准品出峰位置一致,确定该提取物质是透明质酸.     

高产不同分子量透明质酸工程菌株的构建

透明质酸(hyaluronic acid,HA)是一种高分子糖胺聚糖,其生理功能与其分子量大小密切相关,可广泛应用于眼科学、整形手术和化妆品等领域.目前,工业上普遍利用遗传背景清楚且是公认安全菌株(如枯草芽孢杆菌等)生产HA.通过导入外源透明质酸合酶基因hasA并共表达HA合成途径相关基因,得到一株生产HA的枯草芽孢杆菌.构建的菌株在不同温度下产生不同分子量和产量的HA,其中在32 ℃条件下培养获得的HA分子量最低,为0.392 MDa,其产量可达到3.65 g/L;在47 ℃条件下培养获得的HA分子量最高,为6.937 MDa,但其产量仅为1.72 g/L.本研究提供了一种新的策略来实现不同分子量透明质酸的生产.     

浓度对凝胶色谱法测定低分子透明质酸钠分子量的影响

目的：考察样品浓度对凝胶色谱法低分子透明质酸分子量的影响。方法：色谱条件为：0.71%Nacl溶液作流动相,流速1ml/min;柱温35℃;进样量20μl。在此条件下,改变标准品及样品的浓度。结果：实验结果表明：浓度对多糖标准品的色谱峰形影响不大,分子量较低的标准品浓度越低,基线不平稳造成的干扰越明显;浓度对分子量较低的透明质酸钠样品的色谱峰形影响不大;浓度对分子量较高的透明质酸钠样品的色谱峰形影响很大,浓度越小,峰形越好。改变浓度,对分子量的测定结果基本没有影响。结论：重均分子量高于1.7×105透明质酸钠,采用的浓度应低于0.1%。样品分子量越大,采用的浓度应越低。     

透明质酸合成酶2真核表达载体的构建及表达

构建了透明质酸合成酶2真核表达载体,并观察其在真核细胞中的表达。利用RT-PCR法从MG63细胞总RNA中扩增,获得人透明质酸合成酶2cDNA,并克隆至真核表达载体pEGFP-N3,将经双酶切鉴定和DNA测序证实的阳性重组子命名为pEGFP-N3-HAS2。脂质体法转染HEK293细胞,用倒置荧光显微镜检测、分析其在HEK293细胞表达及定位。双酶切鉴定和DNA测序证实成功构建pEGFP-N3-HAS2真核表达载体。转染HEK293细胞后可见HAS2-EGFP融合蛋白高表达并定位于浆膜。该载体的成功构建为进一步探讨透明质酸合成酶2在治疗骨性关节炎、修复关节软骨缺损中的应用价值奠定了基础。     

透明质酸改性PHBV组织工程纳米纤维支架的研究

组织工程支架材料表面性质对细胞的黏附起着重要作用,进而影响细胞的增殖、分化等一系列生长过程.本研究采用天然生物大分子透明质酸(hyaluronic acid,HA)对聚(3-羟基丁酸酯-co-3-羟基戊酸酯)(Poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate),PHBV)进行表面修饰以提高材料的表面生物活性.首先通过静电纺丝法制备PHBV纳米纤维支架,利用1,6-己二胺胺解在PHBV表面引入自由胺基,并以此为反应活性位点在水溶性的碳化二亚胺/N-羟基琥珀酰亚胺缩合剂体系中将透明质酸固定接枝在PHBV表面.SEM结果表明,静电纺丝制备的PHBV纳米纤维支架表面平滑程度高,纤维直径分布较均匀,且没有串珠;FTIR证明1,6-己二胺改性及透明质酸接枝改性PHBV纳米纤维支架材料均成功实现;茚三酮法表明PHBV表面胺基密度随胺解时间增加而增大,在胺解约50min时达到最大值;水接触角法表明固定接枝透明质酸后,表面亲水性明显改善;细胞实验表明透明质酸改性的PHBV纳米纤维支架可显著促进软骨细胞的体外增殖.综上所述,透明质酸改性的PHBV纳米纤维支架可望应用于软骨组织工程领域.     

聚丙烯酸钠的合成研究

以水为溶剂,过硫酸铵-亚硫酸钠(APS—SHS)为引发体系,合成了系列聚丙烯酸钠(PAANa),探讨了聚丙烯酸钠分子量的影响因素．结果表明：通过控制单体浓度、反应温度、反应时间等因素,可以得到相对低分子量的聚丙烯酸钠．     

花背蟾蜍角膜早期形态发生中透明质酸的合成变化及其与角膜分化的关系

本文以花背蟾蜍的胚胎(19～25期)为材料,采用放射自显影技术,以~3H—氨基葡糖标记氨基多糖,并用链霉菌透明质酸酶和睾丸透明质酸酶处理作对照,在光镜水平上研究了透明质酸在角膜早期形态发生中合成变化。结果表明:透时质酸的产生及消除与角膜的形成及分化有相应的关系,在内角膜基质原基开始形成的第20期,即间充质细胞向预定角膜上皮与晶状体之间迁移之际,透明质酸的合成量达到最高水平,此后透明质酸的合成量逐渐减少到最低水平,这相应于角膜上皮开始变薄、透明及分化。本文就透明质酸在角膜早期形态发生中的作用机制进行了初步讨论。     

猪皮透明质酸的制备研究

透明质酸是葡萄糖醛酸和 N-乙酰氨基葡萄糖的双糖交联形成的一种高分子均聚糖 ,广泛应用于临床医学和高级化妆品生产 .本文报告以新鲜猪皮为原料 ,采用酶解法制备高纯度透明质酸的初步工艺 ,为猪皮透明质酸的扩大生产提供实验依据     

海参内脏酶解制备海参肽工艺

以蛋白水解度和酶解液中海参肽相对分子质量的分布作为指标,考察不同蛋白酶的酶解效果,筛选水解海参内脏的最适合蛋白酶,并通过单因素实验和正交实验优化酶解工艺.实验结果表明:胰蛋白酶的水解效果最佳,可用于水解海参内脏制备海参肽;在底物质量分数为1.0%,加酶量为0.375 1 mkat·g^-1,pH值为8.0,酶解温度为37 ℃,水解时间为5 h的最优酶解条件下,海参内脏的水解度可达到48.90%,酶解液中的多肽(2 000~5 000 u)质量分数为52.68%,寡肽(含氨基酸)(≤2 000 u)质量分数为47.25%.     

醇盐水解法制备单分散球形SiO2微粒

运用扫描电镜、透射电镜、激光粒度仪等测试手段，研究了以正硅酸乙酯为原料，用醇盐水解法制备ＳｉＯ＿２超微颗粒的微粒形成机理。通过控制催化剂浓度及反应温度等工艺条件，使硅酸单体浓度尽可能高而仅低于临界过饱和度，制得了单分散球形ＳｉＯ＿２超微颗粒，粒径为６０～５００ｎｍ。同时将加料速率、陈化时间等因素对微粒粒度及其分布的影响作了研究。     

The Flow Behavior of Poly（m-Phenyleneisophthalamide） Concentrated Solution

IntroductionPoly(m-phenyleneisophthalamide)(PMIA)fibers arei mportant materials with excellent ther mal and oxidativestability,flame resistance,and dielectric properties.Thedecomposition temperature of PMIA is400430℃andeven under this temperature it releases little har mful gases.Unlike flame-retardant treated materials,PMIAfibers areinherently flame resistance and it will not di minish duringthe life of the fiber.The fiber s low tenacity and highelongation give it textile-like character…     

大米的酸催化水解及焦糖化条件研究

在酸性条件下水解大米粉,其中的碳水化合物降解为分子量较小的还原糖,然后与碳酸铵反应,制备焦糖色素．实验结果表明最佳水解条件为：液固比等于4．5,盐酸用量为3．5%,反应温度为100℃左右,反应时间为3．5h水解产物中还原糖（以葡萄糖计）的量可以达到大米质量的82％焦糖化反应最佳条件为：碳酸铵用量占大米的10％,反应时间为3h,反应温度为100℃左右．制得的焦糖溶液可以分散到5％乙醇溶液、20％NaCl溶液、4％醋酸溶液、铂柠檬酸溶液、磷酸溶液和可口可乐饮料中．制得的焦糖溶液与1％单宁溶液作用会部分形成沉淀．     

水解制备超高相对分子质量阴离子聚丙烯酰胺

系统研究了水解浓度，水解温度，水解时间等因素对聚丙烯酰胺水解制备阴离子聚丙烯酰胺相对分子质量的影响，并采用正交试验法确定了最佳工艺条件，通过实验得到了验证。     

不同组织来源透明质酸的分离纯化及收率比较

以鸡冠和人脐带为原料，分别利用水浸提乙醇沉淀法以及酶解法提取透明质酸粗品．前者经DEAE-纤维素纯化得高纯度的透明质酸，后者经乙酸钠纯化得纯品．经测定，红外扫描图谱与文献报道一致．