达乌尔黄鼠(Spermophilus dauricus)冬眠启动过程中枢生长抑素信号对HPA轴的抑制

生长抑素作为一种具有广泛抑制性作用的多肽类激素,对多种激素及机体功能均具有抑制作用。为探索冬眠动物冬眠启动过程中枢生长抑素信号系统的变化及其影响,实验选择典型的贮脂类冬眠动物达乌尔黄鼠为研究对象,按照其状态分为快速育肥期、育肥完成期、冬眠期3个时期,分析下丘脑-垂体-肾上腺轴及生长抑素信号在冬眠启动过程中的变化。采用免疫组织化学法检测下丘脑生长抑素神经元平均光密度及垂体促肾上腺皮质激素水平和生长抑素受体2的表达,采用放射性免疫法检测血清皮质醇的浓度及测定肾上腺质量。结果显示：冬眠启动过程中下丘脑生长抑素神经元平均光密度无显著变化,垂体生长抑素受体2的表达量在育肥完成期最高,显著高于冬眠期和快速育肥期;垂体促肾上腺皮质激素和血清皮质醇浓度变化趋势相同,从育肥完成期到冬眠期呈下降趋势,且冬眠期显著降低;育肥完成期肾上腺质量显著下降。提示冬眠启动过程中下丘脑-垂体-肾上腺轴受到抑制,中枢生长抑素信号具有重要调节功能。     

达乌尔黄鼠冬眠模式年龄性别差异的实验研究

野外环境中达乌尔黄鼠冬眠的模式存在年龄性别的差异,为研究这种差异是否与冬季可利用的能量有关,我们将动物按年龄和性别分为成年雄性、成年雌性、亚成年雄性和亚成年雌性4组,在实验室条件下监测冬眠前能量贮存和冬眠季节冬眠模式和体重的变化.结果表明:达乌尔黄鼠的入眠和出眠时间基本为先雄性后雌性,先成年后亚成年;成年黄鼠冬眠季节的持续时间和深冬眠的累计时间短于亚成年组,与野外的研究基本一致.代表能量贮存量的最大体重值为成年大于亚成年,雄性大于雌性;最大体重出现时间也是先雄性后雌性,先成年后亚成年,这与冬眠模式的年龄性别差异相一致.达乌尔黄鼠冬眠模式的年龄性别差异本质上可能受体内能量的贮存状况的影响,黄鼠能够利用可利用的能量减少冬眠表达.     

环境温度对达乌尔黄鼠冬眠模式和能量消耗的影响

为研究环境温度对动物冬眠的影响,在实验室不同环境温度下((5±2)℃,(15±2)℃,(25±2)℃)用植入式半导体元件记录了达乌尔黄鼠冬季的体温,监测了冬眠模式及能量消耗。结果显示环境温度不同时,达乌尔黄鼠冬眠的模式和能量消耗均有显著差异。在5℃下,动物均表现为深冬眠型;15℃下,动物表现为深冬眠型和少冬眠型;25℃环境下动物表现为较多少冬眠型和少量不冬眠型。在5、15和25℃冬眠期间总能量消耗分别为(3 722±217.82)kJ,(18 907±2 895.07)kJ,(30 542±2 146.40)kJ,差异显著(F(2,22)=45.198,P=00.01)。提示在冬眠动物的冬眠季节,从能量学角度来看,高的环境温度并不利于动物的越冬。     

脑室注射6—羟多巴胺对达乌尔黄鼠睡眠—觉醒周期的影响

脑室注射6-羟多巴胺(200ug)引起达乌尔黄鼠总睡眠时增加,占总记录时的87.4％,对照为82.2％慢波睡眠与总睡眠时比值显著增加,占总睡眠时的92.4％对照为79.6％。异相睡眠与总睡眠时比值显著减少,占总睡眠时的7.7％,对照为20.4％。这一现象和前人所发现的在自然入眠期冬眠动物睡眠—觉醒周期改变相似无疑,脑室注射6-羟多巴胺后这种睡眠—觉醒周期改变,尤其是慢波睡眠时间增加有利于动物进入冬眠状态,同时也间接说明在自然情况下冬眠动物入眠可能存在着一种“自我去交感”机制。     

达乌尔黄鼠冬眠模式个体差异的能量学特征及其神经内分泌调节

“达乌尔黄鼠冬眠模式个体差异的能量学特征及其神经内分泌调节”是沈阳师范大学2007年获得批准立项的国家自然科学基金面上项目，编号：30770337，批准经费28万元，执行时间2008年1月-2010年12月。主持人为化学与生命科学学院杨明教授，博士，辽宁省动物学会秘书长，辽宁省普通高等学校优秀青年骨干教师，主要从事小型哺乳动物生理生态学等方面的研究。曾参与国家自然科学基金重点项目和国家重点基础研究发展计划（973计划）项目等的研究工作，并主持国家自然科学基金面上项目前期相关课题的研究。     

达乌尔黄鼠血液指标的分析

冬眠动物在冬眠过程中多项生理指标发生改变,为探索冬眠准备期不同阶段及冬眠期达乌尔黄鼠血液指标变化特征,本实验在达乌尔黄鼠冬眠前不同阶段及冬眠期间取血,通过BECKMAN COULTER 750血液分析仪检测血液指标,结果显示:达乌尔黄鼠白细胞总数、淋巴细胞数和血小板数在冬眠前保持稳定,冬眠阶段下降;血小板压积在冬眠前的体重下降阶段达到最高值,在冬眠阶段达最低水平;红细胞和血红蛋白在不同阶段无差异。说明达乌尔黄鼠冬眠期的免疫反应受到抑制;血小板在冬眠期间减少,以免发生血液凝固。     

达乌尔黄鼠室内繁殖的可能影响因素

繁殖活动是种群延续的基础,也是种群生态学和行为生态学研究的一个重要部分,动物是否能够繁殖成功将影响到整个种群的生存和灭亡。按照现代生活史原理,繁殖成功率决定于环境因素、性成熟的年龄、繁殖次数、婚配制度、个体所处的社会等级地位等。物种为了提高其自身的适合度,会根据环境和自身状况等条件来调整繁殖投入,进而影响其繁殖成功率。达乌尔黄鼠（Spermophilus daurious）广泛分布于我国西北、东北和华北地区,具有冬眠的生物学特性。很多生物学工作者和医学工作者都以其为模型动物,进行研究。为了使达乌尔黄鼠在实验室内繁殖成功,并将其实验动物化,结合国内外相关文献和实验室内环境,分析了可能会影响达乌尔黄鼠室内繁殖的因素并提出适当的对策,以便为该物种的实验室繁殖提供参考。     

亚成体达乌尔黄鼠常温和低温状态下的能量收支

能量收支反映的是自然条件下动物的能量摄入与能量消耗之间的平衡,是动物生存机制和生理生态学特征研究的重要指标。本文采用改进的代谢笼方式测得同一组亚成体达乌尔黄鼠在常温和低温两种状态下的能量收支。结果显示常温与低温下的亚成体达乌尔黄鼠,前者的啃食量低于后者;前者的摄入能高于后者;而前者的消耗能同样高于后者。     

脑室注射6-羟多巴胺对达乌尔黄鼠体温及体温调节能力的影响

观察了脑室注射6-OHDA对达乌尔黄鼠体温及体温调节能力的影响。结果表明:(1)脑室注射200μg 6-OHDA产生一个短暂的急性低体温效应,在室温环境中体温下降幅度为5℃左右,在5℃寒冷环境中体温下降7℃左右。脑室注射第二个剂量6-OHDA所引起的低体温效应比第一次明显减弱;中枢投入α-受体阻滞剂可以取消此低体温效应。(2)脑室注射6-OHDA对体温调节能力仅有暂时性影响,注药20小时后,体温调节能力即可恢复,动物在寒冷环境中和正常动物一样能够维持恒定的体温。这些观察结果为应用6-OHDA于冬眠实验工作提供了一个基本的参考依据。     

冬眠动物达乌尔黄鼠离体心脏对缺灌和再灌损伤的耐受性

秋季未入眠之达乌尔黄鼠离体心脏用Langendorff方法灌流,平衡10min,全心缺灌15min,然后再灌10min。于缺灌期和再灌期分别定时收集心脏冠脉流出液,测定流份中肌酸激酶(CK)的活性(U·L^－1),同时记录心电图和心脏收缩力。此外,用恒温动物大鼠作为冬眠动物黄鼠的实验对照,经受完全相同的实验处理。缺灌15 min期内,两种动物心脏皆有大量CK释放,释放量与缺灌时间呈线性关系。但黄鼠各采样点CK释放值都低于大鼠,提示黄鼠心脏对缺灌损伤的耐受性强于大鼠。再灌期大鼠心脏有两个CK释放峰,而黄鼠仅有第Ⅰ峰,且其活性值(179±32U·L^－1)显著低于大鼠(255±17 U·L^－1,P<0.05)。再灌期黄鼠室颤和室速发生率以及心脏收缩幅度下降百分率皆显著低于大鼠(P<0.01)。上述结果证明,与大鼠相比较,冬眠动物黄鼠心脏对缺灌和再灌损伤具有较强的耐受性。     

Biochemical characterization of the protein encoded by rice osRACD gene

A recombinant plasmid pET-racd was first constructed by cloning osRACD,the development-regulating gene that controls photoperiod fertility transformation in the photoperiod sensitive genic male sterile rice Nongken 58S,into a prokaryote expression vector pET28a(+).It was then transformed into E.Coli BL-21.Cutting with thrombin of the fusion protein extracted from transformants and PAGE separation yielded pure osRACD protein,which was further concentrated using ultrafiltration and renatured using glutathione oxidation/reduction refolding system for later functional study.As demonstrated by in vitro functional assay,the osRACD protein expressed in E.Coli B-21 shows remarkable activity in binding GTP specifically and hydrolyzing it.     

鞘铁菌(Siderocapsa)固锰的生化分析

从鞍山大赵台天然水滤池中分离出固锰能力很强的二种鞘铁菌,经胰酶处理菌体表面,破碎菌体,以及用胰酶和酶抑制剂处理菌体破碎后的内含物等实验表明,鞘铁菌的固锰能力可能是由于菌体内具有固锰能力的酶系所致。     

下地面对冰雹的影响机理

分析了冰雹形成的局地稳定度和不稳定能量的变化，地面与大气之间的能量交换，讨论了下地面的性质－－土壤、植被、地貌结构对冰雹的影响机理。     

紫外线诱变康宁木霉提高酶活力的研究

通过对康宁木霉菌种的诱变、筛选和固体发酵培养,研究了培养基、培养时间、诱变时间及pH值对诱变菌所产酶的活力的影响．结果表明,康宁木霉经诱变5min,在pH为6．0的玉米秸PDA培养基上培养72h,产生的C1酶和Cx酶的酶活力较高,C1酶的酶活力由73u／g提高到176u／g,增加了2．41倍,Cx酶的酶活力由798u／g提高到2069u／g,增加了2．59倍．     

酶活性不可逆改变的底物保护动力学

根据邹氏的酶活性不可逆改变动力学理论,我们创建一种测定微观动力学参数方法判断底物对酶活力是否有保护作用,这对阐明酶的空间结构与功能、酶构象变化与活力变化的关系具有重要的科学意义,应用此法判断猕猴桃蛋白酶(Actinidin)在4mol/l盐酸胍和8mol/l脲的失活底物保护是否存在,实验结果表明:1)Actinidin在4mol/l盐酸胍失活过程受到底物一定程度的保护,2)Actindin在8mol/l脲失活过程底物对它完全保护.以上结果也提示了胍、脲作用机制不尽相同。     

光调控对金线莲生长发育的影响

为研究不同光质和光周期处理对金线莲生长发育的影响,以蓝光、黄光、红光3种不同光质、不同光照时间处理广西金线莲组培苗,每瓶接种10个茎段,每个处理接种20瓶,培养90 d后观察记录。结果显示,日光灯照10 h·d~(-1)处理比单色光处理更有利于金线莲组培苗株高、茎粗、鲜重、干重、干物率的积累,也更有利于总黄酮、可溶性蛋白、可溶性糖含量的积累。光照6 h·d~(-1)时金线莲单株叶片数最多;光照14 h·d~(-1)处理,茎生长最粗,叶绿素含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性最高;单色光处理中,蓝光有利于干物质的积累,可使植株矮壮;黄光处理叶面积最大;红光处理下金线莲节间数和腋芽数最多,过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性最高,但在所有处理中金线莲茎最细。黄光最有利于金线莲组培苗氨基酸的积累,金线莲组培苗氨基酸含量会随着光照时间的增多而递减,表明不同光质和光周期处理对金线莲生长发育有重要的影响。     

川西高寒地区不同海拔高度土壤酶活性特征研究

为增进对川西高寒地区土壤微生物的能量和养分限制状况的了解，以川西地区不同海拔高度（2969 m，3280 m，3697 m和3992 m）的土壤为研究对象，通过测定土壤的酶活性和相关理化性质，探讨了川西地区土壤酶活性和酶化学计量沿海拔的分布规律及其影响因素.结果表明：（1）土壤的β-1,4-葡萄糖苷酶（BG）、纤维二糖水解酶（CBH）、β-1,4-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）、亮氨酸氨基肽酶（LAP）和酸性磷酸酶（AP）活性随着海拔的增加，呈现出先减小后增大的分布模式.具体表现为土壤BG、CBH和AP酶活性在海拔3992 m处最大，在海拔3280 m处最小.土壤NAG和LAP酶活性在海拔2969 m处最大，在海拔3697 m处最小.（2）海拔3280 m的土壤微生物相对受氮、磷限制，而其余三个海拔的土壤微生物相对受碳、磷限制.（3）铵态氮、全氮、全碳和土壤养分的化学计量是驱动土壤酶活性及酶化学计量沿海拔变化的关键因素.从结果可知本研究区域的土壤酶活性特征与环境资源的可用性相关.     

间歇出酶对里氏木霉产纤维素酶的影响

在分批补料的基础上,采用间歇出酶的方法,对里氏木霉产纤维素酶进行了研究。结果表明:分批补料过程中最佳的补料速度为5.5 g/(L·d),在此条件下产酶第8天滤纸酶活力和β-葡萄糖苷酶活力达到14.40 U/mL和1.59 U/mL。在分批补料的基础上进行间歇出酶,与对照相比,第4、6、8天出酶模式(模式1)时,总滤纸酶活力提高18.14%; 第4、7天出酶模式(模式2)时,总滤纸酶活力提高17.75%; 第5、8天出酶模式(模式3)时,总滤纸酶活力提高27.35%。研究表明,通过间歇出酶可以有效提高纤维素酶总滤纸酶的活力。     

复杂网络分析激酶底物信号传递机制

为了研究信号从激酶到达底物蛋白质后的传递机制,本文将磷酸化和蛋白质相互作用结合构建网络,利用复杂网络理论对该网络进行分析.结果发现,底物中存在的社区结构不会只传递特定激酶组的信号,影响网络稳定性的关键节点大多参与肿瘤发生相关的信号途径.     

产碱性纤维素酶真菌产酶条件的研究

研究了碱性纤维素酶生产菌株镰刀霉菌(Fusarum Sp.)的产酶条件.结果表明:该菌株产碱性纤维素酶的适宜碳源为1%麦杆粉+1%可溶性淀粉,最适氮源为O.2%的(NH_4)_2SO_4加0.1%的酵母粉,接种量为5%,培养时间为72 h,培养温度为46℃,培养基初始pH为8.0.在最适宜的条件下,培养液中内切葡聚糖酶活力可达到1.29 IU/mL,而天然纤维素酶活力和滤纸酶活力却很低.具有这种组分结构的碱性纤维素酶系统在棉织品的生物整理及洗涤剂工业中具有良好的应用前景.