冬鲽鱼抗冻蛋白基因的人工合成

合成适合在棉花中表达的冬鲽鱼抗冻蛋白（Winter flounder antifreeze protein,Wf-AFP）基因.参照冬鲽鱼抗冻蛋白的氨基酸序列及棉花偏爱的密码子,重新设计适合在棉花中表达的Wf-AFP基因序列;根据此序列设计6条寡核苷酸引物,通过PCR方法将其拼接成完整的基因;克隆到pUCm-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,抽提重组子进行酶切鉴定及序列分析.结果表明合成的Wf-AFP基因序列与设计方案完全相符,通过PCR介导的基因合成方法成功获得了适合在棉花中表达的冬鲽鱼抗冻蛋白基因.     

极区鱼的抗冷冻机理

鱼抗冷冻蛋白和抗冷冻糖蛋白有抗冻功能，本文阐述并讨论了各种抗冻机理学说。本文在预测了ＡＦＰⅠ、ＡＦＰⅡ和ＡＦＰⅢ的二级结构并分析了ＡＦＰ三级结构的特点基础上，计算了抗冷冻蛋白的热滞，得出了与实验相符结论．     

抗冷冻蛋白基因转化甜菜的研究

抗冷冻蛋白基因转化甜菜的研究＠李天然,张剑峰,李旭刚￥内蒙古大学生物学系甜菜,抗冷冻蛋白（ＡＦＰ）基因,遗传转化,根癌农杆菌,ＰＣＲ扩增抗冷冻蛋白基因转化甜菜的研究李天然,张剑峰,李旭刚（内蒙古大学生物学系,０１００２１,呼和浩特）ＳｔｕｄｙｏｎＴｒａｎ...     

圆斑星鲽增精及精子冷冻保存方法获国家发明专利

由中科院海洋研究所肖志忠等人完成的“圆斑星鲽增精及精子冷冻保存方法”于日前获国家发明专利授权。（专利号：ZL 200410050413.7）     

荒漠沙蜥血清蛋白含量的年周期变动

对荒漠沙蜥（Phrynocphalus przewalskii)血清蛋白仿及血清蛋白组分的周期变化进行了测定,测定时间为4－10月的每月中旬及1月中旬（进行人工冬眠的蜥蜴）,血清总蛋白含量采用紫外分光光度法测定,血清蛋白组合组分采用醋酸纤维素薄膜电泳分离,然后用双波长色谱扫描仪扫描,计算相对含量,测定结果表明,荒漠沙蜥的血清总蛋白含量在深冬眠期的1月最高,为81．45g/L,4月出 一进入繁殖季节,其含量开始下降,夏季（6－8月）降为43．81g/L,其中7月最低,为38．07g／L,秋季的含量略低于春季的含量,但差异不显著（P＞0．05）,在冬 眠前（10月下旬）及冬眠期（1月中旬）,雌性的含量高于雄性,且差异显著（P＜0．05）,在出眠后的繁殖季节雄性的含量高于雌性,在冬眠季节清蛋白的比例相对增加,而球蛋白的比例相对减少。     

氯化镉对条斑星鲽卵巢细胞的毒性作用及其机理研究

使用不同浓度的氯化镉（CdCl2）处理体外培养的条斑星鲽卵巢（BFO）细胞系细胞,利用毒理学和细胞生物学方法研究了重金属镉对BFO细胞的细胞毒性及其作用机理。毒性作用研究结果显示,BFO细胞对CdCl2敏感,浓度大于10ixmol／L的CdCl2对细胞的生长具有显著的抑制作用,能引起细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GST—Px）活性的持续降低和丙二醛（MDA）含量的持续升高,且具有浓度依赖性;机理研究结果显示．浓度大于40μmol／L的CdCl2可引起BFO细胞出现典型的凋亡细胞形态,BFO细胞在AO／EB荧光双染色中的质膜通透性显著提高,在单细胞凝胶电泳中出现明显的彗尾,且细胞凋亡率、彗尾的长度和亮度随CdCl2浓度的增加而逐渐升高,并具有浓度依赖性。可见,镉对BFO细胞具有显著的毒性作用,其毒性作用是通过诱导细胞凋亡来实现的,为利用BFO细胞系研究镉等重金属的细胞毒性及其作用机理奠定了基础。     

羧基功能化超顺磁性纳米粒子吸附牛血清蛋白的特性

以牛血清白蛋白(BSA)为目标蛋白,考察时间、BSA质量浓度、pH值、温度等条件对磁性纳米粒子吸附BSA的影响,并对吸附有BSA的磁性纳米粒子的解吸附情况进行研究.结果表明:在25~45 ℃内,温度几乎不影响吸附过程;pH值为4.0~4.5达最大吸附量,该吸附过程满足准一级动力学方程和Freundlich等温吸附模型;Na₂HPO₄对其有较强的脱附作用,但粒子与BSA之间不是简单的物理相互作用,而是静电相互作用,导致其脱附水平依然较低,仅为20.06%.     

藏山羊血清蛋白含量及其与季节变化的相关分析

采用紫外吸收法对德格藏山羊血清总蛋白(TP)进行不同季节(春、秋)测定,结果表明春秋两季总蛋白的含量有显著差异,春季测得43头,总蛋白平均值为6.64±0.22,秋季测定25头,总蛋白平均值为6.19±0.27,经“t”检验统计,差异显著(P<0.05)。又采用醋酸纤维溥膜电泳分离血清蛋白,通过扫描测得春季39头的相对百分含量为:清蛋白39.13±2.95,α_1—球蛋白7.35±0.60,α_2—球蛋白15.57±1.13,β—球蛋白8.58±0.71,γ—球蛋白30.29±2.65,清球蛋白的比值(A/G)0.693±0.08。测得秋季24头的相对百分含量为:清蛋白38.72±4.38,α_1—球蛋白9.11±1.32,α_2—球蛋白18.35±1.63,β—球蛋白9.59±1.94,γ—球蛋白24.22±3.18,清球蛋白的比值0.72±0.12,经“t”检验α_1、α_2和γ三种球蛋白的差异非常显著(P<0.01)α_1、α_2球蛋白秋季大于春季,而γ—球蛋白则春季大于秋季,清蛋白和β—球蛋白虽有差异但不显著,由此可见总蛋白的含量变化与α_1、α_2和γ三种球蛋白的含量有关,春季γ—球蛋白增加的量超过α_1和α_2球蛋白降低的量,这种变化可能是动物体的血清蛋白对季节变化的适应。     

冷冻-解冻循环对鳞鲀(Abalistes Stellaris)鱼糜蛋白变性的影响

研究了冷冻-解冻循环对鳞鲀鱼糜蛋白变性的影响,测定指标为蛋白质盐溶性、Ca2+ -ATPase活性及鱼糜凝胶的破断强度、凹陷深度、压出水分和白度.结果表明:随冷冻-解冻循环次数增加,鳞鲀白肉鱼糜及全肉鱼糜蛋白的盐溶性和Ca2+ -ATPase活性均下降,表明鱼糜蛋白发生了变性;鱼糜凝胶的破断强度、凹陷深度及持水性也下降(白度除外).因此,在加工中应避免反复冷冻-解冻,以保证鳞鲀鱼糜质量.     

热滞蛋白活性的化学动力学的进一步研究

根据热滞蛋白溶液中抗冻分子与冰晶表面相互作用特点，提出了热滞蛋白在冰晶表面吸附的动力学理论，导出了热滞蛋白活性的表达式．计算了各种热滞蛋白溶液的热滞值，得到了与实验结果符合较好的结论，并讨论了热滞蛋白分子在冰晶表面吸附反应过程中的协同效应     

热滞蛋白界面吸收反应的动力学描述

通过热滞蛋白在冰晶表面吸附反应的动力学过程，给出了热滞蛋白活性与其溶液浓度的关系．理论结果与实验数据较好地符合．     

鱼抗冻糖蛋白AFGP7－8的热滞研究

分析了鱼抗冻糖蛋白（ＡＦＧＰ７－８）的结构特点及在溶液中的特性，计算了ＡＦＧＰ７－８溶液的热滞，理论结果与实验数据较好地符合．     

"表面互补"模型--抗冻蛋白通用的分子机理

抗冻蛋白(antifreeze protein,AFPs)是一类能控制冰晶生长和抑制冰晶之间发生重结晶的蛋白质,能在结冰或亚结冰条件下保护生物体不受伤害.AFPs具有两种明显不同的活性--热滞活性和重结晶抑制活性.AFPs虽然在氨基酸序列、物种来源和高级结构等方面具有很大的差异,但都能通过吸附作用与特定的冰晶表面相结合,从而表现出相应的抗冻活性.AFPs与冰晶结合的分子机理主要有"氢键结合"模型和"表面互补"模型,而后者具有更强的优势,已逐渐发展成AFPs通用性的分子机理.目前已测定或建模了三维结构的AFPs都能与冰晶的特定表面形成表面互补,但形成这种表面互补的各种作用力还有待于进一步的研究.     

热滞蛋白界面吸附反应的协同性效应

在热滞蛋白与冰晶表面吸附的动力学过程的基础上,进一步考虑热滞蛋白界面吸附的协同性效应,得到热滞蛋白浓度与其热滞活性的理论关系,并计算了有效协同系数的值;同时,由吸附速率常数对温度的变化获得了热滞蛋白激活能,理论结果与实验较好符合．     

鱼抗冻蛋白溶液的热滞与蛋白分子量的关系

分析了鱼抗冻糖蛋白的抗冻机理，根据冰晶生长理论和Ｆｌｏｒｙ的大分子溶液理论，导出了抗冻糖蛋白的热滞（熔点与冰晶生长点之差）与抗冻糖蛋白的分子量的关系，结果与实验数据较好地符合。     

美洲拟鲽(Pseudopleuronectes americanus)抗冻肽基因在大肠杆菌中的表达

将美洲拟鲽抗冻肽基因克隆于原核高效表达载体ｐＫＫ２２３－３中,经酶切分析、ＰＣＲ检测筛选出重组克隆ｐＭＫ１１,转化大肠杆菌ＪＭ１０９和ＤＨ５α,ＩＰＴＧ诱导２～３ｈ后,超声波裂解细菌产物,在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱分子量９ｋＤａ处显示出一条明显的蛋白带,与美洲拟鲽抗冻肽大小一致,表明美洲拟鲽抗冻肽基因在大肠杆菌中表达,为进一步研究抗冻肽基因在大肠杆菌中的表达水平及条件打下基础．     

烟台地区混凝土冬季施工常见质量问题及防治方法

针对烟台地区的气候特点，结合工程实际分析了砼冬季施工中易于出现的质量问题，受冻砼的特征及危害，并结合新浇砼的受冻机理及有关规范，讨论了实用防治措施，对工程事故处理及预防有较大的参考价值．