重组甘油脱水酶的活性鉴定

通过MBTH方法对重组甘油脱水酶活性进行检测。确定稳定的酶活检测系统．结果显示重组甘油脱水酶的活性明显高于野生菌．此外，甘油脱水酶单个亚基及亚基两两组合未检测到酶活性．这一结果将对酶活性研究具有重要的意义．     

Klebsilla pneumonia XJ-Li甘油脱水酶产酶条件研究

甘油脱水酶是生物法合成1，3-丙二醇的关键限速酶，对1，3-丙二醇的合成速度和发酵终浓度具有重要的影响。本文通过实验研究了Klebsilla pneumomae XJ-Li的基础产酶条件，结果表明：该菌株甘油脱水酶的合成与菌体的生长具有较好的偶联性，发酵8h即可达到最大产酶高峰，同时菌体生长也达到稳定期；其最适产酶条件为：温度40℃，oH值8．0，甘油浓度20g／L，氮源为6．0g／L的硫酸铵。     

Klebsilla pneumoniae XJ-Li甘油脱水酶的催化反应特性

以自主筛选的Klebsilla pneumoniae XJ-Li为甘油脱水酶酶源,研究了其催化反应特性和稳定性。结果表明,甘油脱水酶的最适催化反应温度和pH分别为40℃和8．0。温度在40℃以下,pH处于6．0～8．0之间时酶的稳定性较好。在常见金属离子中,Mg2＋和Mn2＋对甘油脱水酶的催化反应具有一定促进作用,而Ca2＋、Co2＋、Fe3＋、Zn2＋和Cu2＋对其活性均有抑制作用。此酶对甘油的最高耐受反应浓度在0．15mol／L左右,对1,2一丙二醇的饱和浓度在0．3mol／L左右,以甘油和1,2-丙二醇为底物时的反应动力学常数Km值分别5．57mmol／L和8．16mmol／L。     

K.pneumoniae XJPD-Li甘油脱水酶基因的定点突变及其性能研究

针对菌株K.pneumoniae XJPD—Li高效转化生产1,3-丙二醇的特性,将其甘油脱水酶与已知报道的甘油脱水酶（U60992）的序列比对分析,根据差异位点设计了Nβ471的定点突变,利用反向PCR定点突变技术构建了甘油脱水酶（dhaBCE）的突变体质粒M1821,并在E．coli BL21（DE3）中高效表达。SDS—PAGE结果显示,诱导表达后在相对分子质量66、24、16KD出现三条特征条带,与预期结果一致。突变体M1821甘油脱水酶的比酶活为38．7U／mg,催化反应最适pH为8．0,最适温度为40℃,与未突变重组甘油脱水酶比较,最适温度降低了约5℃。     

辅酶依赖型和不依赖型甘油脱水酶的比较

实验比较源自肺炎克氏杆菌(K.pneumoniae)和丁酸梭状芽孢杆菌(C.butyricum)中的甘油脱水酶(GDHt)的辅酶依赖特性.采用生物信息学的方法,对两种酶的异同点进行分析,发现两种酶结构上相似性较低、亲缘性较远、分属于两个不同的家族.SMART数据库搜索结果表明,C.butyricum中不依赖辅酶的甘油脱水酶及其再激活酶,分别属于gly-Radical和Radical-SAM家族,多序列比对得到的一段富含半胱氨酸残基C**C**C的保守序列正是其共同特征.     

罗伊乳杆菌转化甘油能力的原位再激活

考察罗伊氏乳杆菌(L.reuteri)静息细胞转化甘油的重复利用,甘油脱水酶的原位再激活,以及补加培养基对再激活甘油脱水酶的变化.结果表明:菌体经二次转化后基本丧失转化能力,甘油对胞内甘油脱水酶具有强烈的抑制灭活作用;确证胞内存在甘油脱水酶再激活体系;不具转化甘油能力的L.reuteri可被补加的培养基在一定程度上再激...     

抗冻蛋白的作用机制及基因工程研究进展抗冻蛋白的作用机制及基因工程研究进展汪少芸

分析了抗冻蛋白的作用机制及基因工程的研究进展.抗冻蛋白是一类具有热滞效应、冰晶形态效应和重结晶抑制效应的蛋白质.近些年的工作主要集中在该类蛋白质抗冻机制及基因工程的研究上.抗冻蛋白具有广泛的应用前景,它不但可以应用于食物的冷鲜贮存及移植器官的低温保存,还可通过转基因提高经济作物的抗冻能力.     

甘油检测技术研究进展

甘油是重要的工业原料,在国防、化工、油漆、食品、日化、医药、农药及生物制品等领域有着广泛的应用,对发酵产品产量的控制、柴油的质量控制、化妆品的保鲜性及冷冻血液处理后的可用性等具有重要的作用。本文综述了高碘酸氧化法、Cu²⁺比色法和酶催化反应 分光光度法等近年来测定甘油含量方法的应用进展,认为甘油测定方法的未来发展趋势是传统检测技术与新纳米材料、新检测技术的融合,应进一步提高对甘油检测的专一性、灵敏性,实现甘油含量检测的仪器化、自动化、微型化以及快速化,并借助互联网和云技术,实现对甘油含量的连续、遥控、实时与在线监测。     

抗菌肽的研究进展

抗菌肽具有分子量小、热稳定性好、抗菌谱广等特点,介绍了抗菌肽的组成结构、分类、生物学特性、抗病机制、基因工程、发展前景和存在的问题。     

微乳液中小麦胚脂肪酶催化三油酸甘油脂的水解反应

反应介质在生物转化特别是生物催化过程中起着很重要的作用 .脂肪酶直接暴露在有机溶剂中容易失活 ,传统的脂肪酶水解反应在水溶液中进行 ;而长链油脂在水中不易溶解 ,往往需要借助于有机溶剂才能溶解 .因此脂肪酶一般用于水溶性脂肪的催化水解反应 ,对其开发利用远远落后于其他水解酶 .近 2 0年来 ,用油包水型微乳液作为生物转化介质的研究特别引人注目[1] ,油包水型微乳液是由水和油在表面活性剂的作用下形成的稳定热力学体系 ,在表面活性剂分子的极性头聚集而形成的极性核中 ,溶解了一定量的水形成“水池”.酶溶解于“水池”中 ,在油—水…     

植物抗寒基因工程研究最新进展

低温是限制农作物分布和产量的一种非生物胁迫因素，因此提高植物的抗寒性对农业具有十分重要的意义。许多植物在经过一段时间的非冻低温作用后其抗寒性获得增强，这种现象被称为植物的低温驯化。最近10年来，随着对植物低温驯化的分子机制研究的不断深入，植物抗寒基因工程研究获得了长足的进展。目前应用于植物抗寒基因工程的基因包括两大类：保护基因与调控基因，两者都表现出良好的应用前景。然而，植物抗寒基因工程研究领域也存在着大量的问题急需解决。     

我国基因工程干扰素的研究概况

介绍了基因工程干扰素及其应用，以及影响基因干扰素产业化生产的因素，并对我国基因工程干扰素的发展历程、现状和前景作了阐述。     

植物耐盐性研究及发展

本文回顾了关于盐渍化现状的研究 ,概述了植物对盐胁迫的适应方式 ,从盐离子的吸收、在植物体内的分布、细胞内的区域化、在体内合成有机溶质以及形态分化等方面 ,探讨了植物耐盐的机制 ,并指出了对盐渍化环境进行改良、开发利用的可能途径     

植物基因工程疫苗研究进展

可口服免疫(oral immunization)绿色疫苗(green vaccine)研究是植物基因工程与分子医学相结合而发展起来的新的研究方向．对当前植物基因工程疫苗的研究方法、疫苗的作用机理进行介绍,总结近10年来国内外植物基因工程疫苗研究进展,并对未来发展方向作出展望．     

Ru基化合物催化制氢的研究进展

氢的存储是车载燃料电池发展的关键环节。甲醇在室温下呈液态并且储氢量达12.6wt%,然而分解甲醇制氢需要较高的温度(超过200℃)和压强(25~50bar)。最近研究者报道了利用单核钌(Ru)基化合物作催化剂,在常温常压条件下可以将甲醇分解成CO_2和H_2;利用双核Ru基化合物作催化剂,可以将多聚甲醛或甲醛与水的混合溶液有选择性地脱氢生成H_2和CO_2,但是关于Ru基化合物微观层次的催化机制还需要进一步研究。本文综述了不同配体构型和不同种类配体对催化剂活性的影响及其脱氢路径,以及催化剂的催化活性和溶液的pH值之间的关系,阐明如何改进现有单核Ru基钳型化合物和双核Ru基化合物催化剂的性能,设计催化活性更优良的新型催化剂。     

甘油及氯化钙溶液对空气中乙醇吸附理论研究

对多种易溶于水的溶质吸附溶解空气中乙醇的能力进行筛选，发现25％以上氯化钙溶液、甘油对空气中的乙醇有较好的吸附作用．通过基本理论的推导和分析，并结合实验情况，证明了推导理论的指导意义和作用．     

丝状真菌启动子的基因工程改造进展

丝状真菌是重要的工业酶生产菌,具有优异的蛋白表达和分泌能力,如里氏木霉在工业发酵中其内源纤维素酶产量可高达100g/L。目前,丝状真菌已被成功用于表达外源基因,但与内源基因相比,外源基因的表达效率常常不高。使用强启动子来驱动基因转录可有效提高外源基因的表达水平,因此本文就通过基因工程的方法对丝状真菌的启动子进行改造以提高内、外源基因的转录效率的研究进行总结与展望。