油菜OguC MS与诸葛菜属间杂种F_1的快速繁殖

作者通过摸索建立了适宜于油菜OguCMS与诸葛菜属间杂种F1的快速繁殖方法 .发现MS 6 BA 1.0mg/L NAA 0 .1mg/L适宜于诱导丛芽 ,丛芽增殖系数高达 3.5 ;MS NAA 0 .1mg/L适宜于诱导生根 .     

甘蓝型油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代的快繁生根及愈伤组织诱导

利用油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代种子，在附加各种不同激素浓度组合的MS培养基上访导丛生芽、生根及愈伤组织诱导，结果表明：在MS培养基中添加1．0mg/L6—BA_0.1mg/L NAA对诱导丛生芽有较好的效果，l／2MS培养基对小芽生根效果最好，在MS培养基中添加0．5mg/L 8-BA 0.1mg/L NAA 0.25mg/L GA3 0.1mg/L 2,4-D对诱导愈伤组织效果最好．     

甘蓝型油菜萝卜质不育系恢复材料Ad-6(F4)测交二代恢复株TCF2的快繁及生根

油菜萝卜胞质不育系恢复材料Ａｄ－６（Ｆ４）测交二代恢复株ＴＣＦ２,在ＭＳ附加５ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡ＋ ０．５ｍ ｇ／Ｌ ＮＡＡ,３ｍ ｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋ ０．２ｍ ｇ／Ｌ ＮＡＡ,３ｍ ｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋ ０．３ｍ ｇ／Ｌ ＮＡＡ＋６００ｍ ｇ／Ｌ水解乳蛋白以及５ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡ＋ ０．３ｍ ｇ／ＬＮＡＡ＋ ５ｍ ｇ／ＬＡｇＮＯ３ 的不同培养基上诱导丛生芽,结果表明５ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡ＋ ０．３ｍ ｇ／ＬＮＡＡ＋ ５ｍ ｇ／ＬＡｇＮＯ３ 对ＴＣＦ２ 诱导丛生芽有较好的效果．小芽生根培养基为１／２ＭＳ效果最好．     

甘蓝型油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代的快繁生根及愈伤组织诱导

利用油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代种子,在附加各种不同激素浓度组合的MS培养基上诱导丛生芽、生根及愈伤组织诱导,结果表明在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA对诱导丛生芽有较好的效果,1/2MS培养基对小芽生根效果最好,在MS培养基中添加0.5mg/L 6-BA +0.1mg/L NAA+0.25mg/L GA3+0.1mg/L 2,4-D对诱导愈伤组织效果最好.     

转EPSPS基因抗草苷膦油菜基因漂移的初步研究

草苷膦是一种广谱内吸传导型除草剂[1].草苷膦通过竞争性抑制植物莽草酸代谢过程中磷酸烯醇式丙酮酸莽草酸-3-磷酸合酶(简称为EPSPS)活性,阻断芳香族氨基酸的生物合成导致植物死亡[2].因此,转EPSPS基因(来自微生物的基因)作物对草苷膦类型的除草剂具有抗性.在1996~2004年的9年间,抗除草剂生物技术产品一直占市场的主导地位.2004年,全球种植的抗除草剂的转基因作物有油菜、大豆、玉米及棉花等,种植面积共计有5,860万公顷,占全球转基因作物总种植面积(8,100万公顷)的72%.抗除草剂油菜品种在国外已广泛种植,据国际农业生物技术应用服务组…     

Cytogenetics of intergeneric hybrids between Brassica species and Orychophragmus violaceus

In the sexual intergeneric hybrids between the cultivated Brassica species and Orychophragmus violaceus, both complete separation and partial separation of the parental genomes were found to occur during mitosis and meiosis under genetic control. The cytogenetics of these hybrids was species-specific for Brassica parents. The different chromosome behavior of hybrids with three Brassica diploids ( B. campestris , B. nigra and B. oleracea ) might contribute to the different cytogenetics of hybrids with three tetraploids ( B. napus, B. juncea and B. carinata). Owing to the parental genome separation, Brassica homozygous plants and aneuploids with various chromosome constitutions were identifiable in the progenies of these hybrids, which were valuable for the study of the structure and evolution of Brassica genome and for the breeding of Brassica crops.     

诸葛菜EPSPS基因5′端的克隆和序列分析

烯醇式丙酮基莽草酸 3 磷酸合成酶(5 enolpyruvylshikimate 3 phosphatesynthase,EP SPS)是植物和微生物莽草酸途径中的一个必需合成酶,植物中该基因的超量表达或该基因中某些氨基酸突变可以产生对除草剂草甘膦(glyphosate)的耐性.采用5′ RACE技术从诸葛菜(Orychophragmusviolaceus)叶中克隆出一条长743bp的cDNA片段.序列分析结果表明:该cDNA与其它植物的EPSPS基因具有相当高的核苷酸序列同源性.其所编码的氨基酸序列与欧洲油菜(Brassicanapus)同源性最高为90%,与拟南芥(Arabidopsisthaliana)、玉米(Zeamays)、西红柿(Lycopersiconesculentum)、烟草(Nicotianatabacum)和水稻(Oryzasativa)的同源性分别为88%,81%,64%,62%和71%.     

甘蓝型油菜BnTR1和ATP6之间相互作用的研究

为进一步研究ATP6和BnTR1之间的相互作用及具体作用位点,通过构建含不同长度的BnTR1 cDNA序列的pGADT7融合载体,利用酵母双杂交证明了BnTR1的C端92～202位氨基酸序列与ATP6的氨基酸序列具有相互作用.     

甘蓝型油菜BnBRI1基因的克隆及表达分析

以拟南芥油菜素内酯受体BRI1基因序列设计同源简并引物,利用同源克隆技术,克隆了甘蓝型油菜中编码油菜素内酯受体基因全长cDNA序列,命名为BnBRI1(GenBank:JX871217),该基因开放阅读框(ORF)大小为3591bp,与拟南芥中BRI1基因(GenBank:NM_120100)相似性为94.21%,编码1196个氨基酸,与拟南芥中BRI编码的氨基酸相似性为89.23%.采用实时定量PCR分析表明,BnBRI1基因在根、茎、叶中都有表达,但表达量存在显著差异.在两叶一心期和花期的根中表达量最高,四叶一心期和抽薹期的叶中表达量最高.     

从诸葛菜cDNA文库中筛选过氧化物酶基因

在200mmol／L NaCl诱导下构建诸葛菜苗期的cDNA文库，并从cDNA文库中筛选到一个新的过氧化物酶基因OvRCI，该基因cDNA全长1220bp，包含了一个1128bp的开放阅读框．通过同源分析比较及RT-PCR实验等对该基因进行了分析．结果显示该基因是一个诱导型表达的基因。     

甘蓝型油菜FAE1基因启动子的克隆和瞬时表达载体的构建及功能分析

油菜脂肪酸延长酶基因FAE1是广泛存在于植物中并定位于内质网上的一种能催化脂肪酸碳链延长的酮脂酰CoA合成酶,根据GenBank上已知的植物FAE1基因启动子序列设计引物,以从甘蓝型油菜(Braccica napus.L)叶片中提取的总DNA为模板,进行PCR扩增,获得了1 328 bp的片段.回收该片段,并连接到pMD18-T载体测序.序列在NCBI进行blast比对,同源性为99.78%,说明该片段与植物中已知的FAE1基因的启动子序列有极高的相似性.将该片段替换掉改造后的pBI221上面的35S启动子从而构建了原生质体瞬时表达载体.然后通过PEG介导的方式将含有FAE1启动子驱动的荧光素酶报告基因(LUC)表达载体导入油菜原生质体中,研究报告基因表达量,证明出脱落酸(ABA)影响了报告基因的表达,随着ABA浓度的不断增加,LUC的表达量呈现逐步下降的趋势.     

甘蓝型油菜矮秆突变基因ndf1的分子标记连锁遗传作图

利用240对SSR和672对SRAP分子标记, 以甘蓝型油菜矮秆突变株系与高秆野生型杂交的回交一代(BC1)群体为材料, 对甘蓝型油菜矮秆突变基因ndf〖STBX〗1〖STBZ〗进行连锁遗传作图分析. 结果表明 : (1)在240对SSR引物中, 有145对的扩增产物显示出突变株系与野生型间具有多态性, 采用矮秆与高秆杂交F2群体集团分离分析法(BSA)筛选连锁分子标记, 并利用BC1群体进行遗传连锁作图分析, 发现位于13号连锁群上的Na12 E02和CB10057〓2对SSR标记与矮秆突变基因ndf〖STBX〗1〖STBZ〗位点紧密连锁, 2对标记位于矮秆突变基因ndf〖STBX〗1〖STBZ〗的同侧, 连锁图距分别为634cM、877cM; (2)经过672对SRAP分子标记连锁遗传分析, 获得了4对与矮秆突变位点连锁的SRAP标记: Me15em4 288、Me28em3 171、Me25em15 262和Me3em18 684, 与矮秆突变位点的连锁图距分别为1248cM、1519cM、2019cM和3546cM, Me28em3 171和Me3em18 684位于矮秆突变基因ndf〖STBX〗1〖STBZ〗的另一侧.