小鼠胚胎发育中期肝细胞增殖与凋亡

探讨小鼠胚胎中期肝发育过程细胞增殖与凋亡的变化规律，相关基因P21及Ki-ras在肝发育中的表达意义，在胚胎中期的小鼠肝组织中，采用免疫组织化学及切口末端标记法，可检测到小鼠肝发育过程中的细胞增殖与凋亡相伴存在，这与肝发育变化密切相关，用原位杂交的方法检测到P21时，Ki-ras基因在胚胎肝发育中期并没有表达，说明这两个细胞周期调控基因可能在胚胎肝发育中期并不起作用，而与其他的基因有关。     

瘦素对小鼠体外胚胎发育率及胚胎移植后着床率的影响

观察瘦素对体外受精后胚胎发育和胚胎移植后着床率的影响。采用小鼠卵母细胞体外受精后胚胎培养及胚胎移植的方法研究仅受精时添加的瘦素对受精后体外胚胎发育的影响及胚胎移植后着床率的影响。结果表明：1）仅受精时添加不同浓度的瘦素对受精卵发育至四细胞胚、桑椹胚及囊胚的比率均无显著影响（P〉0.05）。2）添加的瘦素剂量为10ng/mL及50ng/mL时胚胎着床率较高,当添加的瘦素剂量为100ng/mL-500ng/mL胚胎着床率未提高,两组差别有统计学意义（P〈0.05）。一定水平的瘦素可以显著提高小鼠的体外胚胎移植后的着床率,高水平瘦素反而对着床不利。受精后至着床前各期胚胎的发育率与受精当时瘦素浓度无关。     

冷冻中甘油对小鼠胚胎保护效果的研究

将小鼠２－细胞、４－细胞、８－细胞以及桑棋期的胚胎快速冷冻,以甘油作低温保护剂,浓度分别为０．５ｍｏｌ／Ｌ,１．５ｍｏｌ／Ｌ,２．５ｍｏｌ／Ｌ,３．５ｍｏｌＬ培养到囊胚阶段。结果表明：随着保护剂浓度的升高,胚胎发育率增加;在囊胚之前,发育程度越高,抗低温的能力越强,胚胎的发育率也就越高,各阶段组发育到囊胚期的胚胎经移植后均能得到正常发育的胎儿。     

静电场对小鼠胚胎发育能力的影响

首次报道哺乳动物胚胎经静电场处理后对＂细胞阻滞＂和后期发育能力的影响．结果表明，用静电场处理小鼠体外受精卵和２细胞胚胎时，对克服小鼠＂２细胞阻滞＂无显著影响．处理发育于Ｍ１６＋１００μＭＥＤＴＡ＋输卵管上皮的２细胞胚胎时，显著提高了胚胎的发育能力，最佳处理剂量的囊胚率从４２％提高到６４％，囊胚孵化率从２０％提高到４５％．     

氯化汞对雌性小白鼠妊娠及胚胎发育的影响

对妊娠前及妊娠初期的雌性小白鼠采用腹腔注射的方法进行氯化汞染毒， 并检查氯化汞对雌性小鼠妊娠状况及胚胎发育的影响． 实验结果表明： 氯化汞对小鼠的妊娠及胚胎发育均有影响． 随着氯化汞剂量的增加， 妊娠母鼠的流产率、延迟着床率以及吸收胚率、死胎率均随之增加， 且胎鼠畸形及畸形严重程度亦随之增加     

小鼠早期胚胎体外培养技术中几种化学因素的影响

与胚胎体外培养有关的一些化学物质，如液体石蜡、ＣＯ２、乙醇和水质等，对小鼠早期胚胎发育有明显的影响。有的液体石蜡对胚胎有毒害作用，这种毒害作用与其比重和所含的硝基萘杂质无关。有的国产液体石蜡适合于做早期胚胎培养之用。培养液中混入乙醇对胚胎发育危害很大，浓度达到０．８％时，胚胎完全不发育，而浓度低于０．０５％，则无明显影响。酒精厂生产的ＣＯ２粗制品，乙醇含量约为￣０．１８％，完全适合于做胚胎培养的Ｃ     

小鼠四倍体半克隆胚胎发育研究

半克隆(Semi-Cloned)胚胎是通过注射体细胞核到未去核的卵母细胞中产生的。在半克隆胚胎中,体细胞被用来作为精子的替代物。然而,由于异常的染色体分离,构建的半克隆胚胎在激活后形成了非整倍体而导致胚胎发育受到严重影响,不能发育到期。本研究通过抑制小鼠半克隆胚胎在激活过程中染色体数目减半,避免非整倍体胚胎形成,研究四倍体半克隆(TetraploidSemi-cloned,TSC)胚胎的发育和体细胞核的掺入对胚胎发育的影响。结果显示,TSC胚胎的体外发育率显著高于二倍体半克隆胚胎,与正常受精卵及孤雌激活对照无显著性差异,但TSC胚胎的细胞数在桑椹胚和囊胚期比正常二倍体受精胚胎和孤雌激活胚胎少。通过Oct-4染色发现,TSC胚胎囊胚期内细胞团(InnerCellMass,ICM)细胞很少或者没有。移植63个四倍体半克隆胚胎到3只假孕母鼠体内,得到20个胎盘,但没有得到胎儿。组蛋白乙酰化和DNA甲基化检测显示,部分TSC胚胎在囊胚期没有形成正常受精胚胎在ICM和滋养外胚层(Trophectoderm,TE)之间的差异分布。TSC胚胎的基因表达不依赖于细胞分裂次数而依赖于发育时间。虽然TSC胚胎避免了二倍体半克隆胚胎形成非整倍体现象,但由于TSC胚胎没有ICM细胞或ICM细胞很少,所以只能形成胎盘而不能形成胎儿。本实验第一次较为全面地研究了TSC胚胎的发育,同时也为研究体细胞核再程序化、基因打靶技术提供了一种新的途径。     

氯化锂对泥鳅胚胎发育的影响

研究了ＬｉＣｌ对泥鳅早期胚胎发育的影响。结果表明，ＬｉＣｌ对卵裂早期至神经胚期的形态发育有明显的致畸作用，不同发育时期的胚胎对ＬｉＣｌ的敏感性不同。ＬｉＣｌ对原肠期胚胎的致畸效应相对较强。     

久效磷对小鼠早期胚胎体外发育的影响

采用小鼠早期胚胎的体外培养技术,研究了久效磷对小鼠着床前胚胎发育的影响。结果表明,剂量低于0.22mmol/L对小鼠早期胚胎无明显作用,剂量为0.34mmol/L时,70.6％的8细胞胚胎能发育至囊胚,剂量达0.45mmol/L,对小鼠早期胚胎有显著的毒害作用,只有5.7％可以发育至囊胚。在经久效磷处理的小鼠早期胚胎电镜照片上可以看到,细胞内网架结构保持完好,线粒体被破坏,数量变少,空泡变大、增多,细胞内不同结构对久效磷的敏感性有一定差异。     

不同化学激活方法对小鼠卵母细胞孤雌激活效果的影响

通过比较几种常用的化学激活方法对小鼠卵母细胞的孤雌激活和孤雌生殖胚胎体外发育的影响,从而筛选出小鼠卵母细胞孤雌激活的适宜方法.选取成熟小鼠卵母细胞,随机分为以下9组进行激活处理:①离子霉素(I)+6-二甲氨基嘌呤(D);②I+D+细胞松弛素B(CB);③I+放线菌酮(C);④I+C+CB;⑤φ(乙醇)=7%的乙醇(E)+D;⑥E+D+CB;⑦E+C;⑧E+C+CB;⑨Sr2++CB.比较了这9种化学激活方法以及SrCl2的作用时间和卵龄对小鼠卵母细胞激活效果的影响.实验结果表明:小鼠卵母细胞孤雌激活率与激活措施和卵龄有关;小鼠卵母细胞可以被I+D+CB或SrCl2+CB有效激活,激活率及孵化囊胚发育率均高于其他激活方法(P0.05),且以SrCl2+CB最为有效.hCG注射后20h为小鼠卵母细胞进行SrCl2激活的最适卵龄,其最佳处理时间为4h.对小鼠卵母细胞而言,6-DMAP比放线菌酮的激活效果好.     

小鼠无透明带胚胎培养方法的优化

目的:探索合适的小凹制作方法以培养小鼠无透明带胚胎,完善WOW(the well of the well)系统,为手工克隆技术提供支持,提高核移植生产效率.方法:对WOW系统进行改进,用金属针、玻璃针及胚胎聚集针分别做小凹,比较这三种方法制作的小凹对小鼠无透明带受精胚胎的培养效果.结果:胚胎聚集针所做小凹的囊胚发育率显...     

国产试剂配制的培养液对小鼠早期胚胎培养效果的研究

本实验用 Whitten 的小鼠早期胚胎培养法验证了国产试剂配制培养液对小鼠早期胚胎体外培养的效果。实验表明,在用国产试剂配制的小鼠早期胚胎培养液中,2—细胞胚胎能正常发育到囊胚阶段。     

高含量硅的快速分析方法研究

本文提出用二氧化二氢噻吩作β-硅钼酸的稳定剂,抑制向α-硅钼酸的转化,效果较丙酮好,并采用1-氨基-2-萘酚-4-磺酸与亚硫酸和抗坏血酸混合还原剂,促进硅钼蓝的还原,配合82型示差光度计,可在半小时内完成测定,本法可测含二氧化硅在50%以下的铝合金试样,方法快速、准确、重现性好。     

水泥中三氧化硫的快速测定法

研究了用EDTA容量法快速测定水泥中SO_3的方法,本方法是根据EDTA标准溶液的滴定用量间接计算出水泥中SO_3的含量,而且可在系统分析中用同一种EDTA标准溶液进行,因而具有快速、简便、准确度高的优点。