从空间搭载维生素C生产菌株中筛选高产菌株

对国内外首次经过"神舟四号"宇宙飞船搭载的维生素C生产菌株进行了初筛和复筛,得到了产2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的高效菌株,提高了其发酵效率.经研究发现,航天搭载使大菌发生负突变,而所筛选的418株小菌中,共筛出4株高产菌株,转化率提高了3.9%～5.2%,并发现部分菌株发酵周期有不同程度的缩短.     

微波-吖啶橙复合诱变选育Vc发酵伴生菌

采用微波对Vc二步发酵伴生菌苏云金芽孢杆菌进行照射,然后将其涂布到含有15mg/mL吖啶橙的平板中。经过微波和吖啶橙的复合诱变作用,筛选到一株高效伴生菌F328。在pH6.8的发酵培养基中与氧化葡萄糖酸杆菌混合发酵,糖酸转化率提高了7.77%,达到91.55%,2-酮基-L-古龙酸的质量浓度达到90.2mg/mL。菌株F328经过连续传代5次,遗传性状稳定。     

维生素C二步发酵伴生菌的分离鉴定

从现有成熟用于维生素C生产的混合菌系中分离得到伴生菌.扫描电镜显示该菌菌体大小为0.7μm×(2~4)μm,呈链状排列.经16SrDNA序列分析表明,伴生菌与内生芽孢杆菌(Bacillus endophyticus)亲缘性高.伴生菌在培养8~12h后进入生长对数期,且可产生淀粉酶和纤维素酶.     

用激光辐照棒状杆菌原生质体选育谷氨酸高产菌的研究

以钝齿棒杆菌T6-13为出发菌,采用甘氨酶-青霉素G-溶菌酶处理其细胞,酸处理10小时制备的原生质体用激光辐照5分钟,挑取再生后菌落进行筛选,选育出二株高产菌5-20和5-21,最高产酸率分别为9.79％和9.65％,最高转化率分别为69.95％和68.96％,比出发菌提高44.83％和42.70％;5-20菌株在3万升大罐中试生产9罐,平均产酸6.79％,平均转化率为52.06％.     

克拉维酸高产菌的选育

在克拉维酸高产菌的选育过程中,应用解除终产物结构类似物作为选择压力,能有效地除去低效价菌株,提高高产菌株的检出率,较传统筛选法优越.试验表明,以带棒链霉菌Strep tomycesclavuligerusCCRC11518(效价为382.4×10-6g/mL)为出发菌,经紫外线诱变,筛选到一株抗20×10-3g/mL的舒巴坦钠突变株my51,my51菌株产克拉维酸的效价达到834.7×10-6g/mL,比出发菌提高了1.18倍.该菌株连续传代7代,克拉维酸的效价保持稳定.     

对菌根分泌物强趋性产酸克氏菌突变体的筛选

体积分数0.01%和0.001%的桉树油悬浮液与苗期桉树—彩色豆马勃菌根、桉树根、彩色豆马勃菌Pisolithus tinnctorius分泌物对随机突变的产酸克氏菌Klebsilla oxytoca进行趋性筛选,得到1株较野生株对桉树—彩色豆马勃菌菌根分泌物趋向性强1~2倍的突变株菌株TR-M30-1。该菌株为建立桉树—彩色豆马勃菌—产酸克氏菌三元互利共生体系提供了材料。     

γ-多聚谷氨酸产生菌高效诱变育种的研究

设计了几组不同的诱变条件对γ-多聚谷氨酸生产菌Bacillus licheniformis ATCC 9945A进行诱变,诱变后将所有菌株混合,以此未经筛选的混合菌共同发酵,并以终产量为指标对发酵条件进行连续的定向调控,使发酵条件逐渐向高产正突变株倾斜,产量得以逐步提高．同时在混合茵状态下找到适合高产正突变株的发酵条件,以此发酵条件作为筛选平板,对混合菌分离纯化,选育到γ-PGA高产菌Zγ-29,产量是出发菌株的4．14倍,筛选条件即为该突变株的最佳发酵条件．     

发菜伴生细菌的分离鉴定及其对发菜生理代谢的影响

为了探究发菜(Nostocflagelliforme)伴生菌对其生理代谢的影响,进一步了解发菜的生长体系以及发菜与伴生菌的相互作用,本文采用平板划线法从发菜固体培养基上分离出11株伴生菌,利用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(LC-q To F-MS)鉴定伴生菌产生的N-酰基高丝氨酸内酯类分子(AHLs)种类．通过质谱图可知微杆菌属(Microbacteriumsp.)ABNF-1产生C12-HSL,根瘤菌属(Rhizobiumsp.)ABNF-4产生C6-HSL、C10-HSL、C12-HSL,戈登氏菌属(Gordoniasp.)ABNF-9产生C6-HSL、C10-HSL,假单胞菌属(Pseudomonasbalearicasp.)ABNF-10产生C10-HSL、C12-HSL．对发菜AHLs产生菌共培养的代谢产物分析表明,主成分分析(PCA-X)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)的评分都呈现明显的离散现象,表明共培养组的代谢产物发生了变化,发菜的脂肪酸代谢和碳代谢发生了显著变化．通过外源添加AHLs发现,当群体感应信号分子AHLs浓度为5μmol/L以上时,AHLs能...     

植物病害生物防治菌的筛选

采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基对7株拮抗菌和3株云杉八齿小蠹伴生真菌进行对峙培养,研究7株拮抗菌对伴生真菌的抑制效果.结果表明,快速生长菌中,木霉属菌(Trichoderma atroviride)对2株云杉八齿小蠹伴生真菌[Ophiostoma penicillatum1(OP1)和Ophiostoma penicillatum2(OP2)]有显著的抑制效果,对伴生真菌[Ophiostoma sp(OS)]抑制效果显著的为Trichoderma citrinoviride;慢速生长菌中,对OP1拮抗效果最佳的菌株为Fusarium tricinctum,次之为Gibberella moniliformis;对OP2拮抗效果最佳的菌株为Alternaria tenuissima,次之为Fusarium tricinctum;对OS有抑制效果的菌株为Gibberella moniliformis、bionectria ochroleuca.以此筛选出数种拮抗菌株均具备作为生物防治资源的潜力.     

低温降解秸秆木霉菌的筛选、鉴定及功能评价

中国北方冬季气温低,秸秆直接还田后腐解效率低,易造成病原菌积累。为促进秸秆原位腐解,降低病原菌积累,采用低温培养结合纤维素酶、半纤维素酶、漆酶活性筛选,获得一株低温降解秸秆的木霉菌株C47-3;该菌在秸秆液体培养基中于15℃条件下培养15 d时,对秸秆的降解率为22.28%;该菌株经形态学观察和分子生物学鉴定为近深绿木霉Trichoderma paratroviride;木霉菌株C47-3及其挥发性物质对供试的葡萄座腔菌、禾谷丝核菌、灰葡萄孢等8种病原菌均具有抑制效果,对假禾谷镰孢菌的抑制率可达60%以上。筛选得到的木霉菌株C47-3在提高低温条件下秸秆腐解效率的同时具有一定的生防潜能,为我国北方冬季玉米秸秆还田后高效利用及土传病害的生物防治提供了菌种资源。     

Improving DNA damage repair ability ofE. coli to UV-radiosensitivity by DNA-mediated gene transfer of low energy ion beam

Using calcium chloride method of transfer gene as control, a new technique of transferring gene by low energy ion beam has been applied to the study of improving DNA damage repair ability ofE. coli to UV-radiosensitivity. The genome DNA pieces ofDeinococcus radiodurans, as “foreign” genetic materials, were introduced into the UV-radiosensitive strains ofE. coli by implantation of 20 keV Ar⁺ at doses ranging from 1 × 10¹⁵ to 2 × 10¹⁵ ions/cm². Results show that the transfected strains present higher UV-radioresistance than that of un-transfected ones and start ones. The survival rate of transfected strains and their unscheduled DNA synthesis (UDS) ability is increased, indicating that the transfer gene is a success.     

离子注入法对链球菌代谢产物透明质酸的影响分析

选用一株ATCC 700400马链球菌亚种,通过离子注入法对链球菌代谢产物透明质酸的影响来找寻透明质酸低耗高产的可能和路径。注入离子选用N+,注入能量分别为15 ke V和20 ke V,范围是0(对照)、(20×1014~100×1014N+/cm2(不同氮离子注入参数以对比)。透明质酸测定选用CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)比浊法,通过对比来筛选HA高产型链球菌。结果表明,在注入能量为20 ke V,剂量为20×1014N+/cm2时,产出透明质酸浓度明显高于其他菌株,诱变效果最好,为今后进一步诱变筛选及发酵条件优化奠定了良好的基础。     

离子注入选育莲的矿质元素与重金属元素的吸收分析

为探索离子注入技术新的应用,采用原子荧光光谱法、原子吸收光谱法和电感耦合等离子发射光谱法对离子注入选育莲的重金属元素和矿质元素吸收量进行了分析.结果表明,尽管同种重金属或者矿质元素吸收量在两个品种＂京广1号＂和＂京广2号＂间的变化并不一致,但是部分重金属元素与矿质元素的吸收量得到提高.这说明离子注入诱变能够通过提高植物的重金属吸收量而用于重金属污染的植物修复,离子注入诱变也能改善植物的矿质元素吸收而提高其营养价值.该研究为拓展离子注入技术的应用进行了有益的探索.     

几丁质酶在苏云金芽孢杆菌中的分布及抑小麦赤霉菌菌株的筛选

利用几丁质平板法和几丁质酶基因特异引物PCR两种方法,对本室保藏的995株苏云金芽孢杆菌的几丁质酶及其基因进行了检测.结果显示所有被检测的菌株都可以在几丁质为唯一碳源的平板上生长.其中93.0%的菌株PCR检测阳性,54.1%的菌株可产生明显的水解圈.证明苏云金芽孢杆菌中几丁质酶普遍存在.通过研究发现Bt几丁质酶活力高低与其血清型及杀虫晶体蛋白基因的类型无相关性.同时对286个菌株进行了抑小麦赤霉菌实验,筛选出19株抑真菌效果较好的苏云金芽孢杆菌.     

牛奶中苏云金芽胞杆菌的分离与鉴定

采用醋酸钠．抗生素分离法对超市牛奶样品进行苏云金芽胞杆菌（Bacillus thurgngiensis,Bt）的分离,获得2株Bt菌株,分别命名为BtBRC—LJ1和BtBRC-LJ2。利用PCR方法对Bt BRC-LJ1和BtB RC-LJ2菌株幼皿和nheC肠毒素基因的分布进行检测。结果显示,这2个菌株均含有这两种肠毒素基因。     

离子注入材料表面改性及其在摩擦学中的应用

对离子注入材料表面改性及其在摩擦学中的应用进行了综述.大量文献资料表明,离子注入是改善材料摩擦学性能的一种有效方法,许多金属离子或非金属离子均可注入到金属、陶瓷、高分子等材料的表面以改善其摩擦学性能.离子注入对材料表面耐磨性能改善的效果取决于注入离子的种类、注入剂量、注入能量和注入温度.讨论了为使该技术更加广泛地应用于实际摩擦学体系还须研究的一些问题.     

双注入匹配的计算机模拟和Ti^＋＋N^＋双注入的实验结果

为在金属中形成所需要的合金或金属间化合物而采用双重离子注入技术.2种注入离子注入能量和注量需要合理匹配.还考虑了溅射效应和扩散效应存在时的各种修正.在计算机模拟的基础上,对 Ti~++N~+双注入 H13钢中 Fe_2Ti,TiN 和 Fe_2N 等化合物进行了测量.这些合金相和金属间化合物的形成提高了钢表面抗磨损特性.还讨论了双注入金属表面的硬化机理.     

氮离子注入纤维素酶产生菌的诱变效应研究

作为一种新型的生物诱变手段,离子注入技术以其独特的诱变机理和显著的生物学效应受到关注,被广泛地应用于植物、微生物育种和转基因.本文应用低能离子注入技术对纤维素酶产生菌里氏木霉(Trichoderma reesei)进行诱变选育,研究低能N+注入对其存活率、菌体总抗氧化能力(T-AOC)、蛋白质含量以及产酶能力的影响.结果表明,低能N+注入对T.reesei的诱变效应显著,T.reesei经N+离子注入后存活率曲线呈现"双马鞍型",而菌体注量-总抗氧化能力曲线与注量-存活率曲线呈现一致的变化趋势.由此推测,离子注入微生物所诱导的总抗氧化能力的强弱变化很有可能决定微生物的存活情况.在注入剂量为250×1014N+/cm2的条件下得到突变幅度提高最多的菌株,CMCA活力较对照增加了24.3%.     

甘肃黄芪根瘤菌耐盐性及化学试剂和染料的抗性研究

选用67株分离自甘肃兰州地区的黄芪根瘤菌菌株,测定了供试菌对甲基蓝、甲基红、亚甲基蓝、刚果红、孔雀石绿5种染料和脱氧胆酸钠、亚硝酸钠2种化学试剂的抗性反应,及耐盐性测定.测定结果表明:黄芪根瘤菌具有较强的耐盐性,36％的菌株可以耐受5％NaCl,21％的菌株可以耐受6％NaCl;黄芪根瘤菌对两种化学药物脱氧胆酸钠和亚硝酸钠均具有极高的抗性,几乎所有菌株都能在终浓度为0.1％和0.2％的YMA培养基上生长;不同的黄芪根瘤菌菌株对不同染料具有不同的抗性,对不同浓度的同种染料也具有不同的抗性,同种黄芪根瘤菌菌株对不同染料具有不同的抗性,对不同浓度的同种染料也具有不同的抗性.     

Evidence for Base Substitutions and Repair of DNA Mismatch Damage Induced by Low Energy N^＋ Ion Beam Implantation in E. coli

Ever since the low energy N^ ion beam has been accepted, the mutations of ionizing radia-tion are attributable mainly to avoidance of DNA damages repair. Evidences based on in vivo proof results are limited. Using the E. coli wild type and mutator strains, the mutant frequencies suggest that base substitutions in rpoB gene are induced by the N^ implantation. A highly con-served region is selected to get the direct evidence for base substitutions by sequence of the high fi-delity PCR amplification products in mutants. Most of the mutants (90.9%, 40/44) have at least one base substitution in the amplification region. The evidences for CG to TA (55 %, 22/40), AT to GC (20%, 8/40) and TA to CG (5%, 2/40) transitions are identified. The transversions are AT to TA ( 15 %, 6/40) and GC to CG (5 %, 2/40). It is suggested that DNA cytosine methylase might play an important role in mismatch repair of DNA damage induced by N^ implantation by analysis of the mutant frequencies of mutator strains.