文冠果降血压肽的制备及其活性研究

以文冠果蛋白为研究对象,采用酶解法制备文冠果蛋白酶解肽,并对其体外抗高血压活性进行研究。以水解度为指标确定酶解条件。蛋白水解物经超滤得到分子量为1k Da,1~5 k Da和5 k Da 3个区段的多肽组分,测定其对血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)的抑制率。最佳酶解条件为:底物质量浓度40g/L,加酶量8%(质量分数)(碱性蛋白酶),酶解时间175 min,酶解温度55℃和酶解p H 9.0,此条件下水解度最高为22.97%;3种多肽组分中1k Da的ACE抑制率最高为83.43%,其半抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.394 mg/m L。文冠果蛋白酶解多肽具有显著的体外抗ACE活性,可作为降血压肽的开发原料。     

紫苏籽抗氧化肽的制备工艺研究

采用碱提酸沉法从紫苏籽粕中提取蛋白质,进行蛋白酶筛选,发现紫苏籽蛋白经碱性蛋白酶酶解后有最好的抗氧化活性和水解度(DH).在单因素试验的基础上,采取响应面分析方法,并建立数学模型,确定最佳酶解工艺.试验结果表明:各因素影响紫苏籽粗蛋白酶解液DPPH自由基清除率的主次顺序是:加酶量酶解时间pH值,最佳条件是:加酶量3 000 U·g~(-1),酶解时间5.00 h,pH值9.80,温度50℃,此时DPPH自由基清除率为73.64%,说明紫苏籽蛋白质酶解多肽拥有很高的抗氧化活性.     

血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽的酶法制备

以扇贝裙边的酶解产物——蛋白多肽对ACE活性的抑制率作为控制水解程度的指标,确定制备ACE活性抑制肽的最佳酶种及酶解工艺技术条件.通过胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合风味酶、枯草杆菌蛋白酶5种酶酶解扇贝裙边得到的蛋白多肽对ACE抑制能力的比较发现,5种酶在不同酶解时间所得到的酶解蛋白多肽都具有一定的ACE抑制能力,其中胃蛋白酶酶解蛋白多肽的ACE抑制率最高,为91.33%;再经L9(3)4正交实验对胃蛋白酶酶解工艺条件进行优化,确定酶解反应最佳条件是酶量400 U.g-底1物,pH 2.5,温度32℃,底物浓度(原料∶水)1∶2,酶解时间3 h;试验结果还表明,单酶(胃蛋白酶)的酶解蛋白多肽比复合酶(复合风味酶)和双酶(胃蛋白酶 木瓜蛋白酶)的酶解蛋白多肽对ACE活性的抑制能力都强.     

响应面法优化酶解鱼鳞制备ACE抑制肽的研究

鱼鳞是鱼类加工的下脚料之一,含有丰富的蛋白质和矿质元素等营养物质,是非常好的可利用生物资源. 文中研究了碱性蛋白酶酶解鱼鳞制备ACE抑制肽的优化工艺. 以ACE抑制率为指标,在酶解温度、酶解pH、加酶量、底物质量浓度等条件下先进行单因素实验,在此基础上运用响应面法优化碱性蛋白酶酶解鱼鳞制备ACE抑制肽的工艺条件. 结果表明:在加酶量61%(约12 000 U/g)、pH 89、温度547 ℃的条件下酶解2 h,ACE抑制率理论值为8536%,实际酶解物的ACE抑制率为862%,相对误差为091%.     

花生分离蛋白复合酶水解工艺优化研究

探讨了超声波辅助前处理对花生分离蛋白复合酶解的影响,比较了碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶等六种蛋白酶解物清除DPPH自由基的效果,确定碱性蛋白酶和胰蛋白酶较佳的复合比例为8∶2.在此基础上,开展响应面优化试验,以DPPH自由基清除率和水解度为指标,探讨复合酶与风味蛋白酶酶解的较佳工艺参数,并分析DPPH清除率和水解度相关性.实验结果表明,复合蛋白酶制备花生分离蛋白抗氧化肽的较佳酶解工艺为pH 8.5,温度49.36℃,酶添加量(E/S,质量分数m/m)3.40%,酶解时间203.59 min.     

米糠蛋白活性肽的制备工艺研究

初步研究酶法水解米糠蛋白制备米糠活性肽的工艺条件,同时探讨了不同料液比、pH值、温度和提取时间对蛋白水解率的影响.通过正交优化实验得出酶水解米糠蛋白的最佳条件是:酶解温度37℃,加酶量为0.5%,酶解时间是3h,酶解pH值为9.结果表明碱性蛋白酶酶解法和三氯乙酸酸溶法相结合,是一种很理想又有效的制备蛋白肽的方法.     

枸杞渣酶解糖化条件优化

为了合理利用枸杞提取多糖后的残渣，本研究以枸杞渣为原料，通过单因素及响应面试验，分析液料比，复合酶比例，复合酶添加量，酶解时间，酶解温度，pH对枸杞渣还原糖得率的影响，确定最佳酶解工艺。结果表明：枸杞渣酶解的最佳条件为液料比5∶1,复合酶比例1∶4,复合酶添加量2.0 mL,酶解时间3 h,酶解温度63℃,pH 4.5。在该优化条件下，枸杞渣还原糖得率为(68.54±0.09)%,与模型预测值68.83%接近，该模型可用于优化枸杞渣酶解糖化条件。     

复合酶法优化毛竹笋壳多糖提取工艺及其抗氧化活性研究

为研究复合酶法提取毛竹笋壳多糖的最优工艺,在单因素试验的基础上,以多糖得率为响应值,利用响应面优化法对酶添加量、酶解时间和酶解温度进行优化,以确定其最佳工艺条件。用Sevag试剂法对提取的多糖进行纯化,并对其单糖组成、抗氧化活性进行研究。结果表明,复合酶法提取毛竹笋壳多糖的最优工艺参数为:复合酶添加量1.6%,酶解时间105 min,酶解温度51℃。在最优条件下多糖得率为1.98%,与模型预测值的相对误差为2.94%。主要单糖组分半乳糖醛酸、半乳糖、木糖、阿拉伯糖的摩尔比为15.35∶32.82∶6.45∶39.13。采用体外抗氧化体系评价毛竹笋壳多糖的抗氧化效果,发现其具有良好的抗氧化活性,清除DPPH自由基和羟自由基的能力均表现出一定剂量效应。     

金枪鱼加工副产物的生物转化工艺研究

主要针对中性蛋白酶、胰蛋白酶、风味酶3种酶在不同加酶量下酶解金枪鱼加工副产物(下脚料)过程对其可溶性蛋白转化率的影响,以及保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌3种可食用性商业菌在不同添加量下对其可溶性蛋白转化率的影响。得出以下结论:金枪鱼下脚料添加量为2 g,料液比1:5时,酶解过程风味蛋白酶转化率最大值16.79%,胰蛋白酶转化率最大值16.63%,中性蛋白酶转化率最大值16.57%。发酵过程中,酵母菌接种量40%在发酵第5天时,蛋白转化率最大值为16.48%,嗜热链球菌接种量30%在发酵第5天时,蛋白转化率最大值15.77%,酶解及发酵过程,分别能使蛋白转化率提高,提高金枪鱼下脚料等低值海产品加工副产物的利用率,在不同加酶量及接种量条件,不同接种时间下可溶蛋白转化率发生变化。     

乳清蛋白肽的酶法制备、分离纯化及活性评价

以抗氧化活性及蛋白质回收率为筛选指标对乳清蛋白肽酶解工艺进行优化,用层析柱对酶解液进行逐级分离纯化,并对其分子质量进行检测.研究结果表明:利用胰酶、复合风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶酶解制备乳清蛋白肽,最佳用酶为碱性蛋白酶、最适底物含量为4.0%、最适加酶量为8000U/g、最佳酶解时间为4h;酶解液经DEAE-52纤维素层析后得到的A组分抗氧化活性最好,其还原力为0.320 0±0.004 1,DPPH自由基清除率为6.58%±0.36%;A组分再经Sephadex G-15葡聚糖凝胶层析柱分离纯化后得到组分G,其DPPH自由基清除率为6.73%±0.083%;组分G的主要成分为分子质量378 u的肽段,其一级氨基酸组成为赖氨酸(Lys)、亮氨酸(Leu)及丝氨酸(Ser).     

紫贻贝酶解多肽体外抗肿瘤活性研究

确定了紫贻贝胰蛋白酶水解时的最佳条件,研究了紫贻贝酶解多肽的体外抗肿瘤活性.采用正交实验方法, 以料液比、pH、加酶量、酶解温度和酶解时间为因素,以酶解液的氨基氮含量和肿瘤细胞增殖抑制率为指标进行L16(45)正 交实验,MTT法检测酶解多肽对DU-145、PC-3、H1299和MGCS0-3等肿瘤细胞的抑制活性;HE染色法观察酶解多肽对 肿瘤细胞形态的影响;免疫组化法检测酶解多肽对细胞中Bel-2表达的影响.结果表明:当料液比为1:4、pH为8.5、加酶 量为1 000 U/g、温度为45℃、酶解时间为5h时酶解多肽的水解度最大;当料液比为1:4、pH为8.0、加酶量为1 500 U/g、温 度为40℃、酶解时间为2h时酶解多肽的抗肿瘤活性最强,该肽可以下调肿瘤细胞中Bc1-2的表达.紫贻贝酶解多肽具有 抗肿瘤活性,可能是通过诱导细胞凋亡来实现的.     

扇贝边酶法水解工艺的优化

以扇贝边为原料,首先分析了扇贝边的营养成分,然后分别用中性蛋白酶、动物蛋白水解复合酶对扇贝边进行水解,通过正交实验考查了加酶量、酶解时间、酶解温度及底物浓度对扇贝边水解率的影响。结果表明,新鲜扇贝裙边水分含量为86.06%(g/g),总氮含量为1.14%(g/g),氨基态氮含量为0.21%(g/g),确定了扇贝边的最佳酶法水解工艺条件。为利用扇贝边资源制备水解动物蛋白及海洋生物活性物质探索一种有效途径。     

响应面法优化牡蛎蛋白酶解工艺的研究

为提高牡蛎蛋白的利用率,以舟山长牡蛎为研究对象,利用5种不同蛋白酶对牡蛎蛋白进行酶解,筛选出最佳蛋白酶,并以氨基态氮(AAN)作为考察指标,通过响应面分析,筛选出最佳牡蛎蛋白活性肽提取方案。结果表明:酶解液中AAN含量情况为风味蛋白酶中性蛋白酶胰蛋白酶碱性蛋白酶木瓜蛋白酶,获得舟山长牡蛎的最佳蛋白酶为风味蛋白酶,AAN含量达到5.21 mg·g~(-1);响应面分析法优化实验设计表明,酶添加量(A)、pH(B)及酶解时间(C)3因素对AAN含量的影响有显著性(P0.05),模型的相关系数值接近1,实验方案具有可靠性。模型推荐最佳实验条件为:酶添加量1.3%、pH 7、酶解时间5 h,此时酶解液中氨基态氮(AAN)含量达到最高5.59±0.25 mg·g~(-1),与预测的AAN值接近,说明该条件具有可行性。研究结果将为牡蛎蛋白酶解技术提供理论指导。     

大豆肽酶解制备工艺研究

以大豆豆粕为反应底物,用复合蛋白酶将其进行水解,对反应条件（底物浓度、反应温度、pH值、反应时间、酶用量）等工艺参数进行了系统的研究分析,并总结大豆肽含量及大豆蛋白水解度与各影响因子之间的关系。研究结果表明：反应温度为50℃,pH值为6～8,底物浓度为25%,添加复合酶量为3 000 U/g,反应时间为24 h,在此条件下酶解液中肽得率最高为49.76%。提供一种复合酶酶解制备多肽的方法,以豆粕为原料,经单酶及多酶协同水解→纯化→超滤→浓缩→喷雾干燥或冷冻干燥,制成粉末状肽制品的方法。     

短讯

一种大蒜蛋白酶解物系列产品及其制备方法和用途江苏大学的“一种大蒜蛋白酶解物系列产品及其制备方法和用途”被授予发明专利.该发明涉及植物蛋白的开发利用领域,以大蒜脱除大蒜油或大蒜素之后得到的包含大蒜蛋白质的残余物为原料,通过加蛋白酶采用酶法水解,制成富含活性肽的蛋白酶解物.采用单酶水解和双酶水解的方法,可以在温和的条件下,将大蒜残余物如干渣粉中蛋白质酶解成2~10肽的活性多肽和氨基酸类物质.该酶解液的制备方法包括:大蒜干渣粉碎→酶解→灭酶→离心→过滤→超滤→酶解物.酶解物通过后续加工可以制成不同的液剂和粉剂制品.…     

复合酶酶解餐厨垃圾的工艺条件优化研究

采用复合酶处理餐厨垃圾，旨在酶解餐厨垃圾中的营养物质和降低其固形物含量。以餐厨垃圾的降解率为优化指标，通过单因素实验初步探究复合酶添加量及比例、酶解时间、反应初始pH值、酶解温度等因素对酶解反应的影响。采用L9(34)正交实验进行工艺优化，得到最佳工艺条件为酶制剂添加量0.7%、反应初始pH6.0、酶解温度55℃，此时餐厨垃圾的降解率为33.98%。     

复合酶水解蚯蚓蛋白的研究

蚯蚓是一种富含蛋白质的功能性生物资源,为提高蚯蚓蛋白水解度,对水解蚯蚓复合酶配比进行优化,并建立复合酶配比优化回归方程模型;采用U30(3013)均匀设计试验对复合酶(木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、菠萝蛋白酶)配比进行设计,以蚯蚓蛋白水解度为指标,筛选出水解度最高的复合酶配比;结果表明,配比优化回归方程为:Y=58.975+8.270x_2+12.256x_1x_2x_3+7.677x_1x_3-5.243x_2~2,回归方程高度显著(P 0.05);分析预测最佳配比为:木瓜蛋白酶23.2%、酸性蛋白酶53.7%、菠萝蛋白酶23.1%,模型预测最大水解度为62.60%,实际验证水解度为(62.84±0.21)%,高于试验组与模型预测值说明配比优化后的复合酶可提高酶解效率并为蚯蚓蛋白酶解工艺提供参考。     

脉冲超声预处理对玉米黄粉酶解制备ACEI肽的影响

希望借助超声波预处理,提高玉米黄粉酶解制备ACEI活性肽的反应效率.通过单因素试验和响应面分析法优化得到玉米黄粉脉冲超声预处理的最优工艺:超声频率20 kHz,超声功率1 000 W,超声时间13.18 min,料液温度51.59 ℃,脉冲超声工作间歇时间比2 s/2 s.在上述条件下酶解产物对ACE抑制率达66.24%.与未超声的对照组相比,在保持酶解产物IC50值基本不变的情况下,超声预处理原料后酶解产物的抑制活性提高了74.08%,生产效率提高了55.11%,蛋白转化率提高了55.06%,米氏常数km降低了33.30%.     

超声辅助酶解法制备兔肉抗氧化肽工艺

以搅碎的兔肉末为原料，以超声辅助酶解制备抗氧化肽，对其抗氧化活性进行评价，发现抗氧化活性较好.比较不同酶制备的抗氧化肽的DPPH自由基清除率，从胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中筛选出最佳用酶，利用单因素实验和响应面法优化了兔肉酶解的工艺条件.结果表明，酶解效果最好的是胰蛋白酶，在超声时间22.5 min,超声温度37℃,超声功率330 W的条件下酶解得到的抗氧化肽DPPH自由基清除率最好，为81.17%,与响应面优化实验回归模型的预测值基本一致；在此基础上制备兔肉抗氧化肽，对酶解液的ABTS、羟基自由基和超氧阴离子清除率进行检测，值分别为44.03%、94.69%和34.32%,均大于未酶解液.该研究可以为制备兔肉抗氧化肽方面提供理论依据和数据支持.     

酶解大豆粉蛋白条件优化研究

从底物浓度、pH值、酶解温度、加酶量、酶解促进剂和酶解时间等方面研究了碱性蛋白酶Alcalase和木瓜蛋白酶复合对全脂大豆粉酶解的影响,并运用单因素和正交试验设计优化酶解条件.结果表明,底物体积分数4.5%、pH值8.5、温度60℃、复合酶加酶量(碱性蛋白酶Alcalase与木瓜蛋白酶活力之比为2∶1)2 640 U/g,添加5 mmol/L Mn2+酶解180 min效果较好,水解度达到17.8%.