马立克氏病毒感染的鸡肝脏肿瘤中热应激蛋白108含量的增高及其基因序列分析和表达的研究

从马立克氏病毒(MDV)引起的鸡肿瘤肝脏组织中纯化热应激蛋白(hsp)108,蛋白浓度测定结果显示,MDV感染后的鸡肝脏hsp108蛋白含量明显升高,约为正常鸡肝脏hsp108的4倍,发现鸡肝脏组织中hsp108含量在发生肿瘤后显著升高.经酸释放得到与hsp108结合的多肽,高压液相层析后没有发现MDV特异性多肽;对hsp108进行了基因序列分析,MDV感染引发的鸡肿瘤肝脏组织的hsp108与正常鸡肝脏组织的hsp108氨基酸完全相同,没有发生变异;克隆了鸡肝脏hsp108基因,将其在大肠杆菌中表达,纯化后与一个已知的乙肝病毒抗原表位进行体外组装,结果显示重组hsp108蛋白可以和乙肝病毒抗原肽在体外特异性结合,具有多肽结合活性     

鸡马立克氏病病毒与大肠杆菌混合感染症的病原分离鉴定

鸡呼吸道病流行病学调查的过程中,在韶关市某养鸡场观察到一群100日龄广西黄肉仔鸡发生了以呼吸道症状为主要临床表现的疾病,死亡率达10%.病理解剖学检查可见病鸡有单一或多器官肿瘤病变(4/8)、典型腹膜炎病变(3/8)和肿瘤与腹膜炎病变并存(2/8).在病鸡肿瘤组织切片中可见典型MD病理组织学变化.采用CEF接种方法,从有肿瘤和腹膜炎病鸡的羽髓液中分离到MDV.在病鸡的心、肝、脾等脏器分离到大肠杆菌O78血清型菌株.研究结果表明:HVT疫苗免疫鸡群MDV强毒株和E.coliO78血清型菌株以混合感染形式存在,病鸡出现以呼吸道症状为主的临床表现,死亡率明显增加.     

马立克氏病病毒meq基因功能研究

从马立克氏病病毒（MDV）不同致病型毒株meq基因序列，meq基因产物及其细胞内表达特性和meq蛋白生物学功能的研究探讨马立克氏病病毒致瘤基因meq功能。完成了648A,CV1988/Rispens,814，广西地方毒株G2，N，0093，0095，0297，0304共9个MDV毒株meq基因的序列测定。MDV不同致病型毒株的meq基因序列相对比较保守，它们相互间核苷酸和氨基酸序列的同源性均很高；与所有7个致瘤的MDV毒株相比，在2个MDV-1弱毒疫苗CV1988/Rispens株和814株发现有二个特征性位点突变。此外，还在其ORF中首次发现含15个氨基酸残基（EELCAQLCSTPPPPI）的2个重复和含6个氨基酸残基（PPICTP）的4个重复，全分布在MEQ蛋白C-端的转录激活域内。MEQ蛋白的表达仅局限于感染细胞的核内，而且随感染时间增加。具有从核质向核仁和核膜转移趋向；Western Blotting和免疫沉淀试验证实重组杆状病毒感染细胞裂解物中有大小约为60kD的特异带，利用表达的MEQ蛋白产物免疫BALB/c小鼠，获得的杂交瘤细胞被克隆并与MDV感染的鸡胚成纤维细胞（CEF）做免疫荧光试验（FA），获得4株稳定产生抗MEQ蛋白单克隆抗体（McAb)的杂交瘤细胞，其中3G12E6单克隆抗体能够检测到MDV致瘤株感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中表达的meq基因产物，而CV1988/Rispens感染的细胞则未检测到，发现细胞内表达的meq基因产物可明显促进MDVGA株对体外培养细胞的感染及增殖。研究结果表明，meq基因在感染细胞内的表达水平是MDV增殖和致病，致瘤的分子基因。     

马立克氏病病毒MEQ蛋白单克隆抗体的制备及应用研究

基因表达与病毒感染细胞及致瘤能力之间关系的阐明，将有助于我们对马立克氏病病毒（MDV）meq基因功能的了解，该研究利用通过杆状病毒载体在昆虫细胞系SF9上高度表达的MEQ蛋白免疫BALB/c小鼠，然后收获其免疫脾细胞与肿瘤细胞系SP2/0通过PEG于体外融合，获得的杂交瘤细胞被克隆并通过与MDV感染的鸡胚成纤维细胞（CEF）做免疫荧光试验（FA），进行其分泌抗MEQ单克隆抗体（McAb）能力的筛选，获得4株稳定产生抗MEQ蛋白McAb的杂交瘤细胞，其中3G12E6通过FA和免疫酶组化技术能够检测到MDV致瘤株感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中表达的meq基因产物。研究的结果首次发现，MDV致瘤株GA、RB1B感染的CEF及自然MD肿瘤细胞中均有meq基因的表达，但在弱毒疫苗株CV1988感染的CEF和免疫鸡组织细胞中则未检测到MEQ，作者认为这是由于meq基因在致瘤株中表达水平高，而在非致瘤株中表达水平低所致，这可能是决定MDV毒力（virulence）或致瘤性（oncogenicity）的关键因素之一。     

鸡Cong菌科研究概况

本文论述了鸡Ｃｏｎｇ菌科的研究史范围。笔者认为，它包含两个属；鸡Ｃｏｎｇ菌属和华鸡Ｃｏｎｇ菌属。提出了该科已知种的详目，并对该科的种的分类和鉴定等问题进行了讨论。     

MDV感染B19、B21单倍型SPF鸡免疫器官中miR-146b-5p的变化规律

目的分析miR-146b-5p在B19(MD易感)与B21(MD抗性)单倍型鸡感染MDV后的表达变化规律,并探讨其可能与MD抗性/易感性相关的分子机制。方法我们在MDV超强毒株Md5攻毒实验和前期高通量测序分析发现,miR-146b-5p表达量有明显差异,为此进一步利用实时荧光定量PCR技术,检测MD感染B19和B21单倍型鸡5dpi、10dpi和21dpi,miR-146b-5p在法氏囊、胸腺和脾脏组织中的表达量变化情况。结果 miR-146b-5p在5dpi、10dpi和21dpi实验组和对照组的表达量明显不同,miR-146b-5p在B21实验组中的表达量要远高于对照组,且差异显著;而miR-146b-5p在B19实验组中的表达量高于对照组但差异不显著。结论 MD感染后,在不同免疫器官中miR-146b-5p的表达量可能存在组织特异性,不同鸡系之间在感染后也存在一定的差异,但具体机制尚需进一步深入研究。     

粗糙集连续属性离散化的SOM网络方法

基于Rough Set理论中的不可分辨性原理,给出两个新的定义属性的最大区分值(Maximum Dis-cernibility Value,MDV)和属性冗余度(Attribute Redundancy Rate,ARR)。在数据预处理阶段,属性的MDV数值用于确定关于自组织映射网络SOM输出单元数量的启发式搜索策略;属性冗余度则用于衡量属性约简结果的信息冗余程度,并以此作为优化SOM网络输出层结构的依据。不依赖于领域经验知识,建立了MDV、SOM、ARR的组合算法模型,实现了Rough Set理论中连续属性的自动离散化计算,并明显提高了属性约简的速度。最后,通过项目实例对全过程进行有效验证。     

致弱Ⅰ型MDV pp38基因同源物的克隆和序列分析

将致弱Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV)感染的细胞基因组DNA的EcoRⅠ酶切产物建于Puc18质粒载体文库中,以digoxingenin标记的含有强毒GA株MDV pp38基因克隆片段作为探针,进行原位杂交反应,初步筛选出阳性重组质粒,进一步用EcoRⅠ酶切分析筛选到含pp38基因同源物的重组Puc18质粒. 序列分析表明该pp38基因同源物与pp38基因有极高的同源性,仅有1个碱基突变并导致1个氨基酸的替换.     

IB-ELISA诊断试剂的研究

目的　为鸡群日常监测传染性支气管炎病毒 (IBV)抗体提供一个方便、特异、快速的检测方法。方法　利用 9日龄SPF鸡胚尿囊腔接种培养IBV ,以及鸡胚成纤维细胞传代培养IBV ,经纯化后 ,测定蛋白含量 ,作为包被抗原 ,利用过碘酸盐法标记兔抗鸡IgG作为酶结合物 ,用TMB作为显色剂 ,建立起酶联免疫吸附试验 (ELISA)技术 ,检测血清样品中传染性支气管炎抗体。结果　上述两种方法制备的抗原皆可用于此试验 ,与NDV、MDV、IBDV、AIV、APIV、REV、ILTV、IC、MG、MS等抗血清无交叉反应 ,与IDEXXIB ELISA比较 ,结果吻合较好。结论　本研究制备的IB ELISA诊断试剂 ,可用于日常监测传染性支气管炎病毒抗体     

内蒙古鸟纲动物一新记录种——勺鸡

2000年10月在内蒙古赤峰市南部山地获得雌雄勺鸡pucrasiamacrolopha标本各一只,系内蒙古新记录种,属河北亚种P.m.xanthospila.该地区是目前已知勺鸡分布区的最北界,也是勺鸡分布区年均气温最低、年降水量最少、无霜期最短的地区.     

鸡传染性法氏囊病毒LS株的分离与鉴定

用SPF鸡胚,从江苏溧水某鸡场病死鸡的法氏囊组织中分离到一株病毒,接种健康非免疫鸡,能致鸡3～5 d内全部发病,死亡率达55%以上,腿肌和腺胃出血,肝和肾肿大出血,脾脏出血,法氏囊肿大出血;该病毒不能凝集鸡红细胞,可以与IBDV阳性血清产生沉淀;应用RT-PCR进行检测,扩增IBDV VP2基因,并与GenBank中的已知序列进行比较.结果表明,所分离的病毒为IBDV毒株.     

马立克氏病的流行病学调查及防治

<正>MD(马立克氏病)是一种高度接触性致肿瘤性传染病,以内脏、肌肉、皮肤淋巴肿瘤的形成和周围神经淋巴细胞浸润在临床上较为常见.MDV早期感染导致胸腺和法氏囊萎缩、坏死,引起免疫抑制,使鸡新城疫,鸡败血霉形体、鸡球虫病等易感性增强,疾病的发生又加剧MD的发生,从种使MD在临床上较为复杂.MD的免疫是CMI,凡能使CMI降低的绣因(饲养管理不当、密度大、卫生差、饲料霉变、疫苗接种不当等)都能使MD的易感性增高和死亡率增加.MD的易感年龄4—18周龄有向后延伸的趋势,潜伏期7—9天(3—5天)有较     

养鸡

小明和小华两家都养鸡,已知两家鸡相减得5,相除得6,相加得7,相乘得6。请你想一想,小明和小华家各养了多少只鸡?     

MDV中meq基因对CEF细胞chTERT,chTR表达影响的研究

利用TaqMan探针技术,采用实时荧光相对定量RT-PCR方法检测了MDV中meq基因对鸡胚成纤维细胞(CEF)的端粒酶催化亚单位基因(chTERT)、端粒酶RNA亚基(chTR)表达水平的影响,并用TRAP法测定了端粒酶活性,用流式细胞仪检测了细胞周期的变化.实验结果表明,转染48 h后chTERT表达水平为转染后72 h的16倍,chTR表达水平在转染前后基本不变;转染48 h后CEF细胞的相对端粒酶活性是转染72 h后的12倍;在转染后72 h S期细胞的百分比较未转染细胞显著增加.     

孔雀低致病性禽流感病毒株的分离与鉴定

用鸡胚分离方法从发病孔雀脑组织中分离病毒;将分离病毒进行血凝试验、血凝抑制试验、致病指数试验和半数致死量试验。结果表明,该株病毒可凝集鸡红血球,血凝性可被已知的禽流感(H9N2)抗体所抑制,脑内致病指数在1.6~2.5范围内,半数致死量,致病指数为50%,表明该病毒为低致病力禽流感毒株。     

慢性呼吸道疾病的致病原,大鼠纤毛相关呼吸道杆菌,一种新认识的病原菌的分离,培养和特征

<正> 把患有慢性呼吸道疾病(CRD)的实验大鼠的支气管擦洗物,接种到鸡胚尿囊内进行纯培养,分离出一种革兰氏阴性的丝状杆菌。它不能在无细胞培养基上生长。在间隔为1周的20次连续传代中,没有鸡胚死亡。将传到第十代的鸡胚尿囊液,给8—12周令的剖腹取胎后养在屏障系统内的SD大鼠鼻腔接种,这种杆菌可重新从鸡胚中分离出来。在研究过程中,被接种的大鼠放在Horsfall单位中,使之保持无其它已知的呼吸道病原,如霉形体和鼠病毒。这种杆菌生长在     

仙居育成高产蛋用型杂交鸡

仙居鸡是我省著名的蛋用型地方鸡种,它产蛋率高,适应性广,耗料省。为此,国家农牧渔业部专门拨款,在仙居鸡主要产地仙居县,建立种鸡场,繁育仙居鸡。但该鸡不足之处是体型较小,蛋个不大,影响养鸡经济效益。为开发利用地方良种鸡资源,仙居县种鸡场于1983年引进罗斯鸡作父本,与仙居鸡作母本进行杂交。通过三年的试验研究,培育成功一种兼有仙居鸡与罗斯鸡优良性状的罗伯杂交鸡。这种杂交鸡产蛋性能好,饲养10个月母鸡产蛋率在81％以上;蛋个重从原来     

鸡新城疫病毒分离株部分生物学特性的测定

对已经分离的鸡西新疫病毒分离株部分生物学特性进行了测定。该新城疫病毒分离株为1日龄雏鸡脑内接种致病指数（ICPI）为1.51，鸡胚最小致死量（MLD）为10^-8，平均死亡时间（MDT）为46.2h，鸡胚半数感染量（EID50）为10^-10.1，并与已知标准株进行了比较。按规定的标准判定，该分离株为毒力较强的鸡新城疫强毒株。     

雪水创造的奇迹

雪水能使动植物的生长创造奇迹。前苏联科学家做了多年的实验:将同样重量、同样月份的母鸡分为两群。一群鸡饮雪水,另一群鸡饮普通自来水。实验进行了3个月。第一群鸡下了538个蛋,而另一群鸡只下了272个蛋,而且饮雪水的鸡下的蛋体积较大。     

独龙鸡种群遗传结构及遗传多样性初步研究

独龙鸡是一个古老的地方鸡种,其分类地位和系统地位还不明确.本研究用26对微卫星引物对独龙鸡群内遗传多样性进行检测,25个微卫星位点在独龙鸡中呈现丰富的多态性,共检测到90个等位基因,其中ADL0166位点的等位基因数8个,为最多;而ADL0112、LEI0166、MCW0067、ADL0268、MCW0294和MCW0078两个位点的等位基因数达9个,为最少,独龙鸡在MCW103和LEI094微卫星位点上有其特有的等位基因,它拥有其他鸡种所不具有的遗传基因,表明独龙鸡是我国一个新发现的独立鸡种.