白三叶高频组织培养再生体系的研究

以白三叶的子叶节为外植体,对影响白三叶愈伤组织的诱导、丛生芽的分化及生根的激素种类和浓度进行了优化.结果表明:诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 0.4 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂,诱导率为62.67%;诱导从生芽分化的最佳培养基为:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂,分化率为92.33%;诱导生根的最佳生根培养基为:MS+NAA 0.2 mg/L+1.5%蔗糖+0.8%琼脂,生根率达100%;建立了一个高频的白三叶再生体系,为白三叶基因工程奠定基础.     

高羊茅高频再生体系的建立

目的建立高频再生体系,为相关基因的转化提供良好的受体系统。方法以高羊茅(Fes-tuca.arundinacea)成熟种子为外植体,以MS为基本培养基,进行高羊茅胚性愈伤组织诱导、继代、分化及生根培养。结果初生愈伤组织在MS 2,4-D5 mg/L CH400 mg/L 蔗糖60 g/L 琼脂12 g/L的继代培养基诱导出体细胞胚后,在含6-BA2.0 mg/L NAA0.5 mg/L的MS培养基上分化形成丛生苗,分化率达78.9%;再生苗在1/2 MS NAA0.5 mg/L生根培养基上生根,生根率达100%。结论MS 2,4-D 9 mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基,MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.5mg/L为最佳分化培养基,1/2 MS NAA0.5 mg/L为最佳生根培养基。     

文山三七块根的植物组织培养研究

选择云南文山三七块根为外植体,采用全面实验法或正交实验法,研究组织培养过程中外植体最佳表面消毒方案和最佳愈伤组织诱导、分化生芽、生根方案.试验结果表明,三七块根最佳表面灭菌方案为75%乙醇消毒10 s,再用2%次氯酸钠溶液消毒15 min;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+KT1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,批pH=5.8;生芽生根培养基可以选择MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+2,4-D0.5 mg/L+NAA1.0mg/L NAA+6-BA1.0mg/L,pH=5.8.     

中华芦荟成熟叶组织培养的研究

以中华芦荟成熟叶为外植体,接种于9组不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度配比的脱分化培养基中,诱导外植体的脱分化形成愈伤组织。研究表明,中华芦荟叶愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+1.0g/L活性炭;诱导不定芽的适宜培养基为MS+1mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.7g/L活性炭;及诱导生根的适宜培养基为1/2MS+0.2mg/Lα-萘乙酸(NAA)+20g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.5g/L活性炭,生根率达100%.     

水晶掌组织培养与快速繁殖

以多肉植物水晶掌叶片为外植体,采用MS基本培养基,附加不同的植物生长调节剂组合,研究了水晶掌愈伤组织的器官发生和植株的再生技术.实验结果表明:A1(MS+BA 3.0+NAA 0.3+3%蔗糖+0.7%琼脂)配方最为适合愈伤组织的诱导;B4(MS+BA 4.0+NAA 0.2+3%蔗糖+0.7%琼脂)配方最为适合愈伤组织的增殖;C1(MS+BA 3.0+NAA 0.2+3%蔗糖+0.7%琼脂)最为适合愈伤组织分化,芽分化较快,苗健壮,并且有丛生芽;促进生根的最佳配方为D4(1/2 MS+IBA 1.0+3%蔗糖+0.7%琼脂);组培苗经炼苗后,移栽成活率在95%以上,以此建立水晶掌试管苗无性繁殖体系.     

麻疯树花药愈伤组织诱导分化与生根培养

以麻疯树花粉处于单核中晚期的花药作为实验材料,探讨了麻疯树花药培养从愈伤组织诱导,愈伤组织分化芽,壮苗,生根的整个过程.其中愈伤组织诱导的最好培养基为N6+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.4 mg/L+10%蔗糖,避光培养;在愈伤组织分化芽的过程中,TDZ起到了非常明显的效果,最佳的培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IAA 2.0 mg/L+水解酪蛋白1g/L+3%蔗糖;最合适的壮苗培养基为MS+GA3 1.0mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+3%蔗糖;生根效果     

珙桐叶片的脱分化和分化诱导研究

研究了以濒危植物珙桐叶片作为外植体诱导愈伤组织及分化再生植株.结果表明:本实验中,诱导愈伤组织的最佳培养基为1/2MS+2.0 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA;愈伤组织继代的最佳培养基为1/2MS+3.0 mg/L IBA+1.5 mg/L 6-BA最佳分化培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA+0.2 mg/L GA_3,芽分化率为6.2%;生根最佳培养基为1/2MS+0.4 mg/L IBA,生根率为60%.     

山苦菜无性系建立的研究

以山苦菜无芽嫩茎为外植体诱导愈伤组织,经过继代培养后,以生长状态良好的愈伤组织进行分化培养,继续进行分化苗的生根培养,建立起山苦菜的无性系.结果表明:MS+BA(1.0mg/L)+NAA(0.1mg/L)+蔗糖(30g/L)是愈伤组织诱导和继代培养的最佳培养基;愈伤组织分化的最佳培养基为1/2MS+蔗糖(15g/L);诱导不定芽生根的最佳培养基是1/4MS+IAA(0.2mg/L)+蔗糖(20g/L);山苦菜试管苗移栽的最佳基质为1/2园土+1/2河沙.     

凌风草组织培养体系的建立

以凌风草为材料,通过对该植株再生条件的优化,获得适宜凌风草愈伤组织再生的外植体材料和基本培养基,建立凌风草愈伤组织再生体系.试验结果表明:愈伤组织诱导的最适外植体为凌风草种子,最适基本培养基为MS培养基,最佳培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L+6-BA0.3 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+NAA0.1 mg/L+6-BA1.0 mg/L+KT2.0 mg/L;生根最佳培养基为MS+NAA0.2 mg/L+C 0.2 g/L.     

中间锦鸡儿组织培养体系的建立

以中间锦鸡儿茎段为外植体,建立了它的组织培养体系,具体条件如下:愈伤组织诱导培养基为MS+GA30.15mg/L+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.4mg/L+AC 0.1g/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,愈伤诱导率达33.33%;丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,诱导率为13.33%;诱导生根培养基为MS+IAA 0.5mg/L+GA30.15mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,生根率达60%;将生根幼苗移至蛭石和营养土体积比为2∶1的基质中,移栽成活率高达100%.     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

蝙蝠葛根茎愈伤组织培养及试管苗分化的研究

为保护蝙蝠葛的野生资源,该研究以嫩茎为材料,进行了愈伤组织生长、愈伤组织分化培养,生长芽生根及试管苗移栽和定植的研究。结果证明:MS+琼脂0.46%+蔗糖37 g/L+ZT 0.5 mg/L+La(NO3)3.6H2O 0.3 mg/L+2,4-D 2.4 mg/L是嫩根茎段愈伤组织生长培养的适宜培养基;1/2 MS+AgN030.6 40 g/L+琼脂0.47%+蔗糖3.3%+NAA 0.075 mg/L+BA 0.45 mg/L是愈伤组织分化培养的适宜培养基;White+琼脂0.48%+ABT2号0.6 mg/L+蔗糖1.4%+IAA 0.1 mg/L是生长芽生根培养的适宜培养基;试管苗移栽成活率为89.2%;定植成活率为98.9%。定植的试管苗次年正常开花结果,保持了野生蝙蝠葛的植物学性状。     

辣蓼铁线莲根芽愈伤组织试管苗培养研究

为保护辣蓼铁线莲野生药材资源,以根芽为材料,采用组织培养方法,进行了愈伤组织培养与分化、无根苗生根培养、试管苗的移栽和定植的研究.结果表明:适宜的愈伤组织生长培养基是1/2 MS+琼脂4.5 g/L+蔗糖40 g/L+ZT 0.3 mg/L+2,4-D 2.5 mg/L;适宜的愈伤组织分化培养基是MS+NAA 0.1 mg/L+AgNO30.4 mg/L+琼脂4.8 g/L+蔗糖3.0%+ZT 0.8 mg/L;适宜的无根芽生根培养基是White+蔗糖12 g/L+琼脂5 g/L+IAA1.2 mg/L;试管苗移栽成活率为89.7%;定植成活率为98.2%;定植的试管苗能保持辣蓼铁线莲全部植物学性状.     

大叶常绿杜鹃叶片离体培养及不定芽再生

以大叶常绿杜鹃无菌苗的嫩叶为试验起始材料,研究了其离体培养和不定芽再生的过程。结果表明:培养基为MS+ZT(1.0 mg/L)+ NAA(0.1 mg/L)时,大叶常绿杜鹃叶片可直接诱导再生不定芽,诱导率达70%; 也可以通过愈伤组织途径间接诱导出不定芽,愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D(2.0 mg/L)+KT(0.2 mg/L),增殖最佳培养基为MS+ZT(0.5 mg/L)+IBA(0.1 mg/L),愈伤组织分化的最佳培养基为MS+ZT(0.04 mg/L)+NAA(0.01 mg/L); 分化率最高为70%,分化苗数为6～10株; 生根培养基为MS+NAA(0.2 mg/L)+IBA(0.4 mg/L)时,生根率可达90%。腐殖土、黄沙、珍珠岩配比为4:1:1的混合基质较适合常绿杜鹃试管苗的炼苗移栽,成活率为90%。     

苦苣菜下胚轴愈伤组织分化及试管苗培养研究

为保护苦苣菜野生资源,以苦苣菜下胚轴为材料,进行了愈伤组织诱导培养、分化培养、生根培养和试管苗移栽及定植的研究,结果表明:MS+琼脂4.8 g·L-1+蔗糖42 g·L-1+KT 0.4 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+2,4-D2.0 mg·L-1是愈伤组织诱导生长的适宜培养基;1/2 MS+琼脂4.5 g·L-1+蔗糖35 g·L-1+ZT 0.8 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1是愈伤组织块分化培养的适宜培养基;1/4 MS+IAA 0.6 mg·L-1+琼脂4.3 g·L-1+蔗糖15g·L-1是生长芽试管苗培养的适宜培养基;温室内试管苗移栽成活率为91.7%;试管苗在山林旁定植成活率为97.1%,定植试管苗的植物学性状与实生苗基本一致.     

钻天柳无芽嫩茎离体快速繁殖的研究

为保护钻天柳这一濒危物种,以无芽嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导和分化,不定芽生根,试管苗的继代培养、移栽、扦插和移植的研究,建立起钻天柳离体繁殖技术.结果证明:MS+BA0.5 mg/L(以下单位相同者略)+2,4-D0.5+NAA1.0+蔗糖30 g/L为无芽嫩茎愈伤组织的诱导的适宜培养基;MS+BA1.0+NAA0.8+蔗糖30 g/L为颗粒状愈伤组织继代培养的适宜培养基;MS+AgNO31.0+BA 0.6+NAA 0.1+蔗糖30 g/L是愈伤组织分化培养和不定芽继代分化培养的适宜培养基;1/2MS+IAA 0.5+NAA 0.1+蔗糖20 g/L是生根及生根继代培养的理想培养基;移植到河岸上的试管苗生长旺盛,生物性状保持不变.     

滴水珠组培快繁的实验研究

目的:通过滴水珠组织培养及快速繁殖,解决滴水珠的资源匮乏问题。方法:以滴水珠的珠芽和叶片及叶柄为外植体,进行愈伤组织诱导、愈伤组织分化、丛生芽的增殖、生根诱导及组培苗的移栽研究。采用酸性染料比色法测定滴水珠愈伤组织中总生物碱的含量。结果:滴水珠组织培养的最佳外植体为叶片,在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基上可以较好地诱导出滴水珠的愈伤组织,滴水珠愈伤分化及丛生芽增殖的最适培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.25 mg/L,生根诱导最适培养基为1/2MS+NAA 0.25 mg/L。在培养基中添加100g/L的香蕉汁具有促进滴水珠丛芽增殖及生根的作用。滴水珠愈伤组织中的总生物碱含量为0.784 8%。结论:初步建立了完整的滴水珠的组织培养体系,并成功移栽。     

毛酸浆下胚轴组织培养研究

以毛酸浆下胚轴为外植体,研究不同激素配比对其愈伤组织诱导、分化及不定芽生根的影响.结果表明,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA 3mg/L+NAA 0.2mg/L,愈伤组织分化最佳培养基为MS+6-BA 2mg/+IAA 0.2mg/L,不定芽生根最佳培养基为MS+NAA 0.1mg/L或MS+IBA 0.1mg/L.研究结果为毛酸浆的规模化生产、种质资源的保存和遗传转化提供了理论依据.     

黄秋葵愈伤组织培养及再生体系建立的研究

以具有杂种黄蜀葵嫩茎为材料,采用组织培养的方法,进行了嫩茎的愈伤组织诱导、分化,不定芽的生根以及试管苗的生根继代增殖培养、移栽与定植的研究.结果表明:嫩茎愈伤组织诱导培养和继代增殖培养的理想培养基是MS+6-BA0.75mg/L+2,4-D2.1 mg/L;愈伤组织分化培养的理想培养基是MS+AgNO31.0 mg/L+NAA0.1mg/L+ZT1.6mg/L;1/3MS+蔗糖10g/L+IAA0.4mg/L是不定芽生根培养的理想培养基;试管苗生根继代增殖培养的理想培养基是1/3MS+ABT0.6mg/L+蔗糖10g/L+IAA0.4mg/L.试管苗移栽成活率为93.9%,定植成活率为97.5%.定植的试管苗保持了杂种黄秋葵所有植物学性状和杂种优势.     

黄蜀葵茎段植株再生体系的建立和花各部愈伤组织总黄酮含量的测定比较

以黄蜀葵种子获得无菌苗的茎段为外植体,研究了不同浓度激素配比对愈伤组织诱导及分化再生植株的影响.结果表明:以75%酒精30s+0.1%升汞10min灭菌黄蜀葵种子,可获得较高发芽率的无菌苗;愈伤组织最适诱导培养基为改良MS+KT0.8 mg/L+IAA0.6mg/L,经愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.05 mg/L;最佳生根培养基为:1/2 MS+NAA0.1 mg/L;且移栽后成活率可达95%.用紫外分光光度法测定花和各部愈伤组织总黄酮的含量,对比发现:花中总黄酮的含量高于各部愈伤组织,愈伤组织中子房愈伤组织的总黄酮含量高于其他部位.