柔嫩艾美尔球虫厦门株(Eimeria tenella)生物学研究

采用单卵囊分离方法从厦门地区饲养的鸡盲肠中获得艾美尔球虫,经显微观察、测量和感染实验,从寄生部位、卵囊形态、孢子化时间和潜伏期等指标测定,实验结果:采用琼脂板方法分离和挑选单卵囊方法进行感染效果理想,单卵囊感染小鸡成功率为60%.该球虫寄生在鸡盲肠部位,其余部位未发现,卵囊形态长卵圆形,长25.80(23.5～28.5),宽20.86(18.5～23.5),长/宽:1.23(1.21～1.27),27℃条件下孢子化时间为20 h.,潜伏期为146 h.与国内一些株进行比较存在差别,确定该艾美尔球虫为柔嫩艾美尔球虫(Eimeriatenella),并定名为柔嫩艾美尔球虫厦门株.     

柔嫩艾美尔球虫厦门株生物学（Eimeria tenella）研究

采用单卵囊分离方法从厦门地区饲养的鸡盲肠中获得艾美尔球虫．经显微观察、测量和感染实验．从寄生部位、卵囊形态、孢子化时间和潜伏期等指标测定．实验结果：采用琼脂板方法分离和挑选单卵囊方法进行感染效果理想。单卵囊感染小鸡成功率为60％．该球虫寄生在鸡盲肠部位．其余部位未发现．卵囊形态长卵圆形．长25．80(23．5～28．5)．宽20．86(18．5～23．5)．长／宽：1．23(1．21～1．27)．27℃条件下孢子化时间为20h．．潜伏期为146h．与国内一些株进行比较存在差别．确定该艾美尔球虫为柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella)，并定名为柔嫩艾美尔球虫厦门株．     

柔嫩艾美耳球虫感染对雏鸡肾脏病理损伤的探讨

14日龄海兰褐雏鸡80只,分为对照组和感染组。感染组每只鸡口服接种8.0×104个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,分别于接种后第0,3,6,9,12天,每组随机取鸡5只,心脏采血,测定血清尿酸和肌酐含量,同时取感染后第6天鸡的肾脏,观察其病理组织学变化。结果表明:感染组鸡的血清尿酸含量于感染后第3,6,9天显著升高了267.41%(p<0.01),81.41%(p<0.01)和52.09%(p<0.05),肌酐含量在感染后第3,6天也显著增加了63.61%(p<0.05)和81.80%(p<0.05);肾脏的实质细胞呈轻度的颗粒变性或水泡变性。提示:球虫感染导致雏鸡肾脏病理损伤。     

柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)"早熟株"对雏鸡免疫保护力的影响

实验采用人工培育的不同剂量柔嫩艾美耳球虫( E.tenella) “早熟株”接种雏鸡,测定出雏鸡血钠、血钾、血钙、血糖、血红蛋白的变化。结果表明,不同剂量的“早熟株”对所测定的雏鸡生理生化指标均有影响,其中2-0 ×104/ 只指标基本与对照组相同,对雏鸡有较好的保护作用,该剂量可作为未来弱毒苗的参考剂量。     

雏鸡感染柔嫩艾美耳球虫后血清IgG含量的动态变化

为研究柔嫩艾美耳球虫感染雏鸡后,雏鸡血清IgG含量的变化,用8×10^5个柔嫩艾美耳球虫卵囊感染10日龄雏鸡,用饱和硫酸铵盐析法分别提取感染前和感染后第1,2,3,4,5,6,7,8,12,15天鸡血清中的IgG,Sephadex G-25凝胶过滤层析,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）,对纯化的IgG做纯度鉴定,结果表明,盐析产品纯度较高。通过紫外吸收法测定其含量,感染前IgG含量是（1.07±0.05）g/L,对照组感染后第4天（14日龄）达到峰值（1.90±0.07）g/L,感染组在感染后第6天（16日龄）达到最高值（2.31±0.07）g/L,感染后第12天（22日龄）对照组和感染组降到最低值,分别是（1.35±0.17）g/L和（1.32±0.05）g/L,感染后第5天（15日龄）差异显著（P〈0.05）,第6,7天（16,17日龄）两组差异极显著（P〈0.01）,其它天差异不显著（P〉0.05）。     

so7在大肠杆菌中的表达及表达蛋白和活菌对Eimeria tenella的免疫保护

so7为来源于E.tenella的折光体基因，将T－vector-so7克隆质粒酶切，构建表达载体pThioHis-so7，通过酶切和SDS－page检验，筛选阳性克隆。用表达蛋白或活菌免疫鸡，3周后用柔嫩艾美耳球虫攻毒。结果显示，鸡的相对增重率为71.45%-80.50%，相对卵囊产量为59.27%-92.00%。以口服活菌200μg菌体蛋白组最佳，鸡的相对增重率为80.50%，盲肠相对卵囊数为58.85%。说明so7表达产物能诱导鸡对E.tenella的保护作用。因此，该基因编码抗原可作为基因工程苗的候选之一。     

三种药物对鸡人工感染柔嫩艾美耳球虫病的疗效比较

采用瘟毒杀星散、球痢清、地克珠利三种不同的抗球虫药物进行抗人工感染柔嫩艾美耳球虫的效力试验,结果表明:三种不同药物的高剂量组即300mg/kg饲料混饲,其抗球虫指数(ACI)均在185以上,差异不显著(P>0.05).但中剂量组即250mg/kg饲料混饲,球痢清和地克珠利组的死亡率分别比瘟毒杀星散组高4.1 5%和3.55%,差异显著(P<0.05),卵囊值差异亦显著(P<0.05),但抗球虫指数(ACI)、病变值差异不显著(P>0.05).瘟毒杀星散低剂量组与球痢清和地克珠利低剂量组相比,其相对增重率、抗球虫指数(ACI)和病变值差异不显著,(P>0.05),但卵囊值差异极显著(P<0.01).     

雏鸡感染堆型艾美耳球虫早熟株外周血T淋巴细胞的动态变化

8日龄雏鸡(免疫组)每只接种3×103个堆型艾美尔球虫(Eimeria.acervulina)早熟株孢子化卵囊,在第16日龄免疫组和不免疫攻毒组每只攻毒堆型艾美尔球虫强毒株孢子代卵囊5×104个,用а 醋酸萘酯染色法计数T淋巴细胞数量,得T淋巴细胞所占淋巴细胞的百分率。t检验结果表明,免疫攻毒组T淋巴细胞的百分率与不免疫攻毒组和空白对照组的T淋巴细胞的百分率差异极显著,显示该早熟株具有较好的免疫保护效果。     

柔嫩艾美耳球虫早熟株的选育及其免疫原性研究

运用Jeffers(1975)法进行了柔嫩艾美耳球虫早熟株的选育，经过连续13代的选育，获得了柔嫩艾美耳球虫早熟株，该虫株的潜隐期为121h，比柔嫩艾美耳球虫亲本毒株的潜隐期提前了22h以上，免疫攻毒试验的结果表明柔嫩艾美耳球虫早熟株和其亲本毒株一样也具有免疫原性。