几种脊椎动物某些组织中谷丙、谷草转氨酶活性比较及其对温度的依赖关

在生物体内的新陈代谢作用中,转氨基反应是一种重要的生化反应,催化转氨基作用的是各种特异的转氨酶,它直按参与氨基酸代谢、蛋白质代谢,同时又与糖代谢、脂代谢密切相关。在所有的转氨基作用中,以L-天门冬氨酸与α—酮戊二酸之间、L-谷氨酸与丙酮酸之间的二种转氨体系较为常见,催化这两个反应的酶是谷-丙转氨酶(GPT)、谷一草转氨酶(GOP)。其反应式如下:     

曲霉型糖化酶等电点的理论计算

该文介绍了一种根据蛋白质的氨基酸组成,应用计算机数据处理技术从理论上计算蛋白质、酶及多肽的等电点的新方法。和传统的生物化学研究方法相比,该法不仅简单、方便,而且结果可信度较高,除对已知其pI的蛋白质或酶的实测值印证外,还可预测蛋白质或酶的等电点。这在蛋白质化学、酶学等研究领域具有一定应用价值。文中计算了8种曲霉型糖化酶的pI,计算结果和文献报道基本吻合。     

同源蛋白质等电点的预测

应用一个依据蛋白质氨基酸组成可预测其等电点(pI)的数学模型,辅以自行设计的计算程序,计算了弹性蛋白酶(Elastase)、牛胰乳蛋白酶原(Bovine chymotrypsinogen)和α-胰凝乳蛋白酶(α-Chymotrypsin)的pI,计算值同实测值基本吻合。应用该模型还给出了4种精氨酸酶(Arginase)同功酶的pI理论预测值。     

天冬氨酸转氨酶及其酶学性质

从大肠杆菌中提取了天冬氨酸转氨酶,并对其酶学性质进行了系统的研究,得出该酶的最适反应温度为37 ℃、最佳反应pH范围为8.0～8.5、最佳氨基供体为L-天冬氨酸、转化反应动力学常数Km,同时对影响该酶作用的其它因素(辅酶、金属离子)作了研究.利用几种α-酮酸,考察了该酶在转化制备相应的芳香族L-氨基酸过程中的作用.为该酶的工业化应用提供了理论上的依据.     

蛋白质等电点的理论计算

蛋白质的等电点 pI 是蛋白质的重要理化性质之一。了解蛋白质的 pI,对蛋白质的分离纯化,鉴定小分子肽或酶的活性位点,预测不同蛋白质之间或蛋白质与其他大分子之间的离子相互作用,判断 pI 值对测定温度的依赖关系,设计由已知顺序的 DNA 合成的肽的纯化程序等都是很有意义的。蛋白质的 pI 值通常采用等电点聚焦或层析聚焦等实验方法测定。由于实验方法的灵     

Q:体内转氨酶偏高是怎么回事,为什么转氨酶高就不能献血?

正(读者:韩康杰)A:转氨酶又称氨基转移酶,是催化转氨基反应的一类酶。它能够催化某一氨基酸的α-氨基转移到另一α-酮酸的酮基上,从而生成相应的新氨基酸,而原来的氨基酸则转变成α-酮酸。在人体中,转氨酶主要参与氨基酸的分解和合成,是代谢过程中必不可少的重要酶类。转氨酶在人体的肝脏细胞中含量很高,在临床上,转氨酶的含量常常被当作指示肝脏健康情况的重要参考指标。临床上,通过抽血化验检测肝功能的转氨酶主要有两种,     

双水相体系纯化天冬氨酸酶、纤维素酶和脂肪酶

用聚乙二醇(PEG)/磷酸钾双水相抽提技术分别从天冬氨酸粗酶、商品纤维素酶和脂肪酶中分离纯化出天冬氨酸酶(Aspartase)、纤维素酶(Cellulase)和脂肪酶(Lipase)。研究了PEG分子量及浓度、磷酸钾浓度、蛋白质含量、pH、氯化钠浓度等因素对分配系数,酶活回收率和分离效果等参数的影响,并设计出双水相体系抽提三种酶的相组成系统。     

儿茶酚氧化酶的催化机理及活性基团的研究

对儿茶酚氧化酶催化儿茶酚氧化的反应进行了动力学处理及量子化学计算,提出了该酶可能的催化机理,认为氧分子进攻儿茶酚是反应的控制步骤。由动力学常数估计酶上的催化活性基团为天冬氨酸的羧基及赖氨酸的ε—氨基。     

蛋白质“酶解度”概念的探究

分析了蛋白质水解度参数在监测蛋白质酶解过程中的不足,并根据蛋白质酶解过程特点提出了酶解度的概念与测定方法。将酶解度定义为一个比值,用于描述蛋白质酶解体系中新增肽链数相对于原有肽链数的变化,可以有效反映酶对蛋白质的酶切过程。根据酶解度的定义,只要分别测定出酶解前的体系中肽链数目与酶解后体系中的肽链增量,通过计算两者的比值就可以计算出该条件下的酶解度。体系中的肽链数目可以通过甲醛滴定法测定出体系中的游离氨基数与新增自由氨基数来计算。     

褐藻胶裂解酶基因的克隆、表达载体构建以及表达条件的研究

以产褐藻胶裂解酶的紫色链霉菌(Streptomyces violaceoruber)为出发菌株,应用基因工程技术,将褐藻胶裂解酶aly基因进行克隆,并构建了该基因的重组表达载体pET23b(+)-aly.通过表达条件的初步优化,实现了aly基因在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中的成功表达.在IPTG诱导浓度为0.1mmol/L,诱导时间为8h,诱导温度为16℃的条件下,细胞破壁后上清中ALY粗酶液活力为6U/mg.根据褐藻胶裂解酶ALY的蛋白质结构预测结果推断该酶属于Algi-nate lyase-2家族,理论pI为8.85,理论分子量大小为28 500,化学式为C1252N1920H356O394S9.SDS-PAGE蛋白电泳检测发现,ALY蛋白的分子量约为28 000,与预测的蛋白分子量较为接近.     

几种螯合剂对镉致小鼠肝脏毒性解毒作用比较

为开发高效低毒的新型镉解毒剂,研究了镉染毒组小鼠和N-对羟甲苯甲基-D-葡糖二硫代氨基甲酸钠(HBGD)、N-苯甲基D 葡糖二硫代氨基甲酸钠(BGD)、二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)、二巯基丙醇(BAL)、乙二胺四乙酸(EDTA)等5种螯合剂治疗组小鼠血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)及乳酸脱氢酶(LDH)活性和小鼠肝脏的脂质过氧化物(LPO)值的变化.结果显示,染Cd(2. 5mg/kg,腹腔注射)后小鼠血清LDH、AST及ALT活性和肝脏LPO值显著高于对照组.分别染镉30min和24h后注射各螯合剂(400μmol/kg,腹腔注射),治疗24h后HBGD和BGD对镉引起的肝脏LPO值及血清LDH、AST、ALT活性的升高有显著的抑制作用(P<0. 05).表明HBGD和BGD对镉致小鼠肝脏毒性有较好的解毒作用,且自身毒性小,有望成为理想的镉解毒剂.     

南丰蜜橘β-萝卜素羟化酶的生物信息学分析

利用多种在线软件对本实验室克隆测序的南丰蜜橘(Citrus reticulata Blanco var.kinokuni(Tanaka)H.H.Hu)β-胡萝卜素羟化酶(chy,蛋白序列号CAL63739)的理化性质、亲水性、跨膜区及空间结构进行了预测.理化性质分析显示其含311个氨基酸分子量为34 785.4,pI值为9.03.该酶定位于类囊体膜上,TMpred跨膜分析显示它含有4个显著的跨膜螺旋区,这些区域与ProtScale预测的疏水区基本重叠.该酶二级结构以α-螺旋为主,且含多种磷酸化位点.结构域分析显示该酶含β-羟化酶家族的特征结构域PD095142(99～156aa)和PD011050(157～280aa).借助HHpred三级结构预测结果,分析了该酶的结构特征及可能的膜定位方式.本文为进一步研究该酶结构和功能的关系打下了基础.     

丹参水提取物对去卵巢大鼠血脂和肝脏的影响

为研究丹参的雌激素样作用,将32只6月龄SD大鼠随机分成假手术组(Sham)、去卵巢手术组(OVX)、阳性对照17β-雌二醇治疗组(E2,1mg.kg-1.d-1,灌胃)和丹参治疗组(SM,600 mg.kg-1.d-1,灌胃),治疗12周后,检测大鼠体重的增加情况、子宫指数、血脂水平、血清转氨酶活性及抗氧化情况,并进行肝脏的组织学检测.结果显示,丹参水提取物治疗12周能明显抑制去卵巢诱导的大鼠体重的增加,刺激萎缩的子宫生长,改善血脂水平,降低丙氨酸氨基转氨酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)的活性,减轻肝脏的脂肪变性.丹参水提取物的这些保护作用,可能与其能降低氧化剂丙二醛(MDA)水平,增加超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活性有关.     

基于主成分分析协同随机森林算法的热连轧带钢宽度预测

为提高热连轧粗轧带钢生产过程中换钢种、换规格及换辊后的首块带钢宽度设定模型精度,本文提出一种基于主成分分析协同随机森林(PCA-RF)算法的宽度预测模型.采用主成分分析法对数据样本合理分析,通过计算特征值、主成分贡献度及累计贡献度进行特征选择.在PCA筛选的变量数据集上训练最佳随机森林宽度预测模型.同时,使用支持向量机回归(SVR)、K-最近邻(KNN)模型进行对比验证.通过实际应用表明,PCA-RF各道次宽度模型R-squared值控制在99.9%~1,且96%以上样本点预测误差在-5~5mm,从而证明该模型实现了换钢种、换规格及换辊后的首块钢宽度的高精度预测.     

2种蛋白酶对鲢鱼蛋白质的酶解作用

为了利用蛋白酶水解低值鱼或鱼加工下脚料生产水解鱼蛋白质,以鲢鱼蛋白质为原料对比研究了原料前处理、底物浓度、酶解时间、产物抑制浓度等对碱性蛋白酶和复合蛋白酶水解鱼蛋白质的影响,并研究了用2种蛋白酶分阶段水解鱼蛋白质的工艺.结果表明,碱性蛋白酶水解鲢鱼蛋白质在pH 8.0时的适宜条件为:温度45 ℃,酶解时间20 min,蛋白质质量分数低于6%,产物氨基态氮质量浓度低于2.55 g/L;复合蛋白酶在pH 6.5时的最适水解条件为:温度50 ℃,酶解时间20 min,蛋白质质量分数小于6%,产物氨基态氮质量浓度小于2.25 g/L;用2种蛋白酶分段水解鲢鱼蛋白质可大大提高水解产物的氨基态氮含量,增加水解产物的得率.     

阱基单胺氧化酶抑制剂抑制活性的定量构效关系

为了研究阱基单胺氧化酶抑制剂(Hydrazinyl monoamine oxygenase inhibitor,HMAOI)的抑制活性(pI50)的定量构效关系(Quantitative structure-activity relationship,QSAR),按照分子的拓扑环境编程计算了22种HMAOI的电性距离矢量(mk).利用最佳变量子集回归,建立了它们的3参数(m6、m9、m33)QSAR模型,非交叉验证与交叉验证的相关系数R2和Q2分别为0.957、0.914,具有良好的稳健性和预测能力.该模型显示,影响HMAOI抑制活性的主要因素是—CH3,—CH＜,—NH—,—O—及羰基等分子结构单元.以此三个参数为人工神经网络输入层,设定3∶4∶1的网络结构,构建人工神经网络的BP算法模型,传统相关系数R为0.997,标准偏差S为0.035.结果表明,HMAOI的pI50与m6、m9、m33呈良好的非线性关系,用其表征pI50具有合理性和有效性,为设计高抑制活性的HMAOI提供理论依据.     

补肾健脾法治疗肝肾综合征临床研究

目的探讨应用补肾健脾方治疗肝肾综合征的临床疗效.方法将84例肝硬化合并肝肾综合征患者随机分成两组,治疗组42例采用补肾健脾法进行治疗,对照组42例为西医综合治疗,观察两组肝肾功能情况,即总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、24 h尿量、尿素氮(BUN)和血肌酐(Cre)的变化.结果治疗组治疗后总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)均得到显著改善(P0. 05);对照组均无显著改善(P0. 05).治疗组与对照组比较,TBIL,ALT,AST及ALP均得到显著改善(P0. 05),但两组GGT差异不显著(P0. 05).治疗组患者治疗前后24 h尿量、BUN和Cre均得到显著改善(P0. 05),对照组治疗前后24 h尿量、BUN和Cre均无显著差异(P0. 05);治疗组与对照组比较24 h对照组尿量、BUN和Cre均得到显著改善(P0. 05).结论补肾健脾法对肝肾综合征的治疗具有较好疗效.     

平均配位数法求取蛋白质等电点

将蛋白质视为可连续电离出氢离子的多元弱酸,利用配合物体系配离子分布系数取最大值的条件-n=c,即蛋白质体系的平均配位数-n等于蛋白质中性离子中含有氢离子数目c时对应的pH值即为蛋白质等电点pI值,通过绘制蛋白质平均配位数-n对pH图或使用常用办公软件均可方便地找出pI值.考虑到蛋白质一般含有较多种类的由可电离游离基团电离形成的蛋白质离子,文章提出了忽略浓度较小蛋白质离子并简化-n计算的方法.     

热处理后蛋白质及MTGase对猪肉糜凝胶特性的影响

通过检测猪肉糜的流变特性、质构及颜色变化,研究了水浴、加压蒸煮和微波辐射3种热处理方式下,蛋白质及转谷氨酰胺酶(MTGase)添加量对猪肉糜凝胶特性的影响.结果表明:3种热处理方法下,一定量的转谷氨酰胺酶及肌肉蛋白使猪肉糜表现出不同的颜色和质构特性;与其他两种方法相比,水浴加热使猪肉糜更具有弹性;加入MTGase后,样品的储能模量G′增大,表明MTGase的加入影响了猪肉糜的流变特性、颜色以及质构,其效力取决于猪肉糜的热处理方法.     

大白鼠肝中氨基酸活化酶活性与饲料的关系

Miller,Williams,Mcquarrie等曾研究过动物的饲料除去蛋白质后,或除去某几种主要的氨基酸后,对酶活性的影响。许多种酶的活性随着饲料中蛋白质的缺乏而降低,也有的酶仍维持着一定水平的活性。对于主要氨基酸的缺少,个别的酶所受的影响也各不相同,如肝内的精氨酸酶(arginase),乌头酸酶(aconitase),和肾内的D-氨基