固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质

用固定化单宁通过吸附法制备固定化木瓜蛋白酶,研究了固定化的条件和固定化酶的性质、在200毫克固定化单宁加入200单位木瓜蛋白酶、5℃,pH8.5的条件下进行固定化,固定化木瓜蛋白酶活力可达260单位/克固定化酶(湿重)。固定化酶和自然酶的最适pH及最适温度相同,分别为pH6及75℃;但固定化酶的温度及贮存稳定性明显优于自然酶。在室温下用其连续澄清啤酒,使用半衰期为8天。     

壳聚糖固定化木瓜蛋白酶的制备及性质

以壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂制备固定化木瓜蛋白酶，研究了固定化时间、温度、pH值、给酶量和戊二醛浓度对固定化木瓜蛋白酶活力的影响，结果表明：木瓜蛋白酶最佳经条件是给酶量为每克载体10mg，戊二醛浓度0.5%，pH7.5，室温下（25℃）反应10h。所制备的固定化木瓜蛋白酶的最适pH8.0，最适温度70℃，与溶液酶相比，固定化酶的热稳定性显著提高。     

固定化木瓜蛋白酶的制备及性质

用硫酸铵分级沉淀法从木瓜粉提取液中分离木瓜蛋白酶，将其偶联在对氨基苯磺酰乙其次 联琼脂上，制得固定化木瓜慢白酶。实验结果表明；木瓜蛋白酶与ＡＢＳＥ－交联琼脂的最佳结合量是每克干交联琼脂１４．０μｍｏｌ／ｓ，固定化酶的最适反应ｐＨ为８．０，最适反应温度为７５℃，Ｋｍ为６７．６ｍｍｏｌ／Ｌ。     

水滑石固定化木瓜蛋白酶制备的研究

文中研究了阴离子型层状材料—水滑石(LDHs)作为载体,经过戊二醛活化处理后采用共价结合的方法固定化木瓜蛋白酶。讨论了层板电荷密度对固定化酶活的影响,并优化固定化时间、温度、pH值、给酶量和戊二醛质量分数等固定化条件,实验结果显示：木瓜蛋白酶的最佳固定化条件是给酶量为每0.5 g载体固定16 mL 10 g/L的溶液酶,固定化温度15 ℃,pH7.0,固定化时间12～24 h,与2 mL质量分数为0.5%的戊二醛交联,所得固定化木瓜蛋白酶酶活回收率平均可达55%左右。     

壳聚糖固定化木瓜蛋白酶的制备及性质

以壳聚糖为载体 ,戊二醛为交联剂制备固定化木瓜蛋白酶 .研究了固定化时间、温度、pH值、给酶量和戊二醛浓度对固定化木瓜蛋白酶活力的影响 ,结果表明 :木瓜蛋白酶最佳固定化条件是给酶量为每克载体 10mg ,戊二醛浓度0 .5 % ,pH7.5 ,室温下 (2 5℃ )反应 10h .所制备的固定化木瓜蛋白酶的最适pH8.0 ,最适温度 70℃ ,与溶液酶相比 ,固定化酶的热稳定性显著提高     

蛋白双酶（胰蛋白酶—木瓜蛋白酶）的固定化研究

以脱乙酰壳多糖为载体、戊二醛为交联剂，对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的固定化条件及固定化双酶的动力学性质进行了研究。实验对比了交联剂的用量、交联的ＰＨ值、温度及载体与酶的比例等因素对固定化的影响。     

介孔分子筛MCM-41固定化木瓜蛋白酶的研究

文中以介孔分子筛MCM-41作为载体,戊二醛作为交联剂,对木瓜蛋白酶进行了固定化。研究了固定化条件对酶活性及酶活性回收率的影响,并对固定化酶的连续操作稳定性做了初步探讨。结果表明：当1g载体的给酶量为20mg,固定化温度10～20℃,固定化时间2h,pH值7.0,戊二醛体积分数0.75%时,木瓜蛋白酶的固定化效果最好,此时酶活性平均回收率达55%左右。固定化酶具有良好的连续操作稳定性,半衰期可达26d。     

环氧化硅胶固定木瓜蛋白酶及其动力学性质

以硅胶为载体,γ-环氧丙基氧丙基三甲氧基硅烷为偶联剂,对木瓜蛋白酶进行了固定化.最适固定化条件如下:温度为25℃,pH为8.0,时间为18 h,酶量为每100mg环氧化硅胶固定24 mg酶.同时以酪蛋白为底物,研究了固定化条件对酶活力回收的影响,并比较了固定化酶和溶液酶的动力学性质,结果表明:固定化酶的最适pH和最适温度都比溶液酶有所提高,且有较好的操作稳定性.     

木瓜蛋白酶的原位固定化及理化性质研究

以氨基载体原位固定化PEG相中的木瓜蛋白酶,获得了高固定化率(95.9%)和酶活回收率(38.9%)的固定化木瓜蛋白酶,解决了双水相分离纯化后成相聚合物和目的蛋白难以分离的问题。固定化木瓜蛋白酶的最适pH在7.0左右,最适温度处于60～70 ℃之间。相比游离木瓜蛋白酶,在广泛的pH区间内(3.0～9.0)固定化酶稳定性都较好,热稳定性也有改善。在4 ℃密闭容器内将固定化木瓜蛋白酶以湿润状态保存可以较好地保留其活性。LH-HA固定化木瓜蛋白酶可以特异性地水解单克隆抗体IgG,制备Fab和Fc片段。     

以卵清蛋白为载体的固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质

以变性的卵清蛋白为载体, 用戊二醛为交联剂固定木瓜蛋白酶. 通过正交实验考察了固定化pH值、 交联剂戊二醛浓度、 交联时间和酶用量对固定化木瓜蛋白酶活力的影响,确定了最适固定化条件： 5%戊二醛, pH 6.0, 交联时间20 h, 每克载体含酶量12 mg. 对比研究了游离木瓜蛋白酶和固定化木瓜蛋白酶的性质, 所得到的固定化木瓜蛋白酶最适温度90 ℃, 最适pH 9.0, 米氏常数53.6　mg/mＬ, 其热稳定性及耐热性均较游离酶显著提高.     

甲壳胺低聚糖的酶解制法及其应用进展

甲壳质（Ｃｈｉｔｉｎ）是存在于自然界中的唯一一种带阳离子的能生物降解的高分子物质，也是含氮的多糖类物质，自然界中分布很广，为无脊椎动物甲壳构造的主要物质，存在于甲壳纲动物、昆虫及植物细胞壁中，如虾、蟹外壳，乌贼骨及昆虫外壳、肢体和翅膀；以及真菌微生物细胞壁中，是仅次于纤维素的第二大自然资源。据估计，全世界仅在水产品加工过程中废弃的甲壳质每年有１５万ｔ以上。我国是甲壳质产品的主产大国，目前年主产量约３０００ｔ，年约占全世界产量的三分之一。 甲壳质被用于水处理中的絮凝剂、食品添加剂、药物缓释剂等。由…     

蛋白双酶（胰蛋白酶─木瓜蛋白酶）的固定化研究

以脱乙酰壳多糖为载体，戊二醛为交联剂，对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的固定化条件及固定化双酶的动力学性质进行研究．实验对比了交联剂的用量、交联的ｐＨ值、温度及载体与酶的比例等因素对固定化的影响．确定了固定化双酶的催化特性：最适ｐＨ７．５～８．１，最适温度是６０℃，Ｋｍ值是０．５２ｍｇ／ｍｌ，并对固定化双酶的热稳定性、固定化双酶的活性与固定化单酶的活性进行了比较．     

纤维素酶在甲壳胺上的固定化

本文报道从虾壳中制取甲壳胺，并以甲壳胺为载体，戊二醛为交联剂，将纤维素酶「ＥＣ．３．２．１．４」固定化的研究结果，探讨了一定量湿甲胺载体与交联剂浓度、给酶量的最适固定化条件，同时对固定化酶及游离酶的米氏常数、最适ＰＨ、离子强度对酶活力的影响以及最适反应温度和稳定性等理化性质进行了探讨和比较。     

木瓜蛋白酶对壳聚糖的降解特性

研究木瓜蛋白酶催化壳聚糖降解过程中，温度、pH值、酶量、底物质量浓度以及脱乙酰度等条件对降解速率的影响，并通过计算机随机模拟试验，求出壳聚糖的脱乙酰度与GlcNAc-G1cN糖苷键相对含量的关系．结果表明，木瓜蛋白酶只选择性地降解GlcNAc-G1cN糖苷键，反应最适pH值和温度分别为4．5和45℃．     

纳米材料MCM-41的制备及其固定化酶的研究

在使用扩孔剂间三甲苯的条件下,对新型大孔纳米材料MCM-41进行了制备,并对该材料作为载体固定化木瓜蛋白酶进行了研究。X射线衍射和氮气吸附表征结果表明：材料内部孔的排列高度有序且孔径集中分布在6.3nm附近。用该材料作为载体固定化木瓜蛋白酶的结果表明：在给酶量、戊二醛质量分数、时间、温度和pH值分别为20mg/g,0.75%,2h,10～20℃和7.0的条件下,固定化酶的回收率为55%左右,效果最佳。     

冷冻-真空吸附法在介孔材料中固定木瓜蛋白酶

首次采用冷冻-真空吸附法在介孔材料SBA-15中固定了木瓜蛋白酶. 与普通的浸渍方法相比, 此法不仅可以制备高组装量的固定化酶, 每克载体固定量可达450 mg, 同时酶的活性仍然保持, 并得到较好的固定化酶性质(如高稳定性), 在90 ℃保温30 min仍保留70%的活力.     

两步法活化微晶纤维素及在固定木瓜蛋白酶中的应用

微晶纤维素经过两步活化,可在温和条件下实现木瓜蛋白酶固定化,用对甲基苯碘酰氯活化微晶纤维素后,与乙二胺反向载体引入有机胺基因,再用戊二醒处理所得的二次活化载体可在温和条件固定木瓜蛋白酶,所得固定化酶活力为103U／g载体,与溶液酶比较,热稳定性有明显提高。     

固定化菊粉酶连续降解菊芋果聚糖的研究

克鲁维酵母（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ｙ－８５产生并经部分纯化的胞内菊粉酶（ｅｎｄｏｃｅｌｕｌａｒｉｎｕｌｉｎａｓｅ）,采用共价键交联吸附法固定化．以菊芋果聚糖为底物测定,所制得固定化酶在ｐＨ５．０和温度５５℃下反应显示最大活性,对热的稳定性和贮存稳定性比游离酶明显提高,并显示出外切菊粉酶（ｅｘｏｉｎｕｌｉｎａｓｅ）性质．在装有１７．６ｍＬ固定化酶填充床反应器（ｐａｃｋｅｄ－ｂｅｄｒｅａｃｔｏｒ）中,以１．７ｈ－１的空间速度进料,５０℃下连续操作４ｄ,４．５％菊芋果聚糖液可被１００％降解,反应器定容产率为７７．０ｇ·Ｌ－１·ｈ－１,半衰期２７ｄ,降解产物（总糖）含８５％果糖     

细胞固定化及其在工业中的应用

简要地介绍和评述了细胞工程中细胞的固定化及其生物反应器的制备技术、特性和它们在工业中的应用概况及发展的趋势。