三种原生动物蛋白质和同工酶电泳研究

由于蛋白质(酶)是基因的直接产物,因此,对蛋白质(酶)的分析可以反映出生物体的遗传本质。近年来,国外已应用凝胶电泳技术对原生生物的蛋白质与同工酶进行了广泛的研究。但是,有关原生动物的总蛋白质电泳分析尚未见有报导,另外,有关同工酶的研究也往往仅限于少数几种酶。本文以三种原生动物为材料,建立蛋白质凝胶浓度梯度电泳技术和多种同工酶电泳检测系统,为进一步研究这些单细胞真核生物打下一个基础。     

不同生长期瞬目虫(Glaucoma scintillans)的同工酶的比较研究

以无菌培养的原生动物纤毛虫瞬目虫(Glaucoma scintillans)为材料,比较它们对数生长期和衰老期的酯酶同工酶,酸性磷酸酶同工酶,苹果酸脱氢酶同工酶及乳酸脱氢酶同工酶的差异.结果表明在不同生活状态下,四种酶同工酶蛋白带有明显差异;对数生长期细胞的同工酶活力和数量明显高于衰老期细胞的同工酶的活力和数量.说明同工酶不但是生物体代谢的调节者,亦能作为生物衰老的一种指标.     

不同生长期瞬目虫(Glaucoma scintillans)的同工酶的比较研究

以无菌培养的原生动物纤毛虫瞬目虫(Glaucoma scintillans)为材料,比较它们对数生长期和衰老期的酯酶同工酶,酸性磷酸酶同工酶,苹果酸脱氢酶同工酶及乳酸脱氢酶同工酶的差异。结果表明在不同生活状态下,四种酶同工酶蛋白带有明显差异;对数生长期细胞的同工酶活力和数量明显高于衰老期细胞的同工酶的活力和数量。说明同工酶不但是生物体代谢的调节者,亦能作为生物衰老的一种指标。     

铁胁迫对大豆POD和EST同工酶的影响

采用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳,研究了2个品种的大豆--浙春3号和1601在不同时期、不同浓度铁胁迫下过氧化物酶(POD)同工酶和酯酶(EST)同工酶的变化情况.结果表明,浙春3号的2种同工酶酶谱的变化基本一致,随铁浓度的增加酶带数和强度都有所增加;而1601的2种同工酶,在高浓度铁处理时,酶带数和强度都减少.2个大豆品种不同时期的POD和EST同工酶酶谱对铁胁迫的反应也有差异.不同品种大豆的同工酶酶谱的变化,与其对铁胁迫的抗性有关.     

松江鲈鱼(Trachidermus fasciatus)不同组织同工酶的研揪

采用垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳, 对松江鲈鱼(Trachidermus fasciatus)的7种组织进行了6种同工酶的电泳研究, 并对各种酶的同工酶位点及酶谱表型进行了分析.结果表明,松江鲈鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性;与四大家鱼相比,松江鲈鱼同工酶谱表现为总体特征简单化,这可能和松江鲈鱼濒危的现状有关;设想鳍可作为松江鲈鱼非损伤性同工酶检测的材料.     

大豆过氧化物酶和酯酶同工酶对锰胁迫的反应

采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,研究了2个大豆品种(华春18和浙春3号)在不同时期、不同锰浓度(0,0.01,0.10,1.00,10.00,20.00 mg/L)处理下的过氧化物酶(POD)同工酶和酯酶(EST)同工酶的变化情况.结果表明,随着锰浓度的增加,华春18的2种同工酶的酶带数和活性变化较大,浙春3号的2种同工酶的酶活性和酶带数目比较稳定.此外,大豆在中等程度的锰胁迫下能适当产生一些补偿性的酶带,但酶活性已受到一定的抑制.2个大豆品种不同时期的POD和EST同工酶酶谱对锰胁迫的反应也有差异.不同品种大豆的同工酶酶谱的变化,与其对锰胁迫的抗性有关.     

豆状囊尾蚴与宿主（兔）的同工酶比较研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出豆状囊尾蚴囊液ＬＤＨ同工梅５条酶带，酯酶同工酶１条酶带，蛋白质９条区带；宿主－兔腹水乳酸脱氢酶同工酶５条酶带、酯酶同工酶５种酶带、蛋白质１６条区带。本研究对豆状囊尾蚴囊液同工酶、蛋白质、豆状囊尾蚴虫体同工酶与蛋白质、宿主腹水同工酶、蛋白质的相互关系作了分析。结果表明：豆状囊尾蚴的酶蛋白和蛋白质来源可能独立于宿主。在一定程度上受宿主影响；虫体的蛋白质组成更复杂、囊液内代谢可     

苜蓿盲蝽属6种昆虫不同地理种群同工酶比较研究

应用聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳技术,对内蒙古苜蓿盲蝽属(AdelphocorisReuter)的6种苜蓿盲蝽不同种群的酯酶同工酶(EST)、过氧化物同工酶(POD)、乳酸脱氢酶同工酶(LDH)进行比较研究.结果表明,6种苜蓿盲蝽属昆虫不同种群的酯酶同工酶(EST)谱带清晰、稳定,且不同种群间有差异;6种苜蓿盲蝽中,只有苜蓿盲蝽A.lineolatus的POD同工酶染出的酶带最多,且在雌雄两性间的活性差异较大,但染出的酶带数少于EST同工酶,活性也弱于EST同工酶,其余种类染出的酶带较少.POD同工酶特征的支序分析结果表明,苜蓿盲蝽A.lineolatus的4个种群分为2大支系,不同的地理分布和生态环境是导致同工酶酶谱趋异的主要原因.     

玉米种子萌发期几种酶活性及其蛋白质谱带的变化

以玉米为材料,研究了玉米在萌发过程中,胚中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)、淀粉酶(AMY)、蛋白质谱带的变化,以及SOD和POD活性的变化.结果表明:SOD同工酶相对活性随萌发时间延长而降低,72 h以后下降趋势更明显;POD和AMY同工酶的相对活性都呈现升高的趋势;EST同工酶的相对活性变化不大.蛋白质谱带颜色的深浅也有变化,除少数谱带着色随萌发时间延长逐渐加深外,大多数谱带的着色都变浅.     

大银鱼Protosalanx hyalocranius(Abbott)不同组织LDH同工酶、EST同工酶的初步研究

报道了应用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳(PAGE)研究大银鱼Protosalanxhyalocra nius(Abbott)胚胎发育不同时期及成体肝脏、骨骼肌、肾脏、眼等几种组织器官中LDH同工酶(乳酸脱氢酶同工酶)电泳图谱、EST同工酶(脂酶同工酶)电泳图谱.结果表明:大银鱼LDH有三条酶带;EST有两条酶带.分析表明LDH同工酶、EST同工酶在活力和组织分布方面均具有特异性.     

荞麦子叶期幼叶过氧化物酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对荞麦属(Fagopyrum Mill)的甜荞(F.esculentum)和苦荞(F.tataricum)共19个不同收集系子叶期幼叶的过氧化物酶同工酶进行了研究.结果发现:过氧化物酶同工酶酶带共10条,其中甜荞有5条带,而苦荞为6条.酶带及聚类分析表明:甜荞和苦荞各收集系内的过氧化物酶同工酶酶...     

黑斑蛙(Rana nigromaculata)不同组织器官和不同发育时期同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳 (PAGE) ,对黑斑蛙的五种不同组织器官和五种不同发育时期的个体进行了酯酶 (α—EST)和过氧化物酶 (PO)同工酶的差异比较研究 .结果显示 ,不同组织器官中两种同工酶均存在明显的区别 ;不同发育期的α—EST同工酶也存在质的差异 .从蝌蚪到幼蛙的发育中 ,α—EST同工酶谱逐渐增加 ,但从幼蛙发育到成体蛙 ,α—EST同工酶谱却出现了减少现象 .不同发育时期的个体Rf为 0 .2 3的α—EST酶谱皆得以表达 .     

赤点石斑鱼4种同工酶的组织分布及基因位点分析

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法对赤点石斑鱼7组织(肌肉、肝脏、肾脏、心肌、脑、脾脏、性腺)的4种同工酶(EST、LDH、MDH、ME)进行了初步研究,并对4种酶的同工酶位点及酶谱表型进行了分析.结果表明:赤点石斑鱼的4种同工酶系统具有明显的组织特异性;EST由4个基因位点编码;LDH酶带多于典型的5条酶带;MDH具有线粒体型(m-MDH)和上清液型(s-MDH)两种类型;7种组织只检测到一种类型的ME.     

松江鲈鱼（Trachidermus fasciatus）不同组织同工酶的研究

采用垂直板状聚丙烯酰胺凝胶电泳,对松江鲈鱼（Trachidermus fasciatus)的7种组织进行了6种同工酶的电泳研究,并对各种酶的同工酶位点及酶谱表型进行了分析。结果表明,松江鲈鱼的同工酶系统具有明显的组织特异性;与四大家鱼相比,松江鲈鱼同工酶表现为总体特征简单化,这可能和松江鲈鱼濒危的现状有关;设想鳍可作为松江鲈鱼非损伤性同工酶检测的材料。     

分子生物学技术在原生动物系统进化中的应用和进展

随着研究方法的进步,分子生物学技术在原生动物研究中得到了越来越广泛的应用.综述同工酶、PCR、RAPD、序列测定及核酸原位杂交在原生动物研究中的应用.     

黑冀地鳖和中华真地鳖三种同工酶的比较研究

用聚丙烯酰胺垂直平板凝胶电泳法分析比较了新疆黑冀地鳖polyphaga obscurachop和中华真地鳖Eupolyphaga sinensis Walker的酯酶(EST)、苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)三种同工酶的电泳酶谱,研究结果表明:两种地鳖各自具有不同的特征性酶谱;不同组织具有不同的特征性酶谱;酯酶(EST)同工酶的两种地鳖中的活性均较高,而乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的活性则较低.     

密点麻蜥冬眠期和繁殖期几种器官组织中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对冬眠期和繁殖期密点麻蜥(Tremies multidcelate)6种器官组织中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶酶带和酶活性进行了测定和分析研究.结果表明:不同组织的酶带明显不同,且有多画带现象;6种器官组织中LDH同工酶的相对活性表现出明显的季节差异.     

甘草属与其近缘属植物的同工酶研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对甘草属( Glycyrrhiza) 植物短荚果系的3 个种和念珠状荚果系6 个种与其近缘属4 个种的子叶和下胚轴进行了超氧化物歧化酶、细胞色素氧化酶和过氧化物同工酶的分析。结果显示:属间、种间具有酶谱差异,每个属有其特征酶谱带。根据同工酶酶谱性状:下胚轴36 个同工酶谱性状和子叶38 个同工酶谱性状,分别对13 个种进行了聚类分析,结果表明,13 个种可划分为2 类;甘草属( Glycyrrhiza) 植物的9 个种很好的聚在一组,盐豆木( H.holodendron) 也在此组,表明两属间关系较近;苦豆子( S.alopecuroides) 、骆驼刺( A.pseudalhagi) 和小花棘豆( O.glabra) 在另一组,它们关系较近。     

不同温度条件下两组辣椒的同工酶分析

以两组亲本以及它们子代的叶片作材料，分析了在高温和低温下过氧化物酶和淀粉酶的同工酶酶谱变化，比较了两组之间酶谱以及同一家族内亲本和子代之间酶谱的差别．发现正常温度下7种供试材料中至少存在5种淀粉酶同工酶，但每个供试材料都只有一条酶带．高温和低温处理对淀粉酶同工酶没有明显的影响；供试辣椒每种材料在常温条件下至少有4种过氧化物酶同工酶，而在高温或低温下有一些酶的相对活性或相对表达量会发生变化，同一种材料高温或低温对不同的过氧化物同工酶影响也各不相同．发现在一组内存在一个与高温和低温都密切相关的酶(酶2)，在另外一组存在仅与低温有关的酶(酶n)．     

内切葡聚糖酶的纯化及其基本性质

纤维素酶是自然界碳素循环中的一种关键酶,它可以将纤维素性材料,转化为可直接利用的葡萄糖,并可通过其它酶和酶系统的作用转化为乙醇及蛋白质。纤维素酶是多酶体系,包含外切葡聚糖酶、内切葡聚糖酶(Cx)及β-葡萄糖苷酶。其中内切葡聚糖酶含有若干种同工酶,能将可溶性纤维素转化为还原寡糖,是纤维素酶系中的重要组分,为了深入研究Cx酶的性质,本文对其中一种Cx酶进行了分离纯化,并对其基本性质进行了研究。 1实验部分