遗传工程基本技术研究——Ⅰ质粒DNA的提取、鉴定和转化

本文报导了质粒 DNA 的提取和鉴定方法。为了确证这种提取方法的成功,我们进行了质粒 DNA 的电镜观察以及转化试验。结果表明,所提取的质粒 DNA 分子能保持超螺旋的构形并有生物学活性。     

显微操作方法捕获精子细胞及对其DNA分型结果研究

目的:研究显微操作方法捕获精子细胞的可行性,及精子细胞的分型结果。方法:用显微操作方法捕获精子细胞,并用QIAampDNAMicro-kit提取DNA,应用Identifiler试剂盒,采用二次扩增和添加酶量、增加循环数的方法进行扩增,最后用ABI3100遗传分析仪检测分型结果。结果:用显微操作方法成功提取到了细胞数目为100、50、10、5个的精子细胞样品并得到其分型结果。     

阔叶榧总DNA的提取及其RAPD反应条件的研究

在阔叶榧新鲜针叶DNA提取过程中，应用pH值较低，无机盐浓度较高的提取缓冲液可沉淀蛋白质，其中加入2％的β-颈基乙醇可有效地防止次生代谢物质使DNA变色。提取出的DNA样品产率在83．7－197．5ng/mg.f.，DNA质量和纯度较高，260nm/280nm光密度比值在1．8－1．9之间。所得DNA可直接用于限制性内切酶酶切，并可用于随机引物PCR扩增，在优化RAPD各种反应条件研究中，确定 了阔叶榧最佳RAPD反应体系为：15μL反应体系中含有50mmol/L KCl．10mmol/L Tris-HCl(pH9.0）．0．1％Triton-100、3nmolμL MgCl2、0.6nmol/μLdNTPs、6μg/μL BSA、1U Taq酶、60ng引物、50－100ng左右的阔叶榧DNA。     

新疆原油深度脱盐研究 Ⅱ.脱盐工艺条件对脱盐效果的影响

在动态电脱盐模拟装置上,对影响新疆原油脱盐效率的工艺操作参数进行了优化。结果表明,对两种不同性质的原油,其优化的操作参数有较大的差别。影响操作参数的主要因素是油品的粘温性质。胶质和沥青质含量高的原油对破乳剂的需要量也大。对原油性质和工艺参数影响脱盐效率的机理,也进行了初步探讨。     

超高压处理对大肠杆菌DH5α质粒DNA的影响

文章研究了超高压处理对大肠杆菌DH5α菌株质粒pMD-18DNA的影响.大肠杆菌DH5α在不同的压力下于25 ℃处理15 min后,提取其质粒pMD-18DNA,检测质粒在260 nm和280 nm处的吸光度得到其纯度,并进行了琼脂糖凝胶电泳.实验发现:大肠杆菌DH5α质粒pMD-18DNA经100 MPa、200 MPa处理后其A260、A280与未经高压处理样相比吸光度下降;而经300 MPa、400 MPa和500 MPa处理后其吸光度与未经高压处理样相比吸光度上升.通过琼脂糖凝胶电泳分析,大肠杆菌DH5α质粒DNA经高压(300 MPa、400 MPa和500 MPa)后条带增多.实验结果表明超高压处理影响了质粒DNA的结构.     

生长条件对黄瓜线粒体类质粒稳定性的影响

“津新密刺”等一些黄瓜品种的线粒体中存在主基因组以外的3种环形DNA类质粒pC1、pC2和pC3。改变植株生长的温度、pH或以蔗糖溶液代替无菌水培养黄瓜植株,电泳均能检测到上述3种类质粒。应用ImageMaster VDS系统对各类质粒电泳带的密度进行扫描,通过计算3种类质粒的相对拷贝数及类质粒之间的拷贝数比值,分析不同生长条件对黄瓜类质粒稳定性的影响。结果表明,上述3种培养条件均对黄瓜线粒体类质粒的拷贝数有影响,其影响的程度因类质粒而异,pC3与pC1和pC2相比对环境改变更敏感,提示类质粒间的这种差异可能是类质粒复制方式不同引起的。     

玉米螟人工饲养研究Ⅱ.越冬代成虫羽化期不同对其后代的影响

越冬代亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)的老熟滞育幼虫,由田间引入实验室后,终止滞育发育的历期参差不齐,越冬代成虫羽化早的与晚的相差可达20多天。本实验观察了不同时期羽化的成虫,对其子代的发育有何影响。观察结果表明,早期羽化的成虫其所生之后代,正常化蛹率高,可达61.63％;蛹重也较重,雌蛹重106.33±8.51mg((?)±SE,下同),雄蛹重70.76±5.81mg。中期羽化成虫的后代,各项指标居中,正常化蛹率为59.52％,雌蛹重82.33±8.97mg,雄蛹重61.47±8.88mg。而晚期羽化成虫所生之后代,则正常化蛹率最低,只约50.15％,蛹重也最低,雌蛹重79.88±6.67mg,雄蛹重58.18±6.41mg。性比值(雄/雌)从早期,中期至晚期羽化者的后代由高变低,分别为1.05、0.93和0.89,意义不明,可能是雄虫发育一般早于雌虫之故。从本实验结果可以看出,人工饲养玉米螟中,引进野生种群时,宜选用早期终止滞育羽化的成虫所产之卵繁衍后代,生命力较强,种群质量较高。     

不同提取条件对腺苷检测结果的影响研究

腺苷因有药用价值,其含量是部分保健食品的指标之一。鉴于在不同的标准中,提取腺苷的条件不完全一样。通过对比不同提取条件下腺苷的检测结果,得出最佳提取条件。     

新型敏感性水凝胶的研究——Ⅱ.聚合条件对凝胶溶胀性能的影响

研究了聚合条件对所合成水凝胶溶胀性能的影响,实验结果表明,聚合时交联剂用量及聚合介质性质对凝胶的溶胀比影响较大,而对敏感温度则几乎无影响。     

探讨P.Erdos对Bertrand假设的初等证明及对其结果的改进

在原有Bertrand假设的基础上，利用并改进P.Erdos的证明方法，得到了n充分大时比(n，2n)较小的区间(n，n k)(其中n／2＜k＜n)上必有素数的结论，其中常数k的近似取值为[8n／11]．     

CO2对原油的抽提及其对原油黏度的影响

采用高压PVT(压力-体积-温度)试验装置,模拟3种不同性质的原油油样非混相驱时CO2-原油的接触过程,重点考察CO2对原油的抽提作用以及CO2抽提后剩余原油的物性,测定抽提过程中进入气相的轻质组分的体积(抽提油量)、残余油黏度及组成.试验结果表明:CO2优先抽提原油中的轻质组分,原油越轻,CO2的抽提油量越大;抽提后残余油黏度普遍提高,残余油样黏度是原油黏度的1.1～2.0倍,且温度越低,黏度比越大;提高注入压力或降低CO2注入量可防止油气性质差异变大.研究认为,抽提作用对重质原油的黏度影响较大,导致CO2抽提后残余油的采出难度加大,建议CO2驱油技术应优先应用在轻质油藏.     

论苏轼文学思想的基本源泉及对其理论的影响

苏轼作为整个宋代文化精神的的代表,是宋代文坛天才创作巨匠,也是重要的文学理论批评家。他结合自身文学创作实践,对文艺创作理论提出了一系列重要见解,形成较完整的体系。这些文学思想除了来源于苏轼自身学识修养,还深受当时儒释道三教合一的时代思潮和北宋独特的士大夫精神等影响。     

银杏大小年结果的成因及其克服技术

分析造成银杏(Ginkgo biloba L.)大小年结果的原因,认为银杏形成大小年结果现象是由于树体营养失调、授粉过量、品种间成花差异、种植密度不当、雄株数量少、不良的气候因素的影响等造成的.提出加强水肥管理,合理修剪、适量授粉,大年疏果定产、小年保花保果,撑枝吊枝,防旱排涝,综合防治病虫害等技术措施来克服银杏大小年结果的发生.     

果蝇基因组DNA的大规模提取及其RAPD-PCR反应条件的优化

介绍了一种大规模提取高质量果蝇基因组DNA的方法,该法不需液氮研磨,不需匀浆转移,不需高速离心,全部操作在3个1.5μL离心管中完成,所以特别适用于对不同果蝇品系等多样本的大规模提取,以本法提取的DNA为模板建立了RAPD－PCR分析的最佳反应体系,获得了稳定而理想的扩增效果,特别适用于小型昆虫的群体遗传多样性研究。     

用AFM对质粒DNA在云母表面的自组装研究

通过原子力显微镜(AFM)对在云母表面上自然挥干的不同质量浓度的质粒DNA分子进行扫描,原子力显微镜图像显示：当质量浓度为0．1μg／mL时,DNA分子呈现出线性结构,随着质量浓度加大至1μg／mL,DNA分子相互缠绕为网状结构,质量浓度为10μg/mL时,呈现出具有典型的聚合形态,当质量浓度进一步加大到100μg／mL,则呈现出明显的树状脉络结构．通过原子力显微镜对质粒DNA分子的形态表征,可以看出质粒DNA分子具有典型的自组装的特性．     

井下工具选材及热处理生产条件对其性能的影响

1 井下工具的工况及对材料和热处理的要求 石油钻井井下工具在数千米的深井下工作时受力状况复杂,既有拉压应力,也有扭转弯曲应力;在局部位置(如长瓦棱带处)还承受着强烈的磨擦、震击,减震工具还要耐受强烈的震动和冲击。这就决定了井下工具大部分零件的性能要求是:具有优良的综合机械性能,既要有高强度,还必须具有优良的冲击韧性。     

微生物发酵果渣蛋白饲料Ⅱ.发酵工艺条件的研究

对产朊假丝酵母和黑曲霉在苹果渣上混合发酵生产蛋白饲料的条件进行了研究.其最佳工艺条件为:接种比例3:1,接种量2%,pH4～5,最适温度28 C.利用1.5%尿素为氮源,培养基含水量70%左右.在上述条件下发酵48 h以后,蛋白质含量达到30%以上,且有酒香味,适口性好.     

多能硫杆菌RubisCO基因的亚克隆及各种启动子对其表达的影响

将多能硫杆菌（Ｔｈｉｏｂａｃｉｌｕｓｖｅｒｓｕｔｕｓ）ＲｕｂｉｓＣＯ基因从两个方向亚克隆到ｐＢＲ３２２和ｐＫＫ２２３－３载体上,通过酶切的方法对各种质粒的插入方向进行了确证．并进一步对这两种插入方向的质粒在大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）中的表达情况进行了酶活性的测定,该基因片段在ｐＫＫ２２３－３载体的ｔａｃ启动子的启动下,表达活性比ｌａｃ启动子以及ｐＢＲ３２２载体上的Ｐ１和Ｐ２启动子高．     

多能硫杆菌RubisCO基因的亚克隆及各种启动子对其表达的影响

将多能硫杆菌ＲｕｂｉｓＣＯ基因从两个方向亚克隆到ｐＢＲ３２２和ｐＫＫ２２３－３载体上,通过酶切的方法对各种质粒的插入方向进行了确证。并进一步对这两种插入方向的质粒在大肠杆菌中的表达情况进行了酶活性的测定,该基因片段在ｐＫＫ２２３－３载体的ｔａｃ启动子的启动下,表达活性比ｌａｃ妄动子以及ｐＢＲ３２２载体上的Ｐ１和Ｐ２启动子高。     

溶剂浸提法对茶籽油含量及成分的影响

实验以白花油茶籽和红花油茶籽为材料,研究了三氯甲烷、石油醚、丙酮、正己烷4种溶剂对油茶籽的提油量和主要成分的影响,并对经甲酯化处理的茶油进行气相色谱分析.结果表明：不论是白花油茶还是红花油茶均以丙酮溶剂浸提的不饱和脂肪酸含量最高,但是,该溶剂浸提油的色泽等感官品质较差;石油醚浸提的茶油颜色为浅黄色,明亮剔透,没有混浊物或者漂浮物,油质好,且不饱和脂肪酸含量仅次于丙酮居第二位.综合比较分析,石油醚是一种比较理想的浸提溶剂.