导入高梁DNA选育丰产,抗逆小麦新品系及其在RAPD分子验证

通过花粉管通道法，将高粱ＤＮＡ导入小麦，结果在其后代产生了广泛的变异，并从中选育出高产，抗逆，耐盐碱小麦新品系８９１２２，在省级区试中，连续两年表现优良，比统一对照高原６０２增产２４．０８％，比原受体陇春１３号增产２１．０６％，在盐碱地，比当地主栽品种Ｖ２８增产１０．５％，比原受体增产２２．５％，光合效率明显降低，ＲＡＰＤ分析结果表明，新品系基因组出现多态性，并具有供体特异性ＤＮＡ带，表明该小麦新     

野生大豆DNA导入小麦及RAPD分子验证

利用花粉管通道法将野生大豆总DNA导入小麦，以期获得变异系小麦．对小麦球蛋白的SDS—PAGE，印迹表明，冬小麦T2l6#产生了新的蛋白亚基，其分子量为78kD，而有的变异品系一些蛋白亚基消失了；凯氏定氮法和氨基酸分析表明小麦后代T216#的总蛋白含量增加，其氨基酸组成，尤其是赖氨酸含量明显提高．RAPD分析结果表明，新品系基因组出现多态性，并具有供体特异性DNA带，这些变异现象表明该小麦品系为转基因后代．本实验为选育高蛋白、优质的新小麦品种提供了途径．     

导入高梁DNA选育丰产、抗逆小麦新品系及其RAPD分子验证

通过花粉管通道法,将高粱ＤＮＡ导入小麦,结果在其后代产生了广泛的变异,并从中选育出高产、抗逆、耐盐碱小麦新品系８９１２２．在省级区试中,连续两年表现优良,比统一对照高原６０２增产２４．０８％,比原受体陇春１３号增产２１．０６％．在盐碱地,比当地主栽品种Ｖ２８增产１０．５％,比原受体增产２２．５％．光合效率明显提高．ＲＡＰＤ分析结果表明,新品系基因组出现多态性,并具有供体特异性ＤＮＡ带,表明该小麦新品系为转基因后代     

高粱总DNA导入春小麦新品系高分子量麦谷蛋白亚基的变化

通过花粉管通道法将高粱总DNA导入春麦甘麦8号、陇春13号和陇春10号,经过多代选择获得了5个稳定遗传新品系.在高分子量麦谷蛋白亚基分析中,甘麦8号后代89144的高分子量麦谷蛋白亚基发生突变,较其受体多了5 10亚基,而少了2 12亚基;其他几个转基因后代与其受体比较,高分子量麦谷蛋白亚基组成未发生变化;但是各亚基的相对质量分数有较大变化.高分子量麦谷蛋白亚基的组成和各亚基质量分数的变化直接影响小麦品质.本研究对外源总DNA花粉管通道法导入小麦在改良小麦品质方面的作用进行了讨论.     

外源DNA导入麦类作物结实率的研究

以普通小麦和硬粒小麦为受体、以亲缘关系不同的7个材料作供体，研究了花粉管通道法转化植株的当代结实率。结果表明：（1）受体为普通小麦时，在授粉后4-8h转化植株的结实率较高；受体为硬粒小麦时，时间上较为分散。（2）不同供体的转化植株的结实率差异较大；不同浓度的外源DNA导入后的当代结实率也存在较大的差异。（3）在不同的缓冲系统中，PBS系统的转化植株的结实率高于SSC和TE系统。由此可知，在不同条件下，利用花粉管通道法转化植株，其结实率受到一定的影响。     

高粱抗丝黑穗病基因的分子标记RAPD分析

丝黑穗病是影响我国高粱生产发展的主要病害之一,在高粱产区每年都有发生,发病率有时高达70 %,给生产造成很大损失,而选育抗病品种是最为有效的抗病策略.分别以高粱2381恢复系(抗病)、矮四恢复系(感病)的叶片为试材,采用CTAB法提取高粱基因组DNA,并应用RAPD筛选技术对高粱基因进行分子标记.在最佳的RAPD反应体系中共筛选了100个RAPD随机引物,筛选出来27个适宜引物,获得了稳定的RAPD扩增结果及多态性较好的DNA谱带.其中有6个引物对DNA扩增产生了差异谱带.     

花粉管通道法研究(Ⅰ)——影响试验颖花结实率的几个因素

本文研究了利用花粉管通道法向水稻转移外源基因的实验中,影响试验颖花结实率的几个因素,指出了获得较高的结实率所需的温度和相对湿度。     

花粉管通道法转基因技术在甜瓜品种河套蜜瓜上的应用

为建立甜瓜(Cucumis melo L.)简便易行转化频率高的转基因技术,以甜瓜品种河套蜜瓜为受体材料,以含gus基因的植物双元表达载体pPZP221为外源基因供体,进行了花粉管通道法转基因研究.自交授粉后分别于1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 h,切去柱头上端1/3部分,立即滴加质粒DNA溶液,果实成熟后收获转化种子.对T0代植株进行PCR检测,结果表明不同时间处理所得到的T0代植株均具有较高的转化频率,其中授粉后7 h滴加DNA溶液所获得的转化率为28.3%.对一部分PCR阳性的T0代植株基因组DNA进行Southern杂交分析,结果表明所有样品均出现特异性杂交条带,证明外源基因已整合到受体植物基因组中.     

青菜花粉管通道法导入外源DNA的研究初报

采用花粉管通道法，将青菜株系７５Ｆ５、１４号大白菜、紫阳等三个品种的总ＤＮＡ及质粒ｐＡｃｔ１－Ｄ ＤＮＡ导入青菜６０５品系，收获青菜种子。种子发芽后分别提取约两周苗龄的小苗总ＤＮＡ，并经ＥｃｏＲⅠ酶切，以ｇｕｓ基因片段为探针做子杂交，证实了外源ｇｕｓ基因已整合到青菜６０５品系中；田间观察还获得了一株与供体大白菜花形相似的变异株。     

Maize transformation via pollen tube pathway and the inheritance of transgene in progeny

The herbicide-resistant gene als was introduced into maize inbred line Qi319 through pollen-tube pathway. The inheritance of transgene was studied up to 33 generation. Transformation was performed by applying plasmid DNA carrying solution on the severed styles after self-pollination, or just prior to selfpoll/nation. After herbicide screening, PCR and Southern blot analysis, seventeen plants were confirmed positive in TO generation, and sixteen of them were self-bred to construct family to 33 progeny. Through PCR analysis and herbicide screening in offspring, four lines were confirmed following a 3 : 1 Mendelian segregation ratio. In other lines the numbers of positive plants were lower than expected. Therefore, it is necessary to select large population in progeny to produce stable inherited lines when transgene was delivered by pollen tube method.     

南方鲶SME—1细胞系,草鱼CIK细胞系与原鱼种的RAPD图谱比较

研究了ＳＭＥ１和ＣＩＫ细胞系，以及南方鲶、鲶、大鳍、草鱼等６个样品的ＲＡＰＤ图谱，测定了各样品间的Ｎｅｉ相似系数和单匹配相似系数，并绘制了聚类树形图．Ｎｅｉ相似系数更适于细胞系与原种动物的相似性分析；细胞系与原鱼种的相似系数大于种间相似系数；培养时间短的ＳＭＥ１细胞与其原鱼种南方鲶的相似系数大于培养时间长的ＣＩＫ细胞与其原生鱼种草鱼的相似系数．     

DNA分子标记及其在保护生物学中的应用

根据国内外最新资料，论述了限制性片段长度多态性、随机扩增多态性、扩增片段多态性和微卫星等DNA分子标记的基本原理及其优缺点；同时，论述了DNA分子标记在保护生物学中检测遗传多样性、遗传管理及确定分类地位和保护地位、系统进化、性别鉴定、基因图谱和基因定位等方面的应用。     

唐鱼野生与养殖群体遗传多样性的随机扩增多态DNA(RAPD)分析

应用随机扩增DNA多态性(RAPD)技术对唐鱼野生与养殖群体的遗传多样性进行了分析。从40个10BP引物中选取15个用于群体遗传多样性分析,共检测出93个位点,其中46个(49.46%)呈多态;两群体的多态位点比例分别为43.01%和41.94%;用香农指数量化的遗传多样性指数,野生群体(0.23)略高于养殖群体(0.20),平均遗传多样性指数为0.22,群体内和群体间的遗传变异比例分别为85%和15%;群体的遗传相似度高达0.96,彼此间的遗传距离仅为0.04。研究表明,唐鱼目前的种质资源状况令人堪忧,恢复唐鱼有效种群大小、丰富物种遗传多样性是资源保护的基础。