蚕沙中1,3-双脱氧野尻霉素的含量测定

目的:蚕沙中的1,3-双脱氧野尻霉素是一种强效的葡萄糖苷酶抑制剂,客观地建立一种简单且迅速的通过使用HPLC来测定1,3-双脱氧野尻霉素含量的方法。方法:采用荧光监测的RP-HPLC法。结果:在此研究中使用的HPLC检测手段有良好的可靠性、准确度和精密度,其检测限小于72ng。结论:此方法能够非常精确地测定蚕沙中1,3-双脱氧野尻霉素含量及其相关产品。     

枯草芽孢杆菌YYW-1蛋白酶缺陷株诱变与筛选

从羽毛废弃物中筛选出一株高效降解羽毛、产角蛋白酶和蛋白酶的革兰氏阳性芽孢杆菌,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus sublitis),命名为B.sublitisYYW-1。利用紫外线对菌株YYW-1进行诱变,筛选蛋白酶缺陷株,获得蛋白酶活性丧失的诱变株YYW-1-5,其蛋白酶活性残余22.7%,而角蛋白酶活性残余94.7%,没有明显的变化。     

一株产纤维素酶的枯草芽孢杆菌部分生物学特性研究

为了解藏绵羊源产纤维素酶的芽孢杆菌分离株(SWUN 6407)作为微生物添加剂候选菌株的潜力,用PCR扩增16S r DNA序列对其进行鉴定,刚果红染色法测定其产纤维素酶能力,以比浊法测定其对酸和牛胆盐的耐受力,用纸片法测定其对庆大霉素、链霉素、青霉素G、万古霉素、乙酰螺旋霉素、克林霉素、林可霉素、环丙沙星、红霉素、四环素、卡那霉素、磷霉素、替考拉宁、头孢噻肟、利福平、氨苄西林、呋喃妥因、阿莫西林等18种抗菌药物的敏感性.结果显示,SWUN 6407为枯草芽孢杆菌,水解圈与菌落直径的比值为5.8,在p H 2.0环境中存活率为30.5%,在0.7%牛胆盐环境中存活率为64.1%,对18种抗菌药物均敏感.综上可见,SWUN 6407是纤维素酶高产酶菌株,其耐酸、耐胆盐的能力符合微生物添加剂的要求,且不具有耐药性,是一株良好的高产纤维素酶微生物添加剂候选菌株.     

紫外线诱变魔芋软腐菌抑制菌枯草芽孢杆菌的选育

利用紫外线对枯草芽孢杆菌进行诱变。紫外线处理150s时致死率为89.3%,正突变率为104%。筛选出1株菌株对欧文氏杆菌属胡萝卜软腐菌亚种(Erwiniacarotovora var. carotovora,Ecc),的抑菌效果明显。     

枯草芽孢杆菌8-32拮抗菌株的紫外诱变选育

为了获得更高拮抗活性的菌株,以对大豆根腐病病原菌具有较强拮抗作用的Bacillus subtilis8-32为实验材料,采用紫外线诱变方法选育具有更高拮抗活性菌株.紫外诱变条件为30 W紫外线,15 cm辐射距离,诱变时间4 min.结果表明,经初筛和复筛,从诱变后菌落形态差异显著的100个菌株中,筛选得到3株(YB-1,YB-2和YB-3)拮抗活性明显增强的菌株,其拮抗活性与对照相比分别提高了50％,55％和50％,并且传代培养10次后其活性保持不变,说明诱变菌株YB-1,YB-2和YB-3遗传性状稳定.     

产维生素K2贝莱斯芽孢杆菌ND的诱变育种及突变子快速筛选

本研究旨在探索贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)ND诱变育种的最佳条件,确定原生质体的最佳制备条件和融合条件.结果表明,紫外灯下50cm处诱变30s涂布于2.0%LiCl平板的复合诱变,最有利于获得VK2产量提高的突变子.溶菌酶0.1mg/mL于33℃下保温20min,原生质体再生率最高,为41.2%;65℃热处理10min或紫外处理40s,原生质体的灭活率可达到100%;40%PEG-6000在37℃下处理6min原生质体融合频率最高,为9.8%.本研究将分光光度法测定与HPLC法测定提取液中维生素K2(VK2,MK-7)的含量相结合构建了一种可快速筛选产VK2突变体的方法,最终获得一株VK2产量提高31.42%的突变菌株.另外也为贝莱斯芽孢杆菌的诱变育种和原生质体制备提供了研究基础.     

枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的发酵条件优化分析

为获得枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的最佳发酵条件,分别对碳源、氮源、碳氮质量比、发酵时间和培养温度进行了单因素实验,在此基础上对发酵温度、接种量、培养基初始pH值和发酵时间四因素进行了L9(34)正交优化试验.结果表明枯草芽孢杆菌分泌β-甘露聚糖酶的最佳碳源为40 g/L魔芋精粉,最佳氮源为5 g/L酵母抽提物,两者最佳质量比为5∶1,最佳发酵条件为30℃的条件下摇瓶培养28 h;最佳发酵参数组合为发酵温度30℃、接种量5%、培养基初始pH6.5、发酵时间28 h;各因素对枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的影响程度大小依次为发酵时间>发酵温度>接种量>培养基初始pH,其中发酵时间对产酶的影响最为显著.     

一株产伴孢晶体的霉状芽孢杆菌的研究

自济南郊区菜园土中,分离到一株产伴孢晶体的霉状芽孢杆菌。对其进行了形态、培养特征、生理生化反应、血清学反应以及 DNA 的 G+C 含量和 DNA-DNA 杂交率的试验测定。该菌有芽孢,其 DNA 中 G+C 含量为33. 9摩尔%(Tm)。由于该菌产典型的伴孢晶体,初步分析可将其归于苏芸金杆菌类(Baci-llus thuringiensis),并作为一种新亚种,命名为苏芸金杆菌霉状亚种(Baci-llus thuringiensis subsp.mycoides)。     

污水处理芽孢杆菌的抗盐诱变育种技术研究

污染海水的处理是沿海城市生态环境治理中迫切需要解决的问题,培育耐盐污水处理菌种具有重要实践意义.对处理污水的芽孢杆菌Y进行抗盐诱变育种,分别采用紫外线照射、NTG、及60Coγ等方法,选出最佳诱变方法为NTG900μg/m与60Coγ200 Gy的复合处理.     

产α-ALDC的枯草芽孢杆菌原生质体融合条件

通过双亲灭活原生质体融合技术对2株产α-乙酰乳酸脱羧酶的枯草芽孢杆菌3226-5和V-20进行原生质体融合.初步探讨了2菌株较适宜的融()条件.对获得的几百株融合子进行酶活比较,从中得到20株酶活比双亲高的菌株.     

Influence of nano-MgO particle size on bactericidal action against Bacillus subtilis var. niger

Nano-MgO has been widely used as a functionalmaterial in various areas[1,2]. Recently, it was reported[3]that MgO had good bactericidal performance due to theformation of O?2 anions at its surface in aqueous solution.It was shown by the research work of Stoimenov et al.[4]that nano-MgO exhibits high bactericidal activity againstbacteria, spores and viruses after adsorbing halogen gasbecause of its large surface area, abundance of crystal de-fects and positively-charged particles which can r…     

芽孢杆菌乳酸高产菌株UZ3-15的紫外线诱变选育

为了获得乳酸的高产菌株,以实验室前期筛选获得的产乳酸芽孢杆菌Z-3-1为出发菌株,通过紫外线诱变来选育乳酸高产菌株,紫外线诱变条件为30 W紫外灯,30 cm辐照距离,诱变时间为150 s.采用溶钙圈法对诱变后的菌株进行初步筛选,得到在MRS-CaCO3培养基上产生透明圈直径较大的菌株19株.通过对菌株的发酵液进行乳酸...     

He-Ne激光复合诱变选育柠檬酸高产菌

柠檬酸产生菌黑曲霉经多次物理、化学诱变处理后会对其产生一定的抗性,在菌种改良过程中不易得到优良高产菌株。为此,以黑曲霉(Aspergillus niger)28#为出发菌株,采用金属盐类化合物—LiCl处理黑曲霉的孢子,然后用He-Ne激光辐照对柠檬酸发酵菌黑曲霉进行复合诱变。结果表明,各实验组发生了明显的不同变化,说明该方法能诱发黑曲霉细胞的遗传变异,适合于菌种的改良选育。研究采用玉米粉为原料,摇瓶发酵时间72h,发酵温度35±1℃,通过溴甲酚绿指示性平板辅助筛选和摇瓶发酵,筛选出了3株柠檬酸发酵高产突变菌株,柠檬酸产酸率提高了19.29%,转化率从87.07%提高到103.86%,其中菌株L42遗传相对稳定,可作为进一步诱变筛选的出发菌株。     

妥布霉素高产菌的诱变育种

以黑暗链霉菌HA-1为出发菌株,应用紫外线诱变和紫外线复合吖啶噔诱变并结合自身产物梯度平板筛选的方法获得两株高产菌株UZ-90和UAZ-121.它们的总效价分别比出发菌株提高了60%和80%;产物中妥布霉素的含量分别比出发菌株提高了26%和35%.     

海洋枯草芽孢杆菌Bs-1产生多种抗真菌活性物质

从香港清水湾海域中分离到一株能产生抗酵母样真菌和革兰氏阳性菌抗生素的枯草芽孢杆菌菌株Bs—1。对Bs—1产生抗生素条件的研究表明，Bs—1在多种培养基中生长迅速，但只在PDB(马铃薯葡萄糖液体)中产生抗真菌活性物质；活性物质粗提液具有良好的耐热性和酸碱度，121℃加热15min及在pH2和pHl0处理24h仍有相当高的活性；对Bs—1产抗生素的营养条件和影响的理化因子进行了分析；最后用吸附、萃取、离子交换层析和RP-HPLC等技术对此菌的抗菌代谢产物进行纯化，结果发现Bs-1在PDB培养基中发酵时至少产生3种亲水性的抗真菌活性化合物，三在C18反相层析柱上的保留时间差别不大，对HPLC纯化后的其中一种化合物结构的初步分析表明，该化合物含有共轭双键但无任何氨基酸残基，与目前已知的枯草芽孢杆菌产生的抗生素都不相同，很可能是一种新的非肽类抗真菌化合物。     

D-核糖高产菌株的选育

以枯草芽孢杆菌为出发菌,经紫外线诱变处理,选育出莽草酸营养缺陷型突变株Ｂｓ－０９,其发酵产物经物理和化学鉴定为Ｄ－核糖。经碳源和氮源试验发现,该菌株在葡萄糖或山梨糖为碳源,酵母粉或玉米浆为有机氮源,硫酸铵为无机氮源,碳氮比为６的发酵培养其中生长良好。     

鸟苷生产菌的诱变育种及摇瓶发酵条件优化

以枯草芽孢杆菌T1001为出发菌株，经硫酸二乙酯(DES)诱变处理，定向选育出具腺嘌呤缺陷(Ade^-)、蛋氨酸亚砜抗性(MSO^r)、8．氮鸟嘌呤抗性(8-AG^r)等遗传标记的目的突变株TA208．通过正交试验对TA208菌株进行发酵培养基的优化，同时对发酵温度、pH和装液量等条件进行了研究。在最佳条件下，该菌株能积累鸟苷最高可达25．0g/L。     

枯草芽孢杆菌SX3411产抑菌物质的发酵条件优化

枯草芽孢杆菌SX3411菌株自身带有subtilomycin基因簇,其主要的抑菌成分为subtilomycin.该文采用单因素分析法分析了枯草芽孢杆菌SX3411在不同发酵条件和营养成分时对抑菌物质产生的影响.根据单因素分析,对枯草芽孢杆菌SX3411产抑菌物质设计了响应面法分析,通过响应面法获得了最优的发酵条件和最佳...     

产蛋白酶菌株Bacillus subtilis GS-1发酵条件优化及蛋白酶水解应用初步研究

 利用Plackett-Burman (PB)试验和相应面优化方法对枯草杆菌GS-1菌株发酵产蛋白酶的条件进行优化,以期获得高活性的蛋白酶发酵液。同时,将发酵所产蛋白酶用于蛋白水解实验,以进一步考察蛋白酶的水解特性。首先,通过PB试验,筛选出3个影响菌株发酵过程中蛋白酶活力的主要因子(氯化铵、初始pH值及培养温度)。其次,通过响应面优化法,进一步探讨各参数之间的相互关系并最终拟合得出发酵产酶活的方程。结果表明,在氯化铵 (3.768 g/L), 初始pH (5.6) 以及培养温度 22.4 ℃的条件下,发酵液中蛋白酶的最高酶活力能达到372.814 U/mL。水解试验结果表明：相对于植物来源的蛋白,该蛋白酶粗提物对于动物来源的蛋白具有较大的水解偏好型。该蛋白酶粗提物对于由谷氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸或精氨酸所组成的化学键有较强的水解偏好性。以上结果表明：该菌株发酵所产的蛋白酶在蛋白水解加工行业中具有潜在的开发应用价值。