GI和GII诺如病毒ERA的可视化快速检测

诺如病毒（NoV）是常见的食源性病毒之一,只要极少数量的NoV就可以导致机体感染发病,但目前还没有特效的治疗药物和疫苗,因此建立快速检测方法对食品中的NoV进行早期筛查至关重要。本研究首先通过装甲RNA技术将GB 4789.42规定的GI和GII NoV的靶标基因包裹到MS2噬菌体的衣壳蛋白中,制成内含GI和GII NoV两联检测靶标的重组质粒参考样品,其次基于酶促等温扩增（ERA）技术,分别设计了GI和GII NoV基础型ERA和荧光型ERA检测的引物和探针,并通过试验筛选确定了最佳的引物探针组合。从而建立了GI和GII NoV检测ERA显色法和荧光法两种可视化方法,通过肉眼可直接观测结果。进一步对反应程序进行了优化,将ERA显色法和荧光法的扩增时间分别缩短至5 min和8 min。并通过对反应体系的优化,将体系减半,从而降低了检测成本。在此情况下,对核酸参考样品检测的最低灵敏度分别可达10-2、10-3 ng/μL。最后将本研究建立的可视化快速检测方法应用于真实的GI和GII NoV粪便样本检测,并对方法的性能参数进行分析,结果显示：建立的GI和GII NoV ERA可视化快速检测...     

可视化LAMP技术快速检测新冠病毒的方法

根据时代需要,利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplifcation,LAMP)对新冠病毒进行快速检测,以研发出新冠病毒检测试剂盒.通过NCBI公布的新冠基因组序列分析,获得新冠病毒特异性N蛋白基因的序列;根据该序列信息,在线设计的几对环介导等温扩增引物以供筛选,并利用新冠病毒全基因的反转录质粒,同时通过大量的实验尝试,得到较为稳定的环介导等温扩增体系,再加入具有逆转录活性的Bst 3.0 DNA聚合酶,使体系可扩增RNA模板,最后通过加入适量染料,完成反应结果的可视化.通过不断的实验优化,得到了较为稳定的扩增体系如下:2×Lamp Master Mix 12.5μL,Bst 3.0 DNA聚合酶0.5μL,内引物FIP、BIP(10μM)各2μL、外引物F3、B3(10μM)各0.5μL、模板1μL、ddH2 O 7μL,该体系在65℃下水浴加热1 h即可,同时在体系中加入MnCl2溶液(15 mM)1μL、钙黄绿素(500μM)3μL,使反应结果肉眼可断,加入模板的体系变为绿色,而未加模板的体系为棕黄色.结论:本实验研究的可视化LAMP检测新冠病毒的方法可用于对广大人民群众进行新冠病毒核酸检测.     

水质化验技术在我国的发展浅析

水质好坏直接影响到人们的生活用水安全以及身体健康.水源是生命之源,为了从根本上保证水质安全,必须进一步加强水质化验技术的研究与发展,保证检查数据的可靠性与安全性.尤其是近几年来,随着人们生活水平的提高,工业、农业以及第三产业的飞速发展,环境污染以及水源污染已经成为了严重影响到了人们的饮用水安全和生活质量.在这种大环境下,进行水质化验技术的研究迫在眉睫.     

汽车发动机故障的仪器诊断与经验判断

随着汽车发动机诊断与检测技术的不断发展与完善，如何正确处理好仪器诊断与经验判断两者之间的关系就显得非常重要。本文对仪器诊断与经验判断之间相辅相成的关系及检验人员的检测时应注意的问题进行了阐述，并举例加以说明。     

质谱技术的原理及其在海关化验中的应用

质谱技术是结构分析和成分分析不可缺少的工具,尤其是针对未知物的鉴定,在海关化验对进出口商品的鉴定中发挥着至关重要的作用。本文对质谱技术的发展、原理及其在海关化验中的应用进行了介绍。     

艾滋病病毒的核酸检测法

被称为“世纪瘟疫”的艾滋病是获得性免疫缺陷综合症（AIDS）的简称,人类免疫缺陷病毒（HIV）是引起艾滋病的病原体。本文综述了艾滋病的血清学检测方法,尤其对现在普遍采用的三种先进的核酸检测方法PCR、bDNA和NASBA方法的检测原理进行了比较详细的介绍。     

对虾疫病病毒的实验室常规检测方法

对虾疫病病毒的快速检出，是防治暴发性流行病的关键所在。本文简述了利用电镜负染技术，电镜超薄切片技术和聚合酶链反应邓ＰＣＲ技术等检测对虾疫病的具体方法，并且对结果进行了讨论。     

猪瘟病毒分子生物学诊断的研究进展

猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的急性、热性、高度接触性传染病,严重危害我国养猪业。尽管中国很早就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗。但近年来猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变化,很多地区和猪场不断出现非典型猪瘟、温和型猪瘟,给该病的诊断带来了困难。近年来,猪瘟病毒分子生物学诊断方法的研究进展迅速,为猪瘟的快速、准确诊断起到了重要的作用。从聚合酶链式反应技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等方面对猪瘟病毒的分子生物学诊断方法进行了综述。     

环境水体污染物中表面活性剂的仪器检测技术

阐述了环境水体污染物中阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂的各种仪器检测技术(分光光度法、荧光光度法、电化学方法、高效液相色谱法)的原理与方法,并介绍了阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂仪器检测技术研究进展情况.     

汽车发动机故障的仪器诊断与经验判断

随着汽车发动机诊断与检测技术的不断发展与完善,如何正确处理好仪器诊断与经验判断两者之间的关系就显得非常重要。本文对仪器诊断与经验判断之间相辅相成的关系及检验人员的检测时应注意的问题进行了阐述,并举例加以说明。     

从仪器分析技术的某些发展趋势看仪器分析课程教学改革

该文总结了笔者近年来从事仪器分析测试和仪器分析教学工作的实践经验和体会,讨论了仪器分析技术的某些发展趋势,以此为出发点,就当前仪器分析课程教学中存在的一些问题及教学改革的设想提出了自己的看法.     

关于粮食专用检测仪器高效液相色谱仪进样操作的探讨

笔者结合小麦粉中过氧化苯甲酰（面粉增白剂）的测定-高效液相色谱法（GB/T22325-2008）与自身实践进行了总结,愿与各位专家、同行共同探讨手动进样操作时的注意事项,为粮食面粉增白剂的精确检验和粮食安全做出贡献。     

Bst DNA聚合酶的纯化及等温扩增检测体系的构建

Bst DNA聚合酶是等温扩增反应中的一个关键酶,但由于专利限制,目前国内实验室所使用的Bst DNA聚合酶大多需要从国外进口,价格昂贵且长途运输影响酶活性,因此亟需自主生产出Bst DNA聚合酶应用于等温扩增检测技术.通过构建Bst Fragement的原核表达质粒,采用原核蛋白表达系统和His-Tag亲和纯化手段,制备成本低,活性高,特异性强的Bst DNA聚合酶.同时,针对特定的模板,对自制Bst DNA聚合酶的扩增反应进行了进一步优化,用不同的产物鉴定方法对扩增效果进行检测,并最终筛选出该酶最优的扩增反应条件为60 mM K+、30 mM(NH4)2SO4、pH为9.0.最后,验证了Bst DNA聚合酶能用于快速准确检测肺炎支原体、肺炎衣原体,降低了相关病原体核酸检测的成本,为之后核酸检测在基层医疗的更广泛应用提供了条件.     

一种快速判断溢流和井漏的新仪器和新方法

新仪器能在线、连续、精确地测量浆液密度、体积流量、质量流量和累积流量 ,其测量范围和精度分别为 0 .3～ 3.0 g/cm3、0 .3% ,0 .0～ 4 .0 m3/min、0 .3% ,0 .0～ 4 0 0 0 kg/min、0 .3% ,0 .0 0 m3～无穷大 .在新仪器的基础上 ,提出了质量守恒法、密度法和体积法三种判断溢流和井漏的方法 ,其判断的准确性和快速性比现用的体积法有很大提高 .     

猪细小病毒分子生物学诊断技术的研究进展

猪细小病毒是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原之一。它广泛分布于世界各地,给我国乃至全世界的养猪业造成了巨大的经济损失。近年来,猪细小病毒的分子生物学诊断方法的研究进展迅速,为猪细小病毒的快速、准确的诊断起到了重要的作用。从聚合酶链式反应技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等方面对猪细小病毒的分子生物学诊断技术进行综述有助于我们进一步了解这项技术。     

UDG在两种水生动物病毒核酸片段检测中的抗污染效果研究

尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)作为生物体内的DNA修复酶系,能有效水解单链或双链DNA上的尿嘧啶,可用于PCR过程中残留污染物的清除.本研究以PCR预混液试剂盒作为检测工具,以鲤浮肿病和罗非鱼湖病的阳性核酸片段检测为例,探讨了巢式和荧光定量PCR检测时,UDG的抗污染效果.研究结果表明:(1)向PCR反应体系中添加2...     

用微量单管RT-PCR快速检测及定型脊髓灰质炎病毒

介绍一种逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）的简单快速检测和定型脊髓灰质病毒（ＰＶ）的方法，无需提取ＰＶＲＮＡ共用一种缓冲系统，将ＲＴ和ＰＣＲ试剂混合在２０μＬ反应体系中，整个操作可置于一不间断温度循环程度程序中完成，一步法ＲＴ－ＰＣＲ与常ＲＴ－ＰＣＲ及中和抗体试验对ＰＶ的检测结果完全一致，它的检测敏感度可达５ＴＣＩＤ５０／ｍＬ，该法需要时间，费用和污染的都大大减少，而且特别适于临床常规诊断和鉴别