黑曲霉发酵生产果胶酶的研究

本文报道激光诱变提高黑曲霉产生果胶酶的作用，并对产酶条件及提取工艺进行了全面研究。实验表明：在以麸皮为主的培养基中，黑曲霉空变株Ｂ１在３０℃下，经３８－４０ｈ培养，产生果胶酶能力可达２８０００ｕ／ｇ其酶提取总收率能达９０％以上。     

黑曲霉固态发酵生产果胶酶培养条件的研究

对黑曲霉HYA4固态发酵生产果胶酶的培养条件进行了研究,固态发酵培养基组分为:250 mL三角瓶中甜菜渣5 g,黄豆粉5 g,NH4H2PO4 0.4%,FeSO4·7H2O 0.05%.料水比1:2.采用此优化的培养基在培养温度36℃和初始pH自然条件下进行发酵,果胶酶酶活力可达5465.8 U/g(干曲).     

碱性果胶酶生产菌株的产酶条件优化

对自行筛选的碱性果胶酶生产菌培养条件进行了优化.考查了碳源、氮源浓度和接种量对发酵产酶的影响.经单因素实验和正交试验研究,该菌株最佳产酶条件组合为:果胶添加量0.3％、NaNO3添加量0.6％、接种量6％.在此条件下,碱性果胶酶酶活力达到6 079 U/mL.     

果胶酶高产菌株EIM-6的筛选鉴定及其液体发酵产酶条件优化

通过筛选得到一株适合液体深层发酵培养的高产果胶酶菌株EIM-6,基于形态学与ITS序列分子系统进化分析,鉴定为Aspergillus niger.运用单因子实验确定EIM-6产果胶酶最适碳源和氮源.在此基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其产酶的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素.然后通过最陡爬坡实验在上升最高点处由中心组合实验和响应面分析确定其最适产酶条件.实验优化的最优产酶条件为:w(橘皮粉)4.09%,w(麸皮)3.16%,w((NH4)2SO4)0.35%,w(K2HPO4)0.3%,w(CaCO3)0.24%,初始pH 6,接种量107/mL,转速250 r/min,28 ℃培养80 h酶活达30 231 U/mL,与初始相比,酶活提高2.07倍.     

产果胶酶菌株的筛选鉴定及其产酶条件的研究

为筛选果胶高效降解菌株,结合HC比值(透明圈H与菌落直径C的比值)和果胶酶活力测定,从桔子园土壤和腐烂的水果等处筛选得到1株产果胶酶活力较强的菌株M3,结合菌株形态特征观察和ITS rDNA基因序列分析,确定该菌株为聚多曲霉(Aspergillus sydowii).经发酵产酶试验可知,该菌株的最适发酵产酶条件为培养温度30℃,初始pH4.5,接种量(体积分数)7%,培养时间4 d.在该条件下发酵,果胶酶活力可达42.01 U.mL-1.     

黑曲霉As 3.3883菌种的诱变及其发酵条件探索

本文报导了黑曲霉As 3.3883经诱变可得一高产果胶酶的变异株JB513.该变异株经液体发酵制取果胶酶的最适条件是:起始pH 4.0,接种量2×10~4个/mL,通气量为培养基占摇瓶体积的1/5,发酵温度为30℃,发酵时间84h.其时,发酵液的果胶酶活力达11.9μmol·min~(-1)/mL(小试250mL),及12.0μmol·min~(-1)/mL(中试500L).同时发现该发酵液具有纤维素酶的活性.     

黑曲霉Sta—122菌株产纤维素酶的研究

从兰州水烟上分离了一株曲霉菌,它具有分解纤维素的能力。经鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。为了便于应用,我们对它进行了诱变处理,结果CMC和FP活性均有不同程度提高;同时对它的产酶条件和酶学性质也作了研究。     

高压静电场诱变黑曲霉的实验研究

探讨了直流高压静电场对黑曲霉存活率、酶活、诱变率、菌落形态和菌体生长速度的影响.结果表明:高压直流静电场对黑曲霉A3的作用效果极其显著.在同一场强作用下,随着处理时间的增长,相对存活率单调下降;在同一处理时间作用下,随着场强的增大,相对存活率呈非单调性变化.在场强为4.4 kV/cm,处理时间为2 min的条件下,相对存活率最高达到237.5%,正变率最高达到15%,酶活比对照提高15%;在场强为5.6 kV/cm,处理时间为2 min的条件下,相对存活率达到125%,正变率达到8%,酶活最高,比对照提高24%.经高压静电场处理的菌落形态大而饱满,菌体生长速度明显加快.     

果胶酶高产菌Aspergillus niger HYA4的选育

采用紫外线处理黑曲霉(Aspergillus nige)HY4孢子，照射剂量为75s。获得一株高产果胶酶突变株HYA4，在优化的固体发酵条件下酶活力达1285U/g物料，比出发菌株提高了2倍，为亚麻脱胶酶的生产提供了良好的菌株。     

从黑曲霉发酵的果胶粗酶中分离纯化内切聚半乳糖醛酸酶

使用硫酸铵分级沉淀、CM -SephadexC - 5 0弱阳离子、POROSPE疏水层析和POROSHQ2 0强阴离子交换分离技术 ,从黑曲酶发酵的果胶酶粗品中纯化出一种电泳纯的果胶酶 .经SDS -PAGE电泳测定其相对分子量约 41.8kD ,最适pH和最适温度分别为 5 .0和 36℃ .     

小粒咖啡湿法发酵中产果胶酶菌株的筛选鉴定及产酶条件优化

从云南小粒咖啡湿法发酵液中分离得到一株产果胶酶真菌YMU03,并初步鉴定为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus).经响应面分析,该菌株的最佳产酶条件为：蛋白胨21.6 g/L、MnSO₄ 1.5 mmol/L、初始pH 4.3、发酵时间30 h、温度28℃,在此条件下果胶酶活力可达417.3 U/mL,是未优化前果胶酶活力的2.2倍.     

黑曲霉的紫外诱变及其液体发酵产木聚糖酶

黑曲霉A,为出发菌株,经紫外线诱变处理,采用平板培养筛选,获得一产木聚糖酶活力高的茵株.实验通过氮源含量,碳源含量,培养基含量和发酵时间对液体发酵产木聚糖酶的影响分析,得出产木聚糖酶的最优条件,即培养时间60 h,接种量5 mL细胞浓度为5×10°个/mL孢子悬液,温度为28℃,氮源质量浓度4 g/L,底物量为0.55 g,培养液70 mL,此条件下生产的木聚糖酶活力可达到58.305 u/mL.     

黑曲霉β-葡萄糖苷酶菌株的筛选

采用牛津杯平板透明圈法对研究室保藏的17株黑曲霉菌株进行了β-葡萄糖苷酶产生菌初筛,得到5株透明圈相对明显的菌株,经固态发酵产酶复筛及相关纤维素酶活力的检测,选出一株β-葡萄糖苷酶酶活力高、且纤维素酶活力也较高的菌株niger-2,其β-葡萄糖苷酶酶活力为78.75 U/g、纤维素酶(CMC)活力为312.15 U/g...     

黑曲霉产胞外核糖核酸酶的发酵条件的初步优化

研究了几种因素对黑曲霉突变株SA-13-20产胞外核糖核酸酶的影响.单次单因子优化,产酶水平提高了 170%,最高酶活达1 244 U/mL.研究发现磷酸盐抑制核糖核酸酶的生物合成,但促进菌体的生长,并且该菌产胞外核糖核酸酶不受外源核糖核酸的诱导.确定了最佳碳源,氮源及金属离子源分别为复合碳源(葡萄糖+玉米粉),NH4NO3及K2SO4,最佳菌龄为24 h.     

丝裂霉素诱变黑曲霉产植酸酶过程模型化

用均匀设计分析方案,进行丝裂霉素C对黑曲霉化学诱变菌丝体和原生质体诱导产植酸酶选育,并以诱变时间(X_1)和丝裂霉素C的浓度(X_2)建立回归方程．实验筛选出具有4株较高酶活的菌株,诱变菌丝体得到2株酶活是始发菌株183．89％和147．55％;诱变原生质体得到2株酶活是始发菌株395．52％和381． 98％．由响应面模型初步判断,在丝裂霉素C浓度为5～30 mg·L-1和诱变时间45～60 min时,丝裂霉素C 对黑曲霉诱变原生质体选育产植酸酶菌株的效果比对菌丝体诱变效果好．用均匀设计对丝裂霉素C诱变菌丝体和原生质体的效果进行回归分析,所得模型调整后的相关系数分别为89．02％和99．13％,模型拟合程度好,实验误差小,可以用此模型较好的对丝裂霉素C的黑曲霉菌丝体诱变进行分析和预测．     

一株产果胶酶菌株Xg—01的鉴定

从污物中分离出一株兼性厌氧芽孢杆菌，它可产生大量的果胶酶，该菌株生长ｐＨ范围广，生长最高温度为５０℃左右，它适应性强，生长快，在实验室中根据它的菌落形态，个体形态，生理特性和生化反应，生态环境，生活史等作为分类依据。     

脂肪酶菌株筛选、产酶条件优化及粗酶性质研究

从西藏传统食品中分离出一株生产胞外脂肪酶的菌株,通过分子鉴定和形态观察,确定其为黑曲霉AN0512.本文优化了AN0512的产酶条件,并研究了粗酶性质.结果表明,采用植物油1%(v/v)、酵母提取物1%(w/w)、KH2PO40.2%(w/w)、MgSO40.05%(w/w)、KCl0.05%(w/w)等组成的培养基,接种量为1.5%(v/v)时,在28℃、180r/min下培养96h后,发酵液中脂肪酶活性最大达到30IU/mL.在30℃、pH7.0的酶反应条件下粗酶的脂肪酶活性达到最大;在60℃时粗酶仍保留60%以上的脂肪酶活性,显示其较好的耐热性;Ca2+、Fe2+、Co2+、Mg2+、Mn2+能促进粗酶的活性,其中Fe2+的促进作用最大.粗酶液中应含有活性较高的、耐热的低温金属脂肪酶.     

黑曲霉产纤维素酶系各组分特性及酶解条件

采用正交实验法分析出黑曲霉 3.316纤维素酶系各组分最适酶解条件 ,其组合分别为 C1酶 (p H5.0 ,4 5℃ ) ,Cx 酶 (p H3.5,6 5℃ )和 βG酶 (p H4 .5,6 5℃ ) .在液体发酵条件下 ,添加质量分数为 0 .0 0 3的碳酸钙时 ,各组分酶活性最高 ,其中以 C1酶明显增高 ,Cx 酶几乎无影响 ,βG酶则明显降低 .C1和 Cx 比酶活只有在碳酸钙质量分数小于 0 .0 0 5时才有提高 ,βG酶则明显降低 .添加蛋白胨 ,C1和 βG酶的最高酶活在碳酸钙质量分数小于 0 .0 0 3时有增加 ,Cx 酶则无明显变化 .碳酸钙和蛋白胨对各组分最高酶活形成时间均无影响 .在各组分酶分泌规律方面 ,仅有碳酸钙对 C1和βG酶有一定影响