哺乳动物胸腺器官发育及调控

胸腺为T细胞的发育、分化成熟及功能的获得提供重要而复杂的微环境。在胸腺微环境的作用下,T细胞发育成具有自身免疫耐受及MHC限制性的成熟淋巴细胞。T细胞分化成熟过程需要胸腺细胞与起源于胚胎第3咽囊的胸腺上皮细胞(Thymic epithelial cells,TECs)的相互作用。对胸腺器官三维组织结构的建立、胸腺前体细胞的迁入及胸腺的发育等过程的认识,有助于我们对胸腺器官形成的理解,也为胸腺发育缺陷相关疾病的预防及治疗提供重要依据。     

胚胎期蛇胸腺淋巴细胞的发育分化

应用光镜、电镜和细胞计数对胚胎发育期虎斑颈槽蛇胸腺内淋巴细胞的发育分化进行了研究，在胚胎发育１１期，胸腺在内出现淋巴干细胞。从胚胎发育１１期至出生前（１６期），淋巴细胞不断增殖分化，小淋巴细胞细胞逐渐增多，而大淋巴细胞和淋巴细胞逐渐减少，超微结构观察表明，前淋巴细胞和淋巴母细胞具有两种不同的形态结构，这一点和Ｂ淋巴细胞的发育分化相同，反映了细胞功能状态的差异。     

小鼠胸腺髓质单阳性细胞的阴性选择

阴性选择的目的是为了清除自身反应性T细胞,诱导自身耐受的产生.一般认为,阴性选择发生在DP细胞阶段,位于胸腺的皮髓质交界处.通过小鼠腹腔注射抗TCRαβ抗体,建立胸腺阴性选择模型.胸腺细胞表型分析表明,阴性选择不仅包括胸腺皮质的DP细胞,还包括髓质区CD3 + TCRαβ + CD4SP细胞和CD3 + TCRαβ + CD8SP细胞.髓质区SP细胞发生阴性选择的状况呈现"倒三角"的形状,越是早期阶段的亚群细胞对凋亡诱导的抵抗性越低,而随着细胞的逐渐成熟,对凋亡诱导的抵抗性越来越高,晚期的功能成熟细胞则不会发生阴性选择.这一结果对传统的胸腺阴性选择学说是一个补充.髓质区SP细胞阴性选择的目的可能是为了进一步清除自身反应性T细胞,形成精确的T细胞受体库,诱导自身耐受的产生.     

北京鸭腔上囊的研究 Ⅲ 北京鸭腔上囊发育中α-乙酸萘酯酶(ANAE)的分布

石蜡切片α-乙酸萘酯酶(ANAE)染色法用于研究北京鸭胚及胚后早期腔上囊发育的不同阶段。观察了淋巴细胞的ANAE反应特点,并将滤泡上皮和网状上皮成分的ANAE反应与对应的碱性磷酸酶(ALP)染色对比,结果表明:T型ANAE阳性淋巴细胞最初出现在胚胎28天。孵出后,数量略有增加。淋巴滤泡的联滤泡上皮,联滤泡上皮下方以及髓质中央的网状上皮细胞呈M型ANAE阳性,滤泡髓质边缘层及近边缘层的网状上皮细胞ALP阳性,ANAE阴性。值得了注意的是在胚胎发育中,酶染特性不同的两种上皮细胞分别来自于粘膜上皮的表层和基层。讨论了B淋巴细胞在腔上囊中发育的微环境。     

复方灵芝对延缓大鼠胸腺衰退的影响

本研究用生后７—６０ｄ不同发育期的Ｗｉｓｔａｒ大鼠，观察复方灵芝对其延缓胸腺衰退，提高机体免疫能力的影响．运用统计学和组织学方法，观察了其发育和衰退的情况．与对照组相比较，实验组胸腺的重量增加明显，胸腺重和体重的比例也相应增加，生后６０ｄ时皮质与髓质的界限清晰．结果表明复方灵芝具有延缓胸腺衰退的作用．     

双酚A对鸡胚中枢免疫器官发育影响的形态学观察

为进一步研究双酚A(BPA)的毒性作用,本试验对9日龄AA鸡胚和SPF鸡胚尿囊腔注射双酚A,待鸡胚孵化至22日龄,取鸡胚法氏囊和胸腺进行下述各项指标测定和形态学观察。结果显示,与对照组相比较,试验组鸡胚孵出率显著降低,法氏囊指数明显变小(p<0.05);染毒组法氏囊淋巴滤泡个数显著少于对照组(p<0.01),胸腺皮质、髓质厚度极显著小于对照组(p<0.01);光镜观察发现,双酚A染毒组法氏囊淋巴滤泡和胸腺髓质中的髓细胞明显多于对照组,扫描电镜下可见细胞间隙明显增大,显现针孔样结构。研究结果表明,双酚A对AA鸡胚和SPF鸡胚中枢免疫器官有毒性作用,对鸡胚法氏囊和胸腺的发育有显著的抑制作用。     

细胞的增殖与凋亡在胎肺支气管上皮细胞发育过？…

目的：观察不同发育阶段人胎肺支气管粘膜上皮细胞的凋亡，以及增殖细胞核抗原（ＰＣ－ＮＡ）的表达特征，并探讨细胞的凋亡与增殖在胎肺发育中的关系。方法：用原位核酸末端杂交，检测了１６￣３２周人胎肺组织的凋亡细胞阳性表达率，用免疫细胞化学技术检测了同期人胎肺组织的ＰＣ－ＮＡ阳性表达率。结果：人胎肺支气管粘膜上皮细胞在胎肺发育的早、中期（即假腺期和小管期），细胞的凋亡与增殖均明显较晚期旺盛，而且两者均于胎肺     

脊椎动物胸腺上皮细胞异质性的研究进展

从细胞的分布区域、超微结构特点、角蛋白表达、细胞抗原特性、组织化学反应以及上皮细胞林巴细胞的结合方式等方面对脊椎动物胸腺上皮细胞异质性的研究进展作了比较全面的评述，并对进一步的研究进行了讨论。     

异基因皮肤移植对小鼠胸腺细胞亚群的影响

目的观察同种异基因小鼠皮肤移植急性排斥对受体小鼠胸腺细胞亚群组成的影响。方法以BALB/c小鼠作为供体,C57BL/6为受体,建立小鼠同种异基因皮肤移植模型,于术后第7天拆线,第10天取胸腺,制备胸腺单细胞悬液,通过流式细胞仪检测胸腺细胞各个亚群的比例。结果与对照组相比,同种异基因皮肤移植小鼠胸腺明显萎缩,胸腺细胞总数明显减少,胸腺细胞亚群细胞数量显著降低,同时,调节性T细胞及胸腺细胞发育和迁出不同阶段细胞绝对数均减少。结论皮肤移植排斥反应明显抑制受体小鼠胸腺及胸腺细胞的发育。该研究结果提示,急性移植排斥反应对中枢免疫器官胸腺中的T细胞发育分化具有重要影响。     

细胞的增殖与凋亡在胎肺支气管上皮细胞发育过程的观察

目的：观察不同发育阶段人胎肺支气管粘膜上皮细胞的凋亡,以及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达特征,并探讨细胞的凋亡与增殖在胎肺发育中的关系。方法：用原位核酸末端杂交,检测了１６～３２周人胎肺组织的凋亡细胞阳性表达率,用免疫细胞化学技术检测了同期人胎肺组织的ＰＣＮＡ阳性表达率。结果：人胎肺支气管粘膜上皮细胞在胎肺发育的早、中期（即假腺期和小管期）,细胞的凋亡与增殖均明显较晚期旺盛,而且两者均于胎肺发育的第２４周达到最高蜂,以后细胞的凋亡与增殖活动减弱;但凋亡与增殖细胞在不同发育时期定位有不同。结论：细胞的凋亡与增殖行为在胎肺支气管上皮细胞发育分化的整个过程中普遍存在,分工协作,对于胎肺的形态发生及功能完善共同起作用。     

胸腺内双阴胸腺细胞重建动态的数学模型

根据小鼠的胸腺细胞实验数据,建立了描述胸腺细胞（ｔｈｙｍｏｃｙｔｅ）发育过程的数学模型,该模型考虑了胸腺细胞与胸腺基质细胞（ｔｈｙｍｉｃ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ,ＴＳＣ）之间的相互作用,能够模拟ＣＤ４－ＣＤ８－ＤＮ细胞重建动态及正常小鼠胸腺细胞的发育过程,研究表明,模型中的一些参数应该是含有时间延迟的,通过模型研究了胸腺细胞与ＴＳＣ之间亲和力在胸腺选择过程中的阳性与阴性选择中的差异,理论预言与实     

原代和传代培养的人输卵管上皮细胞对小鼠胚胎体外发育的影响

为了检测人输卵管上皮细胞对早期胚胎体外发育的影响，将小鼠２细胞胚胎与人输卵管上皮细胞进行体外共培养．结果显示：无论原代培养还是传代培养的人输卵管上皮细胞都可使胚胎发育率提高，发育速度加快．经传代４次以后的细胞对胚胎发育的促进作用有下降的趋势，所以传代第１至第４代是应用于共培养的最佳选择．同一代细胞中已贴壁稳定生长的细胞对胚胎发育的促进作用比刚经传代尚未贴壁的细胞大．     

Elafin重组腺病毒载体在气道上皮细胞中表达的时相性变化研究

为研究elafin重组腺病毒表达载体Ad～elafin转染气道上皮细胞的特性，探讨其在上皮细胞中表达的时相性变化，运用①应用原代培养技术培养人气道上皮细胞；②Ad—elafin表达载体转染气道上皮细胞；③在转染后不同的时相中，采用荧光显微镜观察报告基因GFP的表达，ELISA法单克隆抗体检测细胞上清液elafin蛋白的表达，Northern膜杂交检测elafin基因mRNA的表达量等方法进行研究．发现：①原代培养人气道上皮细胞约5d即可作为靶细胞。②转染Ad—elafin24h时，荧光显微镜下可见上皮细胞内有少量的GFP表达，随着时间的延长，细胞内荧光逐渐增加，96h时GFP荧光阳性的细胞约为80％。③转染24～96h，实验组细胞上清液elafin的含量高于对照组（p〈0．01）；同时elafinmRNA的水平高于对照组（P〈0．05，0．01），且elafin表达及elafinmRNA水平在一定时间内呈时间依赖性关系。结论：Elafin重组腺病毒表达载体Ad—elafin成功转染人气道上皮细胞，目的基因不仅能在上皮细胞中表达，而且elafin蛋白具有细胞外分泌作用．     

鸡胚胸腺、法氏囊组织免疫功能发育研究

实验选取12-19胚龄的鸡胚和1日龄雏鸡的胸腺、法氏囊,石蜡切片HE染色后,对组织结构发育进行动态连续观察.通过MTT法检测胸腺T淋巴细胞和法氏囊B细胞的增殖率,了解不同胚龄T细胞、B细胞的免疫功能发育的状态.结果表明:随着胚龄的增加,鸡的胸腺和法氏囊发育逐渐完善,免疫功能随之增强;T淋巴细胞、B淋巴细胞的增殖率不断增加.     

家兔B细胞的最早来源部位

采用光镜和电镜技术对不同发育时期的家兔肝脏、骨髓和阑尾中的Ｂ细胞及其动态变化进行了系统观察，结果表明，家兔的胚肝可能是Ｂ细胞最早发生和分化的场所，可能具有与鸟类法氏囊类似的功能．家兔阑尾的淋巴组织在出生后逐渐发育形成，与鸟类法氏囊滤泡髓质部的形成不同，因此，阑尾可能不是Ｂ细胞的最早来源部位，而是外周淋巴器官．     

山羊胚胎的体外发育及冷冻保存研究

采用体外培养的方法，对山羊２～８细胞胚进行培养以后将体外发育至囊胚的胚胎进行冷冻保存，以便探讨山羊早期胚的体外培养方法和冷冻方法对体外发育胚冷冻效果的影响。将胚胎分别放入Ｍ１９９、Ｍ１９９＋输卵管上皮细胞和Ｍ１９９＋输卵管上皮细胞＋ＥＧＦ的培养液中进行培养，选取发育至囊胚期的胚胎分别以甘油和乙二醇为冷冻保护剂进行冷冻保存。结果体外培养胚的囊胚发育率在三个处理组中分别为１２．５％、７０．６％和７６．９％。使用Ｍ１９９处理组与添加输卵管上皮细胞、添加输卵管上皮细胞和ＥＧＦ的处理组之间具有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。冷冻解冻胚的形态正常率和发育率在以甘油和乙二醇为防冻剂的处理组中分别为６８．７、５８．３％和７８．６％、７２．８％。两组之间无明显差异，结果表明，采用与输卵管上皮细胞共同培养的方法能够提高山羊胚胎体外培养的发育率，以甘油和乙二醇为冷冻防冻剂均适合于山羊体外发育胚的冷冻保存，两者相比乙二醇的效果略优于甘油。     

三疣梭子蟹幼全中肠腺发育的组织学和细胞学研究

将蚤状幼体I期（Z1)到仔蟹共六期疣梭子蟹幼体固定,作横切,纵切和平切的连续切片,观察中肠腺的解部学及组织学特征,并研究其细胞的超微结构,三疣梭子蟹的中肠腺起目前,中肠交界处,分左右两部分,每部分三叶,由总管与幽门胃和中肠相通,中肠腺管的长度和数量随幼体发育而增加,管壁的上皮细胞在各期幼体可分为四种类型,E－细胞（胚细胞）,F－细胞（纤维细胞）,R－细胞（吸收细胞）和B－细胞（分泌细胞）,它们在中肠腺管中的分布位置和功能各有不同。     

牛体外受精胚胎与输卵管上皮细胞和卵丘细胞的共同培养

采用四种方法以对牛体外精胚进行培养，以便了解牛输卵上皮细胞和卵丘细胞对牛体外受精胚发育的影响。其中方法１是输卵管上皮细胞培养法，２是卵丘细胞培养法，３是输卵管上皮细胞＋卵丘细胞培养法，４是输卵管上皮＋ＥＧＦ培养法，实验１采用方法１、２和３进行培养，结果采用方法３的囊胚发育率为１９．２％，显著低于采用方法１的整胚发育率。实验２采用方法１、２和４进行培养，结果采用方法１和４的囊胚发育分别为１９．４％和     

P-选择素/P-选择素糖蛋白配体-1与骨髓祖细胞胸腺归巢

骨髓衍生的祖细胞归巢入胸腺是T细胞发育必需的过程,因为胸腺不包含具有自我更新能力的造血干细胞,它需要从血液中添补祖细胞,此过程依赖多级细胞粘附分子和趋化因子的衔接.细胞粘附分子选择素和它的配体PSGL-1在淋巴样祖细胞归巢入胸腺的过程中发挥重要作用.综述了选择素/配体PSGL-1的生物学特征及其相互作用对骨髓祖细胞胸腺归巢及胸腺-骨髓反馈环的影响和作用机制.     

石刁柏愈伤组织类型与形态发生的关系

石刁柏愈伤组织形成和发育可分为5个时期：细胞启动期，细胞分裂期，细胞分化期，形态发生期和衰退老化期，根据愈伤组织中分生细胞的分布状况可将愈伤组织分为6种类型，每类愈伤组织均有不同的形态发生能力，第2类愈伤组织芽分化频率较高，第4类愈伤组织根分化频率较高，第6类愈伤组织胚状体分化频率较高。